当归醇沉淀及其中性组份体外对巨噬细胞分泌TNF—α和IL—1的影响

目的 观察当归醇沉物（ESA）及其中性组分（ESA－1）体外对小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF－α、IL－1的影响。方法 L929细胞株细胞毒法制TNF－α、IL-1。结果 ESA、ESA－1与小鼠腹腔巨噬细胞（MΦ）共同培养可显著增强其TNF－α、IL-1的分泌。在50－20μg/mL浓度范围，ESA的这种作用呈剂量依赖性；ESA－1虽有明显的作用，但未表现出剂量依赖。结论 当归醇沉物及其中性组分体外可增强小鼠腹腔巨噬细胞分泌TNF－α、IL-1。     

藏药结血蒿水提物的免疫抑制作用研究

目的研究结血蒿水提取物（AV-ext）对小鼠免疫反应的抑制作用。方法运用淋巴细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应观察AV-ext体外应用和口服给药对小鼠脾细胞增殖的影响;运用小鼠脾细胞增殖试验,观察AV-ext体外应用对小鼠活化脾细胞分泌IL-2的影响;用明胶酶谱法和粘附分析法,观察AV-ext对小鼠活化T淋巴细胞移动和粘附能力的影响。结果AV-ext在1μg／mL-100μg／mL剂量范围内对脾细胞无明显的细胞毒性,但对刀豆蛋白A（ConA）诱导的小鼠脾细胞增殖反应、混合淋巴细胞反应具有明显的抑制作用,对小鼠活化脾细胞分泌IL-2、小鼠活化T淋巴细胞分泌基质金属蛋白酶9（MMP-9）及粘附能力有显著的抑制作用;连续7d每日口服给予150mg／kg和300mg／kg的AV-ext,能明显抑制小鼠脾细胞增殖及活化脾细胞分泌MMP-9。结论AV-ext能显著抑制小鼠的细胞免疫反应。     

肉苁蓉多糖的纯化及其对T细胞功能调节的研究

研究肉苁蓉主要成分之—─—多糖对小鼠胸腺T细胞的功能调节。方法：采用沉淀法获肉苁蓉粗多糖，以DEAE－SephadexA－50和SephacrylS－200柱层析，获得肉苁蓉多糖（CDPS）。再采用噻唑蓝比色法（MTT）观察CDPS对小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖反应的影响及对正常小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的影响。结果：CDPS纯化后经SephacrylS－200鉴定为单一对称峰。CDPS体外实验，在12．5～200μg／ml浓度范围内，有单独和协同ConA、PHA促进小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用（P＜0．01）。CDPS在100μg／ml浓度时，能显著提高小鼠脾淋巴细胞分泌IL－2的能力．其IL－2活性明显高于对照组（P＜0．01）。结论：肉苁蓉多糖能增加小鼠脾、胸腺淋巴细胞的增殖反应，且与ConA、PHA有协同刺激小鼠胸腺淋巴细胞增殖的作用；并能显著提高小鼠脾脏T淋巴细胞分泌IL－2。     

不同镇痛药对体外培养的大鼠单个核细胞分泌炎性因子的影响

目的：探讨镇痛浓度的吗啡、曲马朵和氯诺昔康对大鼠外周血单个核细胞（PBMC）分泌炎性因子的影响。方法：Ficoll—Hypaque法分离单个核细胞，体外培养24h，分别观察吗啡（50．g／ml）、曲马朵（500ng／ml）和氯诺昔康（300ng／ml）对正常培养和脂多糖（LPS）2μg/ml刺激下PBMC分泌肿瘤坏死因子α（TNF—α）、白细胞介素-6（IL-6）和IL—10的含量变化．结果：吗啡对LPS刺激下和正常培养的PBMC分泌的TNF—α、IL-6和IL-10均有显著抑制作用（P〈0．01）；曲马朵对LPS刺激下PBMC分泌TNF—α、IL-6和IL—10有显著抑制作用（P〈0．01），而对正常培养的PBMC无明显影响；氯诺昔康可显著抑制LPS刺激和正常培养下PBMC分泌IL-6含量（P〈0.01），升高IL—10含量（P〈0.05），对TNF—α无明显影响。结论：吗啡对促炎因子和抗炎因子呈非选择性抑制，不宜用于免疫抑制患者术后镇痛；曲马朵可抑制感染诱发的炎性网子释放，对生理状态下免疫细胞释放炎性递质无显著影响，适合术后可能继发感染患者的镇痛；氯诺昔康可抑制促炎因子IL-6释放，升高抗炎IL—10含量，适合作为伴有炎性反应患者术后镇痛的辅助用药。     

