大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛素原mRNA原位杂交的形态与计量研究

为了探讨胰岛素水平与消化道溃疡的关系，将成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠制成胃溃疡动物模型，用地高辛标记的ｐｒｏ－ＩｎｓｃＲＮＡ探针原位杂交方法，观察大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛Ｂ细胞内ｐｒｏ－ＩｎｓｍＲＮＡ的变化，并对其杂交信号进行定量分析。结果显示，在胃溃疡模型术后第６和第１０ｄ，胰岛Ｂ细胞内的杂交信号增强，表明在溃疡愈合早期ｐｒｏ－ＩｎｓｍＲＮＡ的表达量增加。结合本室以往的研究结果，初步讨论了胰岛素参与胃溃疡自愈的调节过程及其意义     

应用地高辛标记的cRNA探针原位杂交检测胰岛素mRNA

成年雄性Ｗｉｔａｒ大鼠，用地高辛标记的ｃＲＮＡ探针在胰腺切片上进行原位杂交，以检测胰岛Ｂ细胞胰岛素基因表达产物ｍＲＮＡ；同时并用免疫组织化学法显示相邻切片胰岛素免疫反应阳性细胞，进行比较，胰腺经４％多聚甲醋灌注固定，经Ｂｏｕｉｎ液再固定２０ｈ，常石蜡包埋和切片，经胰岛素ｃＲＮＡ探针杂交的胰腺切片中胰岛Ｂ细胞和核仁呈阳性反应，阳性信号为蓝色颗粒，胰岛其他细胞及胰腺泡细胞为阴性，方法照切片中均无阳性信     

红藻氨酸致大鼠脊髓损伤过程中c—fos mRNA和Fos的表达变化

为探讨即早反应基因在神经损伤过程中的变化规律，用原位分子杂交和ＰＡＰ免疫组织化学方法观察了大鼠脊髓内注射红藻氨酸后１ｈ至１４ｄ的不同时间点，Ｌ１－３脊髓腹，背角神经元中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ和Ｆｏｓ免疫阳性信号的变化。结果表明，ＫＡ致脊髓损伤后２－８ｈ脊髓腹角运动神经元中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达和Ｆｏｓ免疫组织化学阳性反应明显增加，１２ｈ恢复至正常水平，伤后３ｄ又明显增强；而脊髓背角神经元内仅在伤     

细胞内Retinoid结合蛋白mRNA水平在生精过程中的周期性变化

目的 研究大鼠睾丸细胞内视黄醇结合蛋白－Ｉ（ＣＲＢＰ－Ｉ）及细胞内视黄酸结合蛋白－Ⅱ（ＣＲＡＢＰ－Ⅱ）ｍＲＮＡ水平与曲细精管生精上皮周期的相关关系。方法 分别以地高辛标记的大鼠ＣＲＢＰ－Ｉ及ＣＲＡＢＰ－ⅡｃＤＮＡ探针在ＳＤ大鼠睾丸冰冻切片上进行原位杂交,应用激光密度扫描系统对阳性信号进行定量。结果 ＣＲＢＰ－Ｉ及ＣＲＡＢＰ－Ⅱ ｍＲＮＡ在支持细胞（ｓｅｒｔｏｌｉ ｃｅｌｌ,ＳＣ）中表达。ＣＲＢＰ－     

TGF—β上调在Wistar大鼠抑制EAMG发生中的重要作用

用ＡＣｈＲ加ＣＦＡ免疫大鼠后，Ｌｅｗｉｓ大鼠出现典型的临床肌无力，而ＷｉｓｔａｒＦｕｒｔｈ（Ｗ．Ｆ）大鼠不出现任何症状。为阐明Ｗ．Ｆ大鼠对ＡＣｈＲ耐受的机制，检测了表达ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４和ＴＧＦ－βｍＲＮＡ的ＭＮＣ和肌肉ＡＣｈＲ。结果表明，Ｗ．Ｆ大鼠免疫后第５、７周ＰＩＬＮ中ＡＣｈＲ诱导的ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达细胞数比Ｌｅｗｉｓ大鼠低，ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达细胞数比Ｌｅｗｉｓ大鼠高，肌肉ＡＣｈＲ含量比Ｌｅｗｉｓ大鼠高。提示ＩＦＮ－γ和ＴＧＦ－β与ＥＡＭＧ的发生有关，ＴＧＦ－β上调可抑制ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表达，减少肌肉ＡＣｈＲ丢失，进而预防和抑制ＥＡＭＧ发生     

