用Fluo3-AM测定2型糖尿病患者淋巴细胞内Ca~(2 )浓度及药物对患者胞内Ca~(2 )浓度的影响

用 Fluo 3- AM为荧光探针 ,测定 2型糖尿病患者淋巴细胞内 Ca2 浓度 ,观察了肾上腺素、多巴酚丁胺、Bay K 864 4、胰岛素等药物对胞内 Ca2 的作用机制。实验表明患者胞浆内 Ca2 浓度与正常人相比显著升高 ;药物对胞内 Ca2 的刺激表明 ,病人对外界钙激动剂更敏感。胰岛素能刺激胞内 Ca2 浓度升高 ,其作用机制是激活钙离子通道。肾上腺素不仅能激活钙离子通道 ,也能促使钙从钙池中释放。上述研究也表明 Fluo- 3是有效的研究胞内 Ca2 变化的荧光探针。 2型糖尿病的发生可能与 Ca2 浓度升高有关 ,患者对外界钙激动剂更敏感     

高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病患者红细胞（Ca^2＋—Mg^2＋）…

为了解高血糖对非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－Ａｒｐ酶的影响。采用改良的Ｈａｎａｈａｍ和Ｌｕｔｈｒａ法测定了红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－ＡＴＰ酶活性。结果表明，ＮＩＤＤＭ患者红细胞膜（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋）－ＡＴＰ酶活性降低，且与空腹血糖、糖化血红蛋白、果糖胺及红细胞变形指数呈负相关，后者与红细胞内Ｃａ＾２＋浓度呈正相关，说明（Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾     

不同频率电磁场对胆囊癌细胞内游离Ca^2＋浓度的影响

目的 探讨不同频率的低功率电磁场对胆囊癌细胞内游离钙离子水平的影响及其意义。方法 采用流式细胞仪检测不同频率电磁场作用后，胆囊癌细胞内游离钙离子（Ca^2 ）水平的变化。结果 经不同频率（0.1MHz-40MHz)电磁场作用后，各实验组均可见细胞内游离Ca^2 浓度上升，0.1MHz和20MHz作用后游离Ca^2 浓度上升最为显著，有显著统计学意义。1MHz和40MHz作用后游离Ca^2 浓度上不明显，无统计学意义。结论 0.1MHz-40MHz游离低功率电磁场作用后引起胆囊癌细胞内游离Ca^2 浓度升高，不同频率电磁场对游离钙离子升高的影响有差异。细胞膜上的不同分子有不同的谐振频率，推测0.1MHz,20MHz两频率可能与Ca^2 离子回旋谐振频率有关，或与之产生某种偶联，对Ca^2 离子明显作用，进而在2细胞和分子水平产生生物效应。     

2型糖尿病患者细胞内钙离子浓度变化的研究

目的:探讨型糖尿病患者血中单个核细胞内2Ca2 浓度变化及其与胰岛素受体活性变化的关系。TPK方法:荧光分光分析法测定例型糖尿病及例正常对照单个核细胞内40220Ca2 浓度,并用酶联免疫法测定单个核细胞胰岛素受体酪氨酸激酶()活性。TPK结果:型糖尿病患者单个核细胞内2Ca2 浓度显著高于正常对照组,胰岛素受体活性显著低于正常对照TPK组。相关分析显示型糖尿病患者单个核细胞内2Ca2 浓度与、显著正相关,与受体活性显著负相关。FBGFINSTPK结论:细胞内Ca2 浓度升高可能通过影响胰岛素受体活性参与胰岛素抵抗的发生。TPK     

用Fura-2双波长荧光法测定小鼠海马细胞内游离钙

目的:探讨小鼠海马细胞分离及细胞内钙离子浓度([Ca2 ]i)的测定.方法:低浓度胰蛋白酶消化、分离海马细胞,采用Ca2 荧光指示剂Fura-2双波长荧光法测定[Ca2 ]i.结果:海马细胞存活率超过95%.细胞外Ca2 1.0 mmol/L时,静息状态下海马细胞[Ca2 ]i为(210±10.7)nmol/L.30 mmol/L KCl可显著增加[Ca2 ]i,并且KCl的这种效应呈一定的剂量依赖关系.结论:低浓度胰蛋白酶消化分离小鼠海马细胞简单、可靠;Fura-2建立的双波长荧光法灵敏、可靠.     

内皮素—1对肾小球系膜细胞内游离钙浓度影响

ET－1激发肾小球系膜细胞（glomerularmesangialcell，GMC）内［Ca2 ］i；升高作用分2个时相，即瞬时峰值升高和缓慢持久升高，对峰值升高呈剂量依赖方式，＜10－10mol／L不引起峰值升高，≥10－10mol／L引起峰值升高，且随着剂量增加，幅度增大。维拉帕米对ET－1激发GMC内［Ca2 ］i峰值升高和持久升高均无抑制作用；细胞内储存钙释放抑制剂TMB－8明显抑制峰值升高，但对持久升高无作用；无钙缓含冲液（1mol／LEGTA处理）对峰值升高无作用，但可完全阻止持久升高作用。结果表明ET－1激发GMC内［Ca2 ］i浓度峰值升高是由细胞内储存钙释放介导的，而持久升高是由细胞外钙流入增加引起的。     

