397酶联免疫吸附试验和单克隆抗体在紫杉醇类化合物开发研究…

酶联免疫吸附试验和单克隆抗体是当今生物学重要的检测手段和主要的研究工具，曾在医学、生物学等领域作出了重大贡献。这些重要的免疫技术又在药学领域放出了异彩。本文介绍了这些新技术指导从红豆杉属植物中发现新紫杉醇类人的应用实例对紫杉醇类化合物特异的单克隆抗体的制备方法和应用程序。     

斑点酶联免疫吸附试验检测抗独特型单克隆抗体

用斑点酶联免疫吸附试验检测抗独特型单克隆抗体,方法简便、快速,敏感性高,特异性强,所需样品量少,点样后至少可保存一个月;用戊二醛处理硝酸纤维素膜可以增强蛋白吸附。     

抗旋毛虫单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验的建立及初步应用

作者选用1株高特异性抗旋毛虫单克隆抗体2G_8B_(10)H_2,建立了单克隆抗体竞争酶联免疫吸附试验(competitive ELISA,简称cELISA),并进行了初步应用。结果表明:20只日本大耳兔在感染旋毛虫后17天有35％呈现阳性,31天全部阳性.对其中5只感染兔的血清终点滴度观察了142天,了解特异性抗体的变化规律.该规律为病程估计提供了线索。另外,其他蠕虫感染兔血清29份无1例假阳性发生。可以认为,单克隆抗体cELISA是一种灵敏、特异的旋毛虫病免疫诊断方法。     

抗-HBs单克隆抗体细胞系与酶联免疫吸附试验“一步法”检测HBsAg

本文利用杂交瘤技术,经脾内直接注射免疫BALB/c小鼠,与骨髓瘤细胞(Sp 2/0)进行融合,建立了6株抗HEsMcAb,其中5株已能稳定地分泌单克隆抗体,并已得到腹水;5据中4株为抗a,1株为抗d,利用其中2株分别作为包被、酶标抗体,建立了酶联免疫吸附试验(ELISA)“一步法”检测HBsAg技术,经验证,该方法简便、快速、灵敏、特异、稳定。     

单克隆抗体酶联免疫吸附测定甲胎蛋白方法的建立

应用二种抗甲胎蛋白(AFP)不同抗原决定簇的单克隆抗体分别与纤维素及酶结合,建立酶联免疫吸附测定(ELISA)法。应用这种方法测定18例人血清标本,结果与放射酶免疫测定比较,二者趋于一致。此外,本文对单克隆抗体的ELISA与抗血清的RIA进行了比较与讨论。     

酶联免疫吸附试验在梅毒患者检测中的应用价值

①目的　评价酶联免疫吸附试验 (ELISA)在梅毒患者血清学检测中的应用价值。②方法　对 78例梅毒患者和 2 0例系统性红斑狼疮患者血清分别进行苍白螺旋体血球凝集试验 (TPHA)、梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验 (TP -ELISA)和甲苯胺红不加热血清试验 (TRUST) ,对TRUST结果进行OD值分布分析 ,并对 2 0例梅毒患者进行治疗前后变化进行比较分析。③结果　 78例梅毒患者阳性率分别是 1 0 0 %、1 0 0 %、84.6 % ,TRUST阳性标本的TP -ELISAOD值 90 %以上 >1 .0 ,而TRUST阴性的标本其TP -ELISAOD值 90 %以上 <1 .0 ,治疗后TPUST滴度下降 1 7例 ,无变化 2例 ,升高 1例 ,其中有 5例经治疗后完全转为阴性 ,而ELISA测定结果治疗前后均为阳性。④结论　TP -ELISA的敏感性、特异性均优于TRUST ,与TPHA符合率高 ,是梅毒检测和筛查的一种良好方法。     