大鼠实验性脾虚证胃粘膜生长抑素mRNA原位杂交研究

为探讨脾虚证时生长抑素分泌失常的机理，用Ｗｉｔａｒ雄性大鼠２４只，分为正常对照组，实验性脾虚组，自然恢复组和中药治疗组。４组动物同时片死，取胃制成恒冷箱切片，以地高辛标记的生长抑素ｃＲＮＡ为探针，用原位杂交法显著胃粘膜Ｄ细胞中的生长抑素ｍＲＮＡ，并对细胞内杂交信号进行了是微分光光度计测定。     

大鼠纹状体边缘区内5—HT2A受体的分布——原位杂交和免疫组织 …

已知纹状体边缘区有密集的５－ＨＴ纤维及终末分布。为了观察５－ＨＴ２Ａ受体ｍＲＮＡ是否在大鼠纹状体边缘区表达，从基因分子水平和细胞水平进一步证明大鼠纹状体边缘区能否合５－ＨＴ２Ａ受体，用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交，研究了大鼠纹状体边缘区的５－ＨＴ２Ａ受体ｍＲＮＡ的表达及分布。原位杂交结果发现５－ＨＴ２Ａ受体ｍＲＮＡ阳性杂交信号在纹状体的分布不均匀，尾壳核只有少量中等大小的阳性胞体，苍白球也     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛A细胞的结构和功能变化

目的　探讨胰岛Ａ细胞参与溃疡自愈调节的可能途径。　方法　应用形态计量、放射免疫测定及透射电镜方法，研究大鼠实验性胃溃疡自愈期间胰岛Ａ细胞的面数密度、超微结构及血清胰高血糖素的变化。　结果　与正常组及盐水组比较，Ａ细胞面数密度于溃疡后６ｄ、１０ｄ 明显增加（Ｐ＜ ０．０１）。溃疡后１４ｄ 开始呈减小趋势，２８ｄ 基本恢复正常。Ａ细胞超微结构变化在溃疡后第６～１４ｄ 较明显，主要表现为：（１）细胞核增大，异染色质减少，核周隙扩张；（２）部分Ａ 细胞粗面内质网增多，有的呈板层状排列，有的扩张成囊泡；（３）部分Ａ 细胞内分泌颗粒增多，大小不等，密度不一。血浆胰高血糖素水平从溃疡后１４ｄ 到２１ｄ 呈增高趋势（Ｐ＜ ０．０１），２８ｄ 时接近正常。　结论　胰岛Ａ细胞的形态和功能变化表明，它通过增加其细胞数目及增强其合成与分泌胰高血糖素的功能，积极参与了胃溃疡自愈的调节过程。     

白介素-1βmRNA在缺血侧大脑半球不同区域表达的比较

目的：比较缺血侧大脑半球尾壳核、视前区和顶叶皮质白介素－１βｍＲＮＡ表达的差异,探讨脑不同区域对缺血敏感性的病理机制。方法：运用原位杂交技术对３０只ＳＤ大鼠进行了研究。结果：缺血侧大脑半球尾壳核、视前区和顶叶皮质微血管内皮细胞和单核／巨噬细胞显示白介素－１βｍＲＮＡ的强杂交信号,尾壳核杂交信号较视前区和顶叶皮质出现早而强。顶叶皮质的白介素－１βｍＲＮＡ阳性信号的高峰也明显迟于尾壳核。结论：白介素－     

大鼠实验性胃溃疡自愈期间垂体远侧部ACTH细胞的免疫电镜研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分为溃疡组和对照组。用免疫电镜包埋后免疫金间接法村记ＡＣＴＨ细胞，研究胃溃疡自愈过程中垂体远侧部ＡＣＴＨ细胞的超微结构变化，结果显示，在实验性胃溃疡第４ｄ，一些ＡＣＴＨ细胞含少量很小的分泌颗粒，沿质膜分布，有较多的ＡＣＴＨ细胞胞质出现许多空泡。溃疡第６ｄ，ＡＣＴＨ细胞的高尔基复合体发达，其扁囊膨大部含中等电子密度的内容物，其内可见金颗粒标记。溃疡６－１０ｄ，较多的ＡＣＴ     