白头翁体外对TNF、IL-1、IL-6产生的影响

目的 :观察白头翁对抑制脂多糖(LPS)刺激肝枯否氏细胞(KC)分泌肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素1(IL 1)和白细胞介素6(IL 6)的影响。方法:大鼠KC培养24h后,加入24孔板内(细胞终浓度为1×106 个/ml)静置4h。分4组:空白对照组:KC培养液 RPMI1640。LPS组:KS培养液 LPS(终浓度为20μg/ml) RPMI1640。白头翁Ⅰ组:KC培养液 LPS(终浓度为20μg/ml) 白头翁(终浓度为100μg/ml)。置37℃、5 %CO2 孵育箱中培养2、4、6、8、12、24h后取上清液,分别测定TNF、IL 1、IL 6的活性。结果:白头翁能明显抑制LPS刺激肝KC分泌TNF、IL 1和IL 6,且这种抑制作用随培养时间的延长而增强,并与药物浓度有关。结论:白头翁可能通过抑制LPS刺激肝KC分泌TNF、IL 1和IL 6而发挥抗炎作用     

皮埋避孕剂对妇女IL—2，IL—6，TNF—α和IFN—γ产生的影响及其意义

目的 探讨左旋18甲基炔诺酮皮埋避孕剂对妇妇女免疫功能的影响。方法 用ELISA法对159例应用皮埋避孕剂的妇女血清中及PBMC体外产生的细胞因子IL-2，IL-6，TNF-μ和IFN-γ水平进行测定。结果 血清中及PBMC自发产生的IL-2，IL-6和TNF—α的水平在用药早期有所变化，IFN-γ的水平未见明显变化。PBMC在体外经PHA刺激后，分泌4种细胞因子的水平与正常对照组无显著性差异。结论 左旋18甲基炔诺酮皮埋避孕剂在用药早期对机体免疫功能有一定影响，但未影响机体免疫功能的正常发挥。     

多西环素对树突状细胞功能的影响

目的探讨多西环素对树突状细胞的免疫表型和功能的影响。方法采集健康人的外周血,密度梯度离心法获得外周血单个核细胞,用rhIL-4和rhGM—CSF诱导分化为树突状细胞,通过LPS诱导树突状细胞成熟。树突状细胞诱导成熟过程中向培养基中分别加入0μg／mL、100μg／mL和300μg／mL的多西环素,通过流式细胞术检测树突状细胞表面HLA—DR、CD83和CD80的表达,用ELISA检测树突状细胞分泌TNF—α、IL-6、IL-12和IL-10,与T细胞共培养检测刺激同种异型T细胞的增值能力。结果与对照组相比,100ng／mL和300ng／mL多西环素处理组诱导树突状细胞表达HLA—DR表达下调。多西环素可下调树突状细胞分泌IL-1B、IL-12、TNF-α和IL-6,也可抑制树突状细胞刺激同种异型T细胞增殖,并呈剂量依赖性。结论多西环素作用于树突状细胞成熟过程,导致树突状细胞下调HLA-DR的表达,抑制树突状细胞分泌IL-1B、IL-6、IL-12和TNF—α,下调其刺激同种异型T细胞的增值能力。     

肺炎克雷伯菌表面成分对细胞因子的影响

目的：了解肺炎克雷伯菌表面成分诱生细胞因子的作用。方法：不同浓度的Kp表面成分刺激小鼠脾细胞诱生细胞因子并用细胞增殖试验和细胞毒法测定其活性。结果：2．5、5、10、20、40μg／ml的Kp表面成分均可刺激小鼠脾细胞分泌IL-2、IL-6、TNFa，高浓度组(20、40μg／m1)可单独刺激IL-6、TNFa的产生，具有类似LPS作用。结论：Kp表面成分可提高机体免疫功能，作为非特异免疫调节剂用于感染防治有良好的应用前景。     

