用Fluo3-AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca~(2 )浓度及药物对患者胞内Ca~(2 )浓度的影响

用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 的刺激表明 ,病人对外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内 Ca2 浓度升高 ,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道 ,也能促使钙从钙池中释放。上述研究也表明 Fluo- 3是有效的研究胞内 Ca2 变化的荧光探针。 2型糖尿病的发生可能与 Ca2 浓度升高有关 ,患者对外界钙激动剂更敏感     

Ca~(2+)和PKc在巨噬细胞激活过程中作用的初步研究

①目的探讨Ｃａ２＋和蛋白激酶Ｃ（ＰＫｃ）在巨噬细胞激活过程中的作用。②方法在不同试验条件下，用同位素标记的方法，检测巨噬细胞介导的细胞毒作用及ＰＫｃ的活性。③结果胞外Ｃａ２＋络合剂不影响巨噬细胞活化因子（ＭＡＦ）的作用，而钙离子通道剂Ａ２３１８７激活巨噬细胞的作用完全丧失；胞内Ｃａ２＋拮抗剂能够抑制ＭＡＦ或Ａ２３１８７激活巨噬细胞的作用，并且有剂量依赖关系；巨噬细胞激活剂能使胞质中ＰＫｃ活性大大降低，而使膜结合ＰＫｃ活性明显升高。④结论Ｃａ２＋和ＰＫｃ在巨噬细胞激活的信号传递中起重要作用     

海风藤醇B对PAF诱导的兔血小板钙内流和胞内游离钙浓度升…

应用＾４５Ｃａ＾２＋和钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２／ＡＭ进行实验，发现海风藤醇Ｂ（１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１）无论对血小板激活因子（ＰＡＦ）引起的兔洗涤血小板Ｃａ＾２＋内流还是胞内游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）升高均有抑制作用，且呈良好的剂量相关，最大抑制率分别为３７．２％和５０．８％，但对Ａ２３１８７引起的胞内（Ｃａ＾２＋）升高无显著抑制作用。结果表明，海风藤醇Ｂ能选择性拮抗ＰＡＦ诱导的钙内流的Ｃａ＾     

异搏停对小鼠肝癌腹水瘤细胞Hca—F／25／CL—16A3内某些钙稳…

Ｃａ＾２＋与肿瘤代谢有着极为密切的关系。本文报道了钙拮抗剂异搏停作用Ｈｃａ－Ｆ２５／ＣＬ－１６Ａ３细胞后胞内某些钙稳态指标的改变。结果表明，用药后细胞有分化现象且生长速度减慢，同时胞液Ｃａ＾２＋浓度和微粒体Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性明显降低，而线粒体和微粒体贮钙水平显著升高，细胞核钙和细胞总钙明显下降。     

血小板衍生生长因子刺激鼠成骨细胞内Ca^2＋浓度变化的实？…

观察血小板衍生长因子等生长因子对鼠成骨细胞内Ｃａ＾＋浓度变化的影响。方法酶消化法体外分离培养胎鼠成骨细胞,应用ＡＣＡＳ检测成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的变化。结果ＰＤＧＦ可促进成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的瞬时增加;ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ＴＧＦ－β联合应用对成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度升高有协同作用;ＡＣＡＳ能准确测量胞内Ｃａ＾２＋浓度的动态变化,结论ＰＤＧＦ可促进成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度的增加,且与ＢＭＰ,ＴＧＦ－     

低密度脂蛋白对贮脂细胞内钙离子浓度的影响

研究低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对大鼠肝脏贮脂细胞（ＦＳＣ）胞内钙离子浓度的影响及钙拮抗剂对其的干预作用。采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ标记法检测不同浓度ＬＤＬ（１０、２５、５０、１００、２００、５００μｇ／ｍｌ）对ＦＳＣ胞内Ｃａ＾２＋浓度峰值的主在细胞外液含钙或不含钙时，１００μｇ／ｍｌＬＤＬ剂量组对ＦＳＣ胞内Ｃａ＾２＋浓度的影响，同时测定钙拮抗剂尼卡地平和维拉帕米对ＬＤＬ引起增钙的拮抗作用，结果：ＬＤＬ能     

