杂色曲霉菌变应原分离、鉴定及纯化

目的 对杂色曲霉菌变应原蛋白进行分离、鉴定与纯化.方法 提取杂色曲霉菌蛋白质,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,用免疫印迹(western-blot)鉴定变应原成分,用western-blot法鉴定出了6种变应原,通过离子交换和凝胶过滤层析纯化变应原.结果 碳酸氢盐-盐水提取液(Coca'...     

一氧化氮合酶在β-淀粉样蛋白转基因果蝇中的表达

目的 研究β-淀粉样蛋白转基因果蝇中一氧化氮合酶的表达及作用.方法 对β-淀粉样蛋白转基因果蝇（n=20）和正常对照组野生型果蝇（n=20）分别提取组织总RNA并逆转录为cDNA,通过RT-PCR法定量分析其一氧化氮合酶的表达水平.结果 β-淀粉样蛋白转基因果蝇中一氧化氮合酶mRNA的表达水平为（0.020±0.006）,明显低于野生型果蝇（1.000±0.149）,两者之间的差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 一氧化氮合酶催化生成的一氧化氮是神经系统中一个重要的信使分子,与阿尔茨海默病密切相关.     

苦瓜核糖体失活蛋白的纯化及其诱导HL-60细胞凋亡的研究

目的: 探讨运用假配基亲和层析和凝胶过滤层析相结合的手段纯化苦瓜核糖体失活蛋白(RIP)的可行性,同时观察其抑制HL-60细胞增殖并诱导其发生凋亡的生物学活性。方法: 利用假配基亲和层析法、凝胶过滤层析法提取纯化苦瓜RIP;通过绘制生长曲线和MTT检测观察苦瓜RIP抑制HL-60细胞增殖的活性,运用流式细胞仪检测细胞周期相分布及细胞凋亡率。结果: 运用硫酸铵分级沉淀、Blue Sepharose CL-6B假配基亲和层析、Sephadex-G75凝胶层析等方法提取、纯化得到了高纯度的苦瓜RIP,并且能够获得较高的得率;一定作用剂量的苦瓜RIP不仅能够抑制HL-60细胞的增殖活性,还可以诱导其发生凋亡。结论: 运用假配基亲和层析和凝胶过滤层析相结合的手段提取、纯化苦瓜RIP是可行的;苦瓜RIP可能是通过诱导细胞发生凋亡来发挥其抗肿瘤活性。     

N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对矽肺大鼠肺内P38信号转导通路蛋白表达的调节

目的观察N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对大鼠矽肺纤维化模型Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、转化生长因子-β1(TGF-β1)与P38分裂原活化蛋白酶(MAPK)蛋白表达的影响,探讨AcSDKP拮抗矽肺纤维化可能的作用机制。方法选用非暴露式气管灌注法制作大鼠矽肺模型,并给予AcSDKP。免疫组化法、Western-blot法检测肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、磷酸化P38 MAPK(phospho-P38 MAPK)、P38 MAPK蛋白的表达。结果与对照组相比,矽肺模型组大鼠肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、phospho-P38 MAPK蛋白表达均增加;与矽肺模型组相比,AcSDKP治疗后,大鼠肺组织内Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、phospho-P38 MAPK蛋白表达均明显降低。而各组间比较,P38 MAPK蛋白表达无明显改变。结论AcSDKP可能通过抑制TGF-β1介导的P38 MAPK信号转导途径,从而发挥抗矽肺纤维化的作用。     

2-氨基-4-(S-丁基磺酰亚氨)丁酸对汞急性毒作用影响的实验研究

目的　研究 2 -氨基 - 4 - (S -丁基磺酰亚氨 )丁酸 (BSO)对汞急性毒作用的影响 ,探讨汞的毒作用机制。方法　 32只Wistar大鼠随机分成 4组 :对照组 ,皮下注射生理盐水 ;汞染毒 1组和 2组 ,分别皮下注射HgCl2 溶液 (0 75 ,1 5mg/kg) ;BSO预处理组 ,腹腔注射BSO (0 5mmol/kg) ,4h后皮下注射HgCl2 溶液 (0 75mg/kg)。测定肝、肾皮质和尿中汞含量 ,尿N -乙酰 - β -D氨基葡萄糖苷酶 (NAG)、碱性磷酸酶 (ALP)、乳酸脱氢酶 (LDH)活力和蛋白含量 ,肝和肾皮质谷胱甘肽 (GSH)和丙二醛 (MDA)含量。结果　对照组、汞染毒 1组和 2组尿NAG活力分别为 4 3 6 5 ,6 1 0 6 ,89 2 7U/ gCr ,尿ALP活力分别为2 4 5 2 ,6 2 98,93 0 5U/ gCr,尿LDH活力分别为 0 85 ,6 5 0 ,18 17U/ gCr,尿蛋白含量分别为 0 77,1 2 1,2 2 9mg/ gCr,肾皮质GSH含量分别为 9 0 0 ,12 96 ,16 0 2 μmol/ g蛋白 ,肾皮质MDA含量分别为10 2 2 2 ,12 5 99,2 0 6 34nmol/ g蛋白。BSO预处理组尿NAG、ALP、LDH活力和蛋白含量明显高于对照组和汞染毒 1组 (P <0 0 5 ) ,肝、肾皮质GSH含量明显低于汞染毒 1组 (P <0 0 5 ) ,肝脏MDA含量高于对照组 (P <0 0 5 )和汞染毒 1组 ,肾皮质MDA含量明显高于对照组和汞染毒 1组 (P <0 0 5 )。结论　BS     