中药启膈散免疫调节作用的体外实验研究

目的：探讨启膈散抗肿瘤作用的机制,为启膈散治疗肿瘤提供客观依据。方法：将实验细胞分为启膈散组、刀豆蛋白A（concanavalinA,ConA）组、脂多糖（lipopolysacchadde,LPS）组和空白对照组,ConA组及LPS组分别给予ConA、LPS5μg／ml,空白对照组不给药,采用MTT法观察50．00、25．00、12．50、6．25、3．13、1．63、0．78mg／ml启膈散水提取物对小鼠脾细胞体外增殖的促进作用,50．00、5．00、0．50mg／ml时对小鼠脾细胞分泌IL-2的影响;50．00、5．00、0．50mg／ml时对小鼠单核细胞分泌TNF-α的影响：50．00、5．00、0．50mg／ml时对NK细胞肿瘤细胞杀伤活性的影响。结果：启膈散显著刺激小鼠脾细胞增殖,且存在明显的量效关系;能显著提高小鼠脾细胞分泌IL-2的活性;促进小鼠单核细胞分泌TNF-α作用显著;可提高NK细胞对靶细胞的杀伤率。结论：启膈散的抗肿瘤活性可能与其免疫调节功能有关。     

雷公藤甲素对外周血单个核细胞分泌促炎、抑炎细胞因子的影响

【目的】探讨雷公藤甲素(triptolide A,TA)对健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)分泌促炎、抑炎细胞因子的影响。【方法】分离培养健康人PBMC,采用脂多糖(LPS,终浓度为1μg/mL)或LPS 植物血凝素(PHA,终浓度为25μg/mL)刺激培养细胞,并给予TA(终浓度为5.4 ng/mL)处理,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中肿瘤坏死因子α(tumour necrosis factor-,αTNF-α)、白介素4(interleukin-4,IL-4)、白介素10(interleukin-10,IL-10)的含量。【结果】TA能抑制LPS或LPS PHA刺激的PBMC分泌TNF-α和IL-10,且对正常人PBMC分泌IL-10的抑制作用强于对TNF-α的抑制作用,但对IL-4的分泌无显著性影响。【结论】雷公藤甲素可不同程度地抑制促炎性细胞因子TNF-α及抑炎性细胞因子IL-10,使促炎、抑炎两种作用趋于平衡。     

桦褐孔菌多糖对脂多糖刺激小鼠巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响

[目的]观察桦褐孔菌多糖对脂多糖(LPS)刺激小鼠巨噬细胞株Raw264.7细胞与小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子表达的影响.[方法]利用桦褐孔菌多糖(40mg/L)处理被LPS(100μg/L)刺激的Raw264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞,采用半定量RT-PCR方法测定促炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1βmRNA的表达;采用ELISA法测定TNF-α和IL-1β水平.[结果]与给予LPS刺激相比较,给予桦褐孔菌多糖和LPS同时刺激的Raw264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平均明显降低(P<0.05);给予桦褐孔菌多糖和LPS同时刺激的Raw264.7细胞株在48 h后与只给予LPS刺激相比较,细胞所分泌的促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β水平均明显下降(P<0.05).[结论]桦褐孔菌多糖对LPS刺激Raw264.7细胞株和小鼠腹腔巨噬细胞促炎性细胞因子TNF-α和IL-1βmRNA表达水平及Raw264.7细胞株促炎性细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌均有抑制作用.     