西格列汀对2型糖尿病患者胰岛功能及细胞内皮功能的影响

目的:观察西格列汀对2型糖尿病患者胰岛功能及细胞内皮功能的影响。方法:采用随机数字表法将符合纳入标准的120例患者随机分配为试验组及对照组,各为60例。两组均予以糖尿病饮食、运动控制,并予以口服二甲双胍缓释片治疗,试验组加用西格列汀治疗,对照组加用安慰剂治疗,治疗后对比两组血糖情况(FBG、2hPBG、Hb A1c)变化以及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清一氧化氮(NO)和内皮素(ET-1)水平变化。结果:治疗8周后,(1)两组FBG、2hPBG、Hb A1c均较治疗前改善,试验组血糖改善情况优于对照组(P <0. 05);(2)两组HOMA-IR、NO、ET-1均较治疗前改善,试验组优于对照组(P <0. 05)。结论:西格列汀可有效改善胰岛细胞功能以及细胞内皮状态,与二甲双胍联合应用效果更好,值得临床进一步推广运用。     

钙指示剂Fura－2／AM对血小板功能及细胞内游离钙测定结果的影响

本实验结果表明，以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载家兔洗脱血小板，当Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的浓度低于２μｍｏｌ／Ｌ时，３μｍｏｌ／Ｌ和１０μｍｏｌ／Ｌ花生四稀酸（ＡＡ）诱导的血小板聚集（透光度增加：７２．５±７．８４％）及释放反应（ＡＴＰ释放：１．１２±０．２１μｍｏｌ／４×１０５血小板）不受影响，但随Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度增加，ＡＡ的聚集和释放反应明显减弱（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度对单一血小板内钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的静息水平无影响，但Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为２μｍｏｌ／Ｌ时，ＡＡ诱导的［Ｃａ２＋］ｉ动员最明显。另外，标本中血小板的数量也明显影响［Ｃａ２＋］ｉ的测定结果（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ浓度过高，很可能导致过多的钙离子被螯合，降低了血小板的功能，同时，细胞内游离钙与Ｆｕｒａ－２／ＡＭ的结合过程存在着饱和性。     

用荧光钙离子指示剂fura—2AM检测心肌细胞内游离钙

本实验采用游离钙离子荧光指示剂fura－2AM检测大鼠离体心室肌细胞内游离钙的浓度。其结果如下；（1）KC1可以使心肌细胞内游离钙浓度升高，去掉细胞外液中钙离子，KC1的升钙作用则消失。（2）甲氧胺和咖啡因可使心肌细胞内游离钙浓度升高。二者的作用分别被哌唑嗪和普鲁卡因所对抗。提示该法切实可行。     

IP-10／CXCR3对变应性接触性皮炎小鼠淋巴细胞内[Ca^2＋]的影响

目的:研究干扰素诱导蛋白10(IP-10)对体外培养的变应性接触性皮炎(ACD)小鼠淋巴细胞内[Ca2+]的影响.方法:分离ACD小鼠脾淋巴细胞,体外培养48 h后,分IP-10低、中、高浓度组和对照组,利用荧光发光法对[Ca2+]进行检测.结果:IP-10各组及对照组细胞在培养的60 min内,细胞内[Ca2+]随时间的变化逐渐升高,而IP-10各组间细胞内[Ca2+]变化差异细微.结论:IP-10可以升高ACD小鼠淋巴细胞内[Ca2+],但不同浓度的IP-10对其影响不明显.     

2型糖尿病患者血浆D—二聚体及血小板聚集功能变化的意义

测定５６例２型糖尿病患者血浆Ｄ－二聚体含量及血小板聚集功能（ＰＡｇ）并与２０例健康人进行比较,结果：２型糖尿病患者无论有无血管并发症ＰＡｇ均按对照组明显升高（Ｐ〈０．０１）;合并有血管并发症组血浆Ｄ－二聚体水平显著高于正常对照组（Ｐ〈０．０１）有血管并发症组与无血管并发症组相比,血浆Ｄ－二聚体水平及ＰＡｇ升高更为显著（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）,表明：２型糖尿病患者血液处于高凝状态,血小板功能增     

用Fura-2测定周围血单个核细胞内游离钙浓度

本文用Fura-2测定了周围血单个核细胞内游离钙浓度，并对有关实验条件进行了探讨。对比研究表明，血标本在4℃保存4小时对测定结果无显著影响，测定标本中单个核细胞数以10~5～10~6/ml为宜。认为测定单个核细胞内游离钙浓度对判断单个核细胞的功能状况有一定帮助。     

外源性神经节苷脂GM3对Ca^2^＋—ATP酶及红细胞浆Ca^2^＋—浓度…

研究神经节苷脂ＧＭ３（简称ＧＭ３）对部分纯化的人红细胞膜Ｃａ＾２＾＋－ＡＴＰ酶的作用和对完整兔红细胞浆［Ｃａ＾２＾＋］的影响。结果表明：外源性ＧＭ３对Ｃａ＾２＾＋－ＡＴＰ酶的作用呈浓度依赖性双相调节，即浓度为１－６．５μｍｏｌ／Ｌ时抑制酶活性，浓度大于６．５μｍｏｌ／Ｌ时激活酶活性，ＧＭ３不影响钙调素（ＣａＭ）对酶的激活；ＧＭ３对兔红细胞浆［Ｃａ＾２＾＋］也呈浓度依赖性双相调节即在ＧＭ３浓度低于６     

2型糖尿病合并视网膜病变患者血清脂蛋白（a）的测定及意义

糖尿病视网膜病变（ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ，ＤＲ）是糖尿病慢性并发症，可导致失明。脂代谢异常参与了ＤＲ的发病过程，但脂蛋白（ａ）［Ｌｐ（ａ）］在ＤＲ发病中的意义研究较少。本文测定了９０例２型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者血清Ｌｐ（ａ）的变化，...