酶联免疫吸附试验在产前筛查中的应用

目的:探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)方便、快捷、准确地应用于产前筛查。方法:采集孕周15周~23+6周的孕中期孕妇静脉血,分离血清-20℃保存,1周内检测血清中AFP、β-F-HCG的浓度,并通过专用软件进行唐氏综合征(DS)、神经管缺陷(NTD)的风险系数评估。结果:1828例孕妇中筛查出高危169例,阳性率为9.24%,其中DS高危160例,NTD高危8例,两者同为高危者1例。有144例高危者做产前诊断,在这144例产前诊断的孕妇中,确诊DS3例,染色体色体异常5例,异常率为5.56%(8/144)。     

酶联免疫吸附试验在检测志贺氏菌侵袭力中的应用

笔者采用酶联免疫吸附 (ＥＬＩＳＡ)试验检测志贺氏菌的侵袭力 144株 ,取得较好的效果 ,现报告如下。1　材料与方法1.1　菌株　 144株志贺氏菌均为从我院门诊及住院患者粪便中培养出来 ,经生化、血清学检验确定的菌株。1.2　豚鼠角膜 (Ｓｅｒｅｎｙ)试验　选重 2 0 0～ 30 0ｇ ,符合医学试验用的豚鼠 ,按文献报道的方法进行实验[1] 。1.3　抗ＶＭＡ(ＶｉｒｕｉｎｃｅＭａｋｅｒＡｎｔｉｇｅｎ)血清的制备　选取豚鼠角膜试验阳性的志贺氏 2ａ菌株免疫家兔制备抗血清。同时将该菌株连续传代 ,获丧失侵袭力的无毒菌株 ,分别用无毒菌株及加热灭…     

酶联免疫吸附试验异常结果分析及对策

酶联免疫吸附试验是免疫学中最常见的试验方法,操作简单,如在操作中不注意,会引起许多异常结果,如白板、显色弱和灵敏度低、灵敏度过高、板底高、高背景、假阳性等,针对存在的问题进行分析并提出解决的办法,那就是实验前检查试剂和室温平衡试剂、选择合适的防腐剂、质控品或标本按要求储存、检查滤光片、严格操作、注意洗板事项,只有按操作说明书严格操作,才能得到正确的结果。     

大观霉素酶联免疫吸附检测方法的建立

目的建立大观霉素直接竞争酶联免疫吸附（ELISA）分析方法。方法通过大观霉素与载体蛋白偶联,制备免疫原和检测抗原,用杂交瘤技术制备单克隆抗体（mAb）,鉴定mAb的特异性,并用于竞争ELISA检测。结果获得3株能稳定分泌抗大观霉素的单克隆抗体杂交瘤细胞株,大观霉素竞争ELISA检测的下限为1ng／mL。结论抗大观霉素的mAb具有抗原结合特异性,可用于大观霉素竞争ELISA免疫学检测。     

酶联免疫吸附试验一步法检测抗-HBc有关问题探讨

酶联免疫吸附试验(ELISA)是检测抗-HBc的常用方法,根据反应模式可分为一步法和二步法.一步法是将待测样品和酶标记物同时加入到反应孔中进行反应,从而达到简便、快速的目的;二步法是先将样品加入到反应孔中,待反应结束后再加入酶标记物,从而使待测样品的"捕获反应"和酶标记物的"酶联反应"分开进行,因而反应更加稳定,重复性也更好,但反应时间比一步法长.     

标本因素对酶联免疫吸附试验测定的影响

<正>酶联免疫吸附试验即ELISA,是一种常用的固相酶免疫测定方法。其广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:标本因素;试剂因素;操作因素。     

聚合酶链反应与酶联免疫吸附试验诊断结核性脑膜炎

采用脑脊液聚合酶链反应（PCR）与抗结核抗体酶联免疫吸附试验（ELISA）观察结核性脑膜为32例，对照组30例，以评价两种技术的诊断价值。结果显示：PCR与ELISA单独应用时其敏感性及特异性无明显差异（P＞0．05），二者作平行试验时其敏感性高达96．88％，明显高于两者单独应用，特异性和准确性较单独应用时差异无显著性。提示：PCR是诊断结核性脑膜炎较有前途的技术，PCR与ELISA的平行试验具有互补作用。     