大黄素对小鼠腹腔巨噬细胞产生的TNFα、IL—1、IL—6及细胞[Ca^2＋]i的影响

目的 研究中药大黄有效成分大黄素对不同状态下的巨噬细胞分泌TNFα、IL-1、IL-6和[Ca^2 ]i的方法。利用脂多糖（lipopolysacchride,LPS)刺激的大鼠腹腔巨噬细胞作为过度炎症反应的体外模型,用生物学方法和荧光分光光度法测定巨噬细胞合成分泌的TNFα、IL-1、IL-6和[Ca^2 ]i。结果 大黄素对TNFα的分泌和[Ca^2 ]i有双向调节作用。结论 大黄素可能具有免疫双向调节功能。     

西洛司特对COPD患者PBMC分泌IL-8和TNF-α的影响

目的研究西洛司特在体外对COPD患者PBMC分泌IL-8和TNF—α的影响。方法从12例COPD患者外周血中分离的单个核细胞（PBMC）分别与不同浓度的西洛司特、氨茶碱和甲基强的松龙共培养24h,用ELISA的方法检测PBMC培养上清的IL-8和TNF-α水平。结果西洛司特和氨茶碱对PBMC分泌IL-8和TNF-α均呈显著的浓度依赖性抑制作用（P〈0．01）。甲基强的松龙对PBMC分泌IL-8和TNF-α则无显著抑制作用。1μmol／L的西洛司特使LPS刺激PBMC活化分泌的IL-8减少54％,15μg／ml的氨茶碱可使其减少39％,两者在治疗剂量所能达到的血药浓度比较有显著性差异（P〈0．01）。1μmol／L的西洛司特使LPS刺激PBMC活化分泌的TNF-α减少51％,15μg／ml的氨茶碱可使其减少32％,两者在治疗剂量所能达到的血药浓度比较有显著性差异（P〈0．01）。结论西洛司特和氨茶碱在体外可显著地抑制抑制PBMC分泌IL-8和TNF-α,且西洛司特的抑制作用显著强于氨茶碱,甲基强的松龙这种抗炎作用不明显,提示西洛司特对COPD患者有显著的抗炎活性,具有广阔的临床应用前景。     

小檗碱对小鼠RAW264．7巨噬细胞极化的影响

目的观察小檗碱对脂多糖（LPS）、白细胞介素－4（IL－4）诱导的小鼠RAW264．7细胞极化的影响。方法体外培养小鼠巨噬细胞RAW264．7,模型组和给药组分别加入LPS （终浓度100 ng／mL）或IL－4（终浓度10 ng／mL）,给药组用终浓度20μmol／L的小檗碱分别进行干预,同时空白对照组给予等体积磷酸盐缓冲液（PBS）。采用荧光定量聚合酶链反应检测精氨酸酶－1（ Arg－1）、一氧化氮合酶（ iNOS）、细胞因子信号传导抑制蛋白2（ SOCS2）、细胞因子信号传导抑制蛋白3（SOCS3）的mRNA表达水平,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测肿瘤坏死因子－α（TNF－α）及IL－10的分泌量。结果小檗碱对LPS刺激的巨噬细胞TNF－α分泌量的增加以及iNOS、 SOCS3 mRNA表达水平的上升均有显著的下调作用（P＜0．05或P＜0．01）;对IL－4刺激的巨噬细胞IL－10分泌量的增加和Arg－1 mRNA表达水平的上升均有显著下调作用（P＜0．05）,而对SOCS2 mRNA的表达无显著影响（P＞0．05）。结论小檗碱能抑制巨噬细胞向M1型极化,亦能抑制巨噬细胞向M2型极化,提示其可能在维持M1／M2动态平衡中发挥调节作用。     

放射治疗荷肾癌小鼠肿瘤生长抑制与脾细胞及肿瘤组织IL-2，IFN-γ和IL-10的关系

目的：观察放射治疗对BALB／c小鼠肾癌移植瘤的抑瘤作用与细胞因子IL-2,IFN-γ和IL-10表达分泌的关系．方法：建立BALB／c小鼠的Renca肾癌细胞移植瘤放射治疗的模型;采用ELISA试剂盒检测小鼠脾淋巴细胞的细胞因子IL-2,IL-10和IFN-γ分泌水平．RT—PCR法检测肿瘤组织IL-2,IL-10和IFN-γ基因的表达水平．结果：治疗组小鼠肾癌移植瘤生长速度较肿瘤对照组明显减慢．放疗组小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ及肿瘤组织IL-2,IFN-γ的表达较肿瘤对照组明显升高,IL-10较肿瘤对照组降低．结论：经放射治疗后,小鼠肿瘤生长受到明显抑制,与放疗引发小鼠脾细胞分泌IL-2,IFN-γ和肿瘤组织IL-2,IFN-γ表达分泌增强,IL-10细胞因子降低有关．     