针刺对小鼠巨噬细胞基因表达的效应

目的 为了探讨针刺镇痛效应与细胞免疫的关系,研究了针刺对小鼠巨噬细胞中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＡＮ ｐｐＥＮＫｍＲＮＡ,ｉＮＯＳｍＲＮＡ及ｉＮＯＳ活性的效应。方法 ２０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠被随机分成２组;ａ．用５Ｈｚ电针处理的针刺组;ｂ．未用电针处理的对照组。针刺或牵拉前后用钾离子渗透法检测痛阈。实验采用原位杂交,ＮＡＤＰＨＮＢＴ组织化学,ＲＮＡ斑点印迹及蛋白质斑点印迹技术。应用ＴＬＣ扫描仪扫描斑点印迹信号并作统计学处理。结果 杂交信号和ｉＮＯＳ活性呈现蓝紫色,信号均定位于巨噬细胞的胞质。与对照组相比,针刺组的所有印迹信号均增强,Ｐ〈０．０１。针刺组中ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ,ｐｐＥＮＫｍＲＮＡ,ｉＮＯＳｍＲＮＡ的表达及ｉＮＯＳ的活性与提高的痛阈呈正相关。此外,ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ与ｍＲＮＡ与ｐｐＥＮＫｍＲＮＡ之间的变动呈正     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中胰岛A细胞变化的超微结构研究

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中胰岛Ａ细胞变化的超微结构研究（北京医科大学组织学与胚胎学系，北京１０００８３黄岩，石爱荣）成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１２只，随机分为两组，正常对照组（３只）和溃疡组（９只），后者又分溃疡后６ｄ、１４ｄ和２８ｄ３个时间点。常规电...     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中胃窦粘膜5－HT免疫反应细胞变化的定量研究

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１０２只，分为实验性胃溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在溃疡４、６、１０、１４、２１及２８ｄ分批处死取材，用免疫组织化学ＰＡＰ法显示胃窦粘膜的５－ＨＴ细胞。在光镜下观察胃溃疡自愈过程中，５－ＨＴ阳性细胞的形态和数量变化。结果表明，溃疡组５－ＨＴ细胞数密度在溃疡４～２８ｄ时明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；盐水组在第４ｄ时亦出现增高趋势（Ｐ＜０．０ｌ），但第６ｄ后基本恢复正常。与盐水组比较，溃疡组５－ＨＴ细胞的数密度在各时间点明显高于盐水组（Ｐ＜０．０ｌ）。因而提示：胃窦粘膜５－ＨＴ细胞参于了大鼠实验性胃溃疡自愈过程中的调节作用。     

含GABA_A受体α_6亚单位mRNA神经元在大鼠脑内的生后发育

用原位杂交组织化学方法观察了大鼠小脑皮质和耳蜗核中含ＧＡＢＡＡ受体α６亚单位ｍＲＮＡ神经元的生后发育过程。结果发现小脑在生后发育中，杂交信号在生后第５ｄ最早出现于内颗粒层，在生后第２１ｄ达到高峰并持续至成年期。但在外生发展始终未见到阳性信号。在耳蜗核中，α６亚单位ｍＲＮＡ到生后第７ｄ方出现，其表达水平在此后的阶段内迅速增加，从生后第１４ｄ开始，杂交信号的增强趋于缓慢，至生后第３ｗ达到成年水平。α６亚单位ｍＲＮＡ在小脑及耳蜗核的生后发育早期即有较强表达，提示其与上述两个系统的成熟过程有关。     

大鼠实验性胃溃疡自愈过程中胃窦粘膜5—HT免疫反应细胞变化的定…

用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠１０２只，分为实验性胃溃疡组、盐水对照组和正常对照组。在溃疡４、６、１０、１４、２１及２８ｄ分批死取材，用免疫组织化学ＰＡＰ法显示胃窦粘膜的５－ＨＴ细胞。在光镜下观察胃溃疡自愈过程中，５－ＨＴ阳性细胞的形态和数量变化。结果表明，溃疡组５－ＨＴ细胞数密度在溃疡４～２８ｄ时明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）；盐水组在第４ｄ时亦出现增高趋势（Ｐ＜０．０１），但第６ｄ后基本恢复正常。     