神经降压素的肝细胞保护作用与Ca^2＋的关系

观察了神经降压素（ＮＴ）的肝细胞保护作用与Ｃａ＾２＋的关系。结果显示，醋氨酚使肝细胞Ｃａ＾２＋内流和肝脏钙含量增加，但对于线粒体Ｃａ＾２＋摄取及其钙含量无明显影响，表明肝细胞可能出现胞质Ｃａ＾２＋超载。若在醋氨酚之前给予ＮＴ则使肝细胞Ｃａ＾２＋内流明显减少，肝脏Ｃａ＾２＋含量有降低趋势，但线粒体钙含量显著增加。这些结果提示，ＮＴ通过减少Ｃａ＾２＋内流，增强线粒体贮存Ｃａ＾２＋的能力，部分缓解醋氨酚     

17—β雌二醇影响人脐静脉内皮细胞的纤溶因子活性及其基？…

目的 观察１７－β二醇对人脐静脉内皮细胞纤溶因子活性,基因表达以及胞内钙离子浓度（「Ｃａ＾２＋」）的影响。方法 应用发色底物法,细胞原位杂交技术和激光聚集扫描显微镜。结果 组织型纤溶酶原激活物活性及其基因表达随１７－β－雌二醇浓度的增加崦呈剂量依赖性增加,单个内皮细胞脆内钙离子浓度在高浓度雌二醇作用下先上升后下降,生理２时降低。结论 雌激素可以提高纤溶能力、拮抗胞内Ｃａ＾２＋浓度升高,为雌激素保护     

钙超载大肠系膜血管平滑肌细胞钙离子稳态调节的改变

目的 探讨钙超载模型大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞内是否存在钙离子（Ｃａ＾２＋）稳态调节异常。方法 以Ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋批示剂,应用激光扫描共聚焦显微镜技术,比较钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）与正常Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）静息态的胞浆与核内游离Ｃａ＾２＋水平（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ,〖Ｃａ＾２＋〗ｎ）,以及在多各药物刺激下Ｃａ＾２＋稳态调节的差异。结果 两种Ｖ     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道（ＫＣａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节。结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的ＫＣａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上ＫＣａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,ＫＣａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感。钾通道的开放剂可能有一定的神经细胞保护作用。     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道比（Ｋｃａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节,结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的Ｋｃａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上Ｋｃａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,Ｋｃａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感,钾通道的开放剂可     

Fura－2荧光测定中药有效成分对神经细胞内Ca~（2＋）浓度的变化

将中药有效成分黄芩甙、豆腐果甙、金丝桃甙、熊果酸与大白鼠神经细胞一起进行温育，应用新型钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定神经细胞内游离Ｃａ２＋浓度变化。结果表明，上述中药有效成分均能影响胞内Ｃａ２＋释放和胞外Ｃａ２＋内流。从而有效地保护神经元免受兴奋性毒性作用     

胞内Ca^2＋,Na^＋和ATP的稳定性介导NMDA诱导兴奋保护作用

目的;研究Ｎ－甲基－Ｄ－天冬氨酸（ＮＭＤＡ）诱导大鼠小脑颗凿神经元兴奋毒性保护作用的机制。方法：分别用Ｃａ＾２＋和Ｎａ＾＋敏感的染料Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＳＢＦＩ／ＡＭ测定胞内Ｃａ＾２＋和Ｂａ＾＋浓度「（Ｃａ＾２＋）ｉ,（Ｎａ＾＋）ｉ」,并用反向高效液相法测定胞内三磷酸腺苷（ＡＴＰ）的含量。结果：（１）在ＮＭＤＡ预处理组与非处理组,谷氨酸均迅速触发胞内Ｃａ＾２＋反应高峰,两者无显著性差异。而后在ＮＭ     