不同浓度环孢素A对小鼠细胞因子生成的影响

目的 研究环孢素A对小鼠脾细胞不同细胞因子生成的影响及其相互之间的关系。方法利用已建立的Th1细胞反应体系,ELISA法检测在不同浓度环孢素A条件下,BALB／c鼠脾细胞生成IFN-γ、IL-12及IL-4的产量。结果环孢素A抑制IFN-γ分泌的最佳浓度为10^-1μg／ml,环孢素A抑制IFN-γ分泌的同时不影响IL-12的产量。高浓度(10^1μg／ml)环孢素A可促进鼠脾细胞分泌IFN-γ和IL-12。结论环孢素A对小鼠脾细胞分泌IFN-γ有双向调节作用。高浓度环孢素A可促进鼠脾细胞分泌IL-12。环孢素A对IFN-γ的调节可能与IL-12没有直接的关系。     

TLR4对人牙周膜细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的影响

目的观察在内毒素脂多糖(LPS)刺激下,Toll样受体4(TLR4)对人牙周膜成纤维细胞(HPDLC)分泌白细胞介素(IL)中的IL-1β、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法选用100ng/mL、1μg/mL和10μg/mL大肠杆菌LPS分别刺激HPDLC,双抗体夹心法检测刺激后6、12、24、48h时,HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平。运用不同滴度anti-TLR4单克隆抗体预先处理HPDLC,观察1μg/mLLPS刺激下其分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的水平变化。结果LPS刺激HPDLC6h后,即可检测到IL-1β、IL-6和TNF-α,24h达到顶峰,然后逐渐下降,各LPS浓度组规律基本一致;anti-TLR4单克隆抗体预先处理的HPDLC,在1μg/mLLPS刺激下,其产生IL-1β、IL-6和TNF-α的水平明显下降(P<0.05),且与anti-TLR4单克隆抗体滴度呈量效关系。结论TLR4参与了HPDLC的炎症反应过程;anti-TLR4单克隆抗体能有效抑制LPS刺激后HPDLC分泌IL-1β、IL-6和TNF-α的能力。     

几种丝裂原对白细胞介素-2、γ-干扰素和肿瘤坏死因子的诱生作用

以葡萄球菌肠毒素A（SEA）、B（SEB）中国商陆皂甙（PES）、刀豆蛋白A（ConA）、植物血凝素（PHA）和法波脂（TPA）等六种丝裂原诱导扁桃腺淋巴细胞产生白细胞介素2（IL－2），γ干扰素（IFN－γ）和肿瘤坏死因子β（TNF－β），结果表明PHA（100μg／ml）的诱生作用广，效价高，在同一份淋巴细胞中，三者效价均）10μg／ml，与白细胞干扰素（Le－IFN）并用诱生效果更佳；诱生IFN－γ以SEA（0．1μg／ml）最适；诱生TNF－γ以SEB（1μg／ml）为宜。动力学研究表明，以PHA／Le－IFN诱生IL－2与IFN－γ在24小时达高峰，而TNF则于72小时始现高峰。实验表明天然淋巴因子制品，实为多种淋巴因子的混合物，在实用上尚需深入研究。     

商陆皂苷甲对兔滑膜细胞产生IL-1和TNF的影响

目的：研究商陆皂苷甲（EsA)对脂多糖（LPS）刺激兔滑莫膜细胞产生白介素1（IL－1）和肿瘤坏死因子（TNF）的影响。方法：用胸腺细胞增殖法和甲L929细胞作靶细胞的生物测定法,分别检测与EsA共育的受LPS刺激的兔滑膜细胞培养上清中IL－1和TNF的含量。结果：EsA在5－40μg/ml范围内能明显抑制LPS诱导兔滑膜细胞产生IL－1和TNF,结论：EsA可抑制滑膜细胞产生IL－1和TNF的作用提示其可能有助于消除类风湿性关节炎的关节炎症。