酶联免疫吸附试验检测狂犬病病毒抗原研究及其应用

采用两株亲和力强、特异性高的狂犬病病毒抗体建立狂犬病病毒抗原酶联免疫吸附试验（EnzymelinkedimmunosorbentassayELISA）双抗体夹心法，经方阵试验选择出最佳包被抗体浓度为3mg／ml．酶标抗体为1：300.用本法测定432份送检犬唾液标本，检出阳性率为21％，该检测结果与用法国巴斯德试剂盒检测结果一致．表明用ELISA双抗夹心法除了同样具有高特异性和高重复性外，而且还不需要昂贵的荧光显微镜，甚至在无酶标议的情况下也可肉眼判断结果。方便、快速，适用于狂犬病的常规诊断和现场大样本的流行病学调查，有较高的推广、普及价值。     

酶联免疫吸附测定法在医学研究中的新进展

酶联免疫吸附试验（Ｅｎｚｙｍｅ　Ｌｉｎｋｅｄ　Ｉｍｍｕｎｏｓｏｒ－ｂｅｎｔ　Ａｓｓａｙ,ＥＬＩＳＡ）于７０年代初出现,是酶免疫测定技术的一种,也是其在方法上的一个重大改进,用于测定液相内的微量蛋白质,近年来不断改进,还可用于测定其他微量物质。以固一液抗原抗体反应体系为代表的ＥＬＩＳＡ法不仅保证了抗原抗体反应的特异性及定量关系,而且使实验操作简便易行,同时由于标记酶的酶促反应的放大作用,测定的灵敏度可达到ｎｇ甚至ｐｇ水平。近年来ＥＬＩＳＡ法在多个研究领域中得以推广应用和发展,下面就该法在医学研究中…     

酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体分析

目的探讨酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体的临床运用价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(TPPA)对200例确诊的梅毒患者血清进行检测,比较两者灵敏度、特异性、阳性预测值。结果两种方法进行血清检测,TPPA法检出率为97.0%,TP-ELISA法检出率为96.0%,两种检测方法灵敏度、特异性、阳性预测值差异没有统计学意义。结论 ELISA检测梅毒抗体具有较高的准确性,该方法简便,适宜于大样本筛查。     

酶联免疫吸附试验影响HBsAg常见因素与对策

<正>酶联免疫吸附试验(enayme liked immunosorbent assay ELISA)是一种常用的固相酶免疫测定法。ELISA的基本原理是:使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;使抗原(或抗体)于某种酶联结成酶标抗原(或抗体)     

碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶斑点酶联免疫吸附试验方法的建立

本文建立碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)斑点酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对实验条件加以选择,同时检测了鼠源单克隆抗体(McAb)及甲胎蛋白(AFP)及免疫球蛋白G(IgG).结果表明:该法所选用的3种包被液,pH9.5 0.05 mol/L碳酸缓冲液,pH7.2 TBS,pH7.6 PBS无差异。底物溶液以坚固红溶液较理想。6种鼠源McAh腹水稀释8000～32000倍仍能测定。另外,可检测AFP,IgG最小量分别为10.94μg/L和152.03μg/L.APAAP-斑点ELISA可望用于McAb筛选和微量抗原的检测。     

酶联免疫吸附试验HBsAg后带现象的解决方法

在血清免疫学检验中 ,抗原抗体需有一定的比例才出现可见的反应 ,如果比例不适则发生抑制反应的现象 (抑制带 )。抗体过剩称抑制带为前带 ,抗原过剩则称后带 ［１］。现在酶联免疫吸附试验检测ＨＢｓＡｇ 的方法已广泛应用于临床 ,特异性、敏感性均很好 ,且方法更趋向快速简便 ,但也带来某些弊端 ,即出现高滴度ＨＢｓＡｇ标本表现假阴性结果 ,即后带现象［２］现探讨解决方法。１材料与方法１．１材料乙型肝炎Ｅ抗原（ＨＢｅＡｇ）阳性伴乙型肝炎核心抗体（抗—ＨＢｃ）阳性血清标本２７８份 ,乙型肝炎Ｅ抗体（抗—ＨＢｅ）阳性血清标本１９…