氨基胍对白介素-1β损伤的离体大鼠胰岛细胞的保护作用

目的：观察氨基胍ＡＧ）对白细胞介素－１β（ＩＬ－１β（诱民的胰岛细胞损害的作用。方法：应用体外单层培养的大鼠胰岛细胞，分别检测ＩＬ－１β、ＡＧ及基至胰岛细胞亚硝酸盐生成、胰岛素分泌以及胞内ＤＮＡ、胰岛素含量和细胞活性的影响。结果：以ＩＬ－１β诱导，胰岛细胞亚硝酸盐生成量显著增加，同时胰 素发泌以及葡萄糖刺激的胰遍素释放量均明显减少；胰同细胞内ＤＮＡ、胰钫 含量及细胞活性（ＭＴＴ值）均显著下降；ＡＧ     

大鼠生后发育期间胰岛D细胞的胰岛淀粉样多肽和生长抑素的表达

目的观察大鼠生后发育期间胰岛淀粉样多肽（ｉｓｌｅｔａｍｙｌｏｉｄｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ,ＩＡＰＰ）与生长抑素（ｓｏ－ｍａｔｏｓｔａｔｉｎ,ＳＳ）在胰岛Ｄ细胞的表达。方法免疫组织化学ＰＡＰ邻片单染法。结果从生后１ｄ至成年大鼠胰岛内均有部分ＩＡＰＰ－ＩＲ细胞和ＳＳ－ＩＲ细胞形态相似、定位一致;外分泌部腺泡间散在分布的部分ＩＡＰＰ－ＩＲ细胞也呈ＳＳ免疫反应性。结论大鼠生后发育过程中胰岛部分Ｄ细胞同时表达ＩＡＰＰ和ＳＳ,即两者共存于胰岛Ｄ细胞内     

大鼠胃窦部胃泌素和生长抑素mRNA及其相关蛋白表达的研究

为探讨大鼠胃窦部胃泌素ｍＲＮＡ和生长抑素ｍＲＮＡ在Ｇ、Ｄ细胞的转录及其相关蛋白的表达，用免疫细胞化学和原位杂交技术，检测了大鼠胃窦部Ｇ细胞内的胃泌素和Ｄ细胞内的生长抑素以及它们相应的ｍＲＮＡ。结果显示，大鼠胃窦部的Ｇ、Ｄ细胞位于幽门腺基部，细胞分布不均，单个或多个在一起；胃泌素和生长抑素均匀地分布于胞质内，核内阴性；Ｇ／Ｄ细胞比值在１．３±０．３２～１．５５±０．７５之间，即Ｇ细胞多于Ｄ细胞。ｍＲＮＡ信号染色强度细胞间有差异，呈极性分布，多位于核周或核上胞质内。ｍＲＮＡ阳性细胞数在单位面积内少于Ｇ、Ｄ免疫组织化学显示阳性细胞数，原因可能是由于多聚甲醛的固定对ｍＲＮＡ的降解，降低了ｍＲＮＡ的活性，从而导致某些Ｇ、Ｄ细胞内ｍＲＮＡ不能被检出。该法具有安全、省时、定位准确等优点，适合一般实验室和临床诊断需要     

磷酸肌酸对大鼠心肌缺氧、复氧心肌线粒体肌酸激酶肌膜型亚基mRNA表达水平的影响

目的和方法：以离体心脏灌流法制备大鼠心肌缺氧、复氧模型,提取大鼠心矶ｍＲＮＡ并标记心肌线粒体肌酸激酶肌膜型亚基基因探针,进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交,观察不同缺氧、复氧时ｓＭｉＭｉＣＫｍＲＮＡ的变化及磷酸肌物保护作用。结果：随着缺氧时间的延长,ｓＭｉＭｉ－ＣＫ的ｍＲＮＡ逐渐减少,复氧后ｓＭｉＭｉ－ＣＫ进一步减少,ＰＣｒ能显著改善ｓＭｉＭｉ－ＣＫ的表达量。结论：ＰＣｒ对缺氧、复氧的心肌具有明显的保护作用     

睾丸IL—1β原位杂交及输精管结扎对IL—1βmRNA表达的影响

本实验成功地建立了睾丸ＩＬ－１β原位杂交技术，并在此基础上探讨了输精管结扎对睾丸ＩＬ－１β ｍＲＮＡ表达的影响，结果表明：输精管结扎６ｍｏ组家兔睾丸ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的杂交信号明显地强于假手术对照组，而结扎２５ｍｏ组恢复同龄假手术组水平，杂交信号多分布在曲细精管内的支持细胞和生殖细胞中，有的分布在间质的细胞中，结论：输精管结扎早期睾丸产生ＩＬ－１确有明显增加，２５ｍｏ恢复对照组水平。