2型糖尿病伴高血压患者淋巴细胞内钙的变化

目的 探讨糖尿病患者高血压的发生机理。方法 应用新的荧光指示剂ｆｕｒａ－２测定了２型糖尿病伴高血压患者及２５例不伴高血压者的淋巴细胞内胞内胞浆洲离钙浓度（〖Ｃａ＾２＋〗ｉ），并分析其经岛素的关系。结果 （１）两组患者的（Ｃａ＾２＋）ｉ均高于正常对照组，而伴高血压组又高于不伴高血压组，（２）所有糖尿病患者（伴或不伴高血压）的血清基础胰岛素水平及糖负荷后胰岛素曲线下面积（ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｃｕｒｖ     

牛磺酸对应激心肌损伤大鼠Ca^2＋ Mg的调节作用

目的 探讨心肌损伤时牛磺酸心肌细胞及血浆中Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋浓度的影响。方法 以异丙肾上素诱导心肌损伤为模型,采用原子吸收分光光度法,分别测定对照组、Ｉｓｏ组及Ｔａｕ＋Ｉｓｏ组大鼠心肌和血浆中的Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋浓度。结果 Ｉｓｏ组心肌中的Ｃａ＾２＋浓度明显高于对照组,而牛磺酸能降低心肌升高的Ｃａ＾２＋并降低Ｍｇ＾２＋浓度,Ｔａｕ还有升高血Ｍｇ＾２＋浓度的作用。结论 牛磺酸对心肌的保护作用     

槲皮素对血小板激活时胞浆游离钙的影响

采用钙荧光指示剂Ｑｕｉｎ－２定量测试法观察了槲皮素对血小板胞浆内游离钙浓度的影响。结果发现，槲皮素２５￣４００μｍｏｌ／Ｌ能剂量依赖性地抑制凝血酶引起的血小板胞浆游离钙［Ｃａ＾２＋］ｉ的升高（ＩＣ５０和９５％可信区间为７８．５（４９．５￣１２４．４）μｍｏｌ／Ｌ）；但不能抑制同等剂量凝血酶所引起的胞内贮存钙的释放；抑制钙内流可能是槲皮素抑制血小板聚集和［Ｃａ＾２＋］ｉ升高的机制。     

Fura－2荧光测定中药有效成分对神经细胞内Ca2＋浓度的变化

将中药有效成分黄芩甙、豆腐果甙、金丝桃甙、熊果酸与大白鼠神经细胞一起进行温育,应用新型钙离子荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ测定神经细胞内游离Ｃａ２＋浓度变化。结果表明,上述中药有效成分均能影响胞内Ｃａ２＋释放和胞外Ｃａ２＋内流。从而有效地保护神经元免受兴奋     

梭曼中毒复合缺氧损伤对PC12细胞游离钙的影响

目的：探索钙在梭曼中毒神经细胞损伤中的作用及其机理。方法：采用Ｃａ＾２＋指示剂Ｆｕｒａ－２作为细胞内钙离子荧光探针，检测了梭曼中毒复合缺氧损伤时ＰＣ１２细胞内「Ｃａ＾２＋」的变化。结果：单纯梭曼对细胞内「Ｃａ＾２＋」，无明显影响，在乙酰胆碱和／或谷氨酸存在的情况下，梭曼中毒明显升高「Ｃａ＾２＋」，单纯缺氧也可使「Ｃａ＾２＋」升高，梭曼中毒复合缺氧损伤「Ｃａ＾２＋」升高更加明显。尼莫地平可对抗梭中毒     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca^2＋—Mg^2＋）…

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－Ａｒｐ酶的影响。采用改良的Ｈａｎａｈａｍ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ＾２＋浓度呈正相关，说明（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾     

染铅鼠海马神经原长时程增强过程中Ca^2＋浓度及PKC活性的…

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高叔刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ＾２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ＾２＋浓度，以放射性［ｒ－＾３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。结果：染铅组长时程增强过程中Ｃａ＾２＋浓度明显升高（２３６．４８±６１．８３ｎｍｏｌ／Ｌ，与对照组比较有统计学意义（Ｐ〈０．０００１）。ＰＫＣ活性亦升高（胞