衍生化-气相色谱-质谱法测定人体尿液中2-硫代噻唑烷-4-羧酸

人体尿液中的2-硫代噻唑烷-4-羧酸在甲醇和吡啶的催化下与氯甲酸丙酯发生反应,衍生产物经三氯甲烷液液萃取,经HP-5色谱柱分离后,进入质谱分析,以选择离子监测模式(SIM)进行测定。2-硫代噻唑烷-4-羧酸在0.05～10.0 mg/L的浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数0.999,方法检出限为0.01 mg/L,定量下限为0.03 mg/L;批内精密度为2.74%～3.60%,批间精密度为2.36%～3.98%;样品加标回收率为95.0%～97.5%,可以满足二硫化碳接触者尿液中2-硫代噻唑烷-4-羧酸的检测要求。     

二硫化碳接触工人尿2-硫代噻唑烷-4-羧酸排泄规律的研究

目的　探讨二硫化碳 (CS2 )接触工人尿 2 硫代噻唑烷 4 羧酸 (TTCA)的排泄规律 ,为制定CS2 短时接触生物监测提供实验依据。方法　将受试对象分为 3组进行实验 :(1) 14名非CS2 接触者在某CS2 车间暴露 2h后收集不同时段尿液 ,分析其TTCA浓度变化 ;(2 )某CS2 车间 15名CS2 接触工人三班倒休息 4 8h后上班 ,连续收集 3d班前、班中、班末尿 ,分析其TTCA浓度变化 ;(3)收集 4 0名长期接触CS2 工人班末尿 ,分析其TTCA浓度变化与工人接触CS2 的 8h时间加权平均浓度 (PC TWA)的关系。结果　第 1组研究结果显示 ,接触CS2 4h后 (此时已停止接触 2h)尿中TTCA含量达到最高值 [(1.0 3± 0 .72 )mg/gCr];第 2组研究结果显示 ,班前尿TTCA含量极低 [(0 .37± 0 .2 8)mg/gCr],与班中尿 [上班后 4h(1.2 3± 0 .71)mg/gCr]及班末尿 [(1.31± 0 .78)mg/gCr]比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ,而班中尿TTCA值与班末尿相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;第 3组研究结果显示 ,班末尿TTCA值与工人PC TWA之间有直线关系 [Y(TTCAmg/gCr) =1.16 36X(CS2 mg/m3) - 5 .4 116 ]。结论　班末尿TTCA值可作为CS2 接触工人的生物监测指标。     

α-生育酚对精索静脉曲张大鼠生殖细胞Bcl-2蛋白表达的影响及意义

目的　探讨α -生育酚对精索静脉曲张 (VC)大鼠睾丸生殖细胞Bcl-2蛋白表达的影响及意义。方法　采用成年雄性Wistar大鼠复制精索静脉曲张疾病模型 ,4周后开始每日肌注α -生育酚 0 5mg/ (10 0g体重 )共 4周 ,同时设手术对照组 (CG)及假手术对照组 (SOG) ;8周后应用免疫组化SP法检测睾丸组织中Bcl -2蛋白表达。结果　治疗组 (TG)动物左侧睾丸重量显著高于CG(P <0 0 5 ) ,低于SOG (P <0 0 5 ) ;TG睾丸生殖细胞Bcl -2蛋白表达率细胞凋亡率 [左侧 (75 82± 9 10 ) % ,右侧 (77 0 5±11 2 8) % ]显著低于SOG[左侧 (84 3 7± 9 64 ) %、右侧 (85 95± 10 13 ) % ] (P <0 0 5 ) ,而高于手术对照组 [左侧 (60 42± 12 5 7) % ,右侧 (63 3 6± 14 5 4) % ] (P <0 0 5 )。结论　精索静脉曲张大鼠生精细胞Bcl -2蛋白表达降低 ,α -生育酚能提高精索静脉曲张大鼠生殖细胞Bcl-2蛋白表达率 ,并可能通过Bcl-2蛋白通道的负向调节降低细胞凋亡 ,对精索静脉曲张导致的睾丸损害具有一定的保护作用。     

溃疡性结肠炎患者血浆白介素-13检测和临床价值

目的　探讨溃疡性结肠炎 (UC)患者血浆白介素 - 13(IL - 13)临床价值。方法　采用ELISA法检测UC患者和正常健康人血浆IL - 13浓度。结果　 31例UC患者 (16 .6 5± 3.38)pg/ml和 30例健康人 (2 5 .83± 3.5 9)pg/ml血浆IL - 13浓度比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。活动期 (2 1例 )和静止期 (10例 )UC患者血浆IL - 13浓度分别为(12 .0 3± 3.72 )pg/ml和 (18.6 7± 4 .2 2 )pg/ml,两者比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。轻、中、重度活动期UC血浆IL -13浓度相互比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。UC患者血浆IL - 13和血清C -反应蛋白浓度呈负相关 (r=- 0 .5 98,P <0 .0 1)。结论　IL - 13参与UC的炎症过程 ,检测血浆IL - 13可作为判断UC患者病变严重程度和复发的指标之一。     

山东省50种常食野生植物α-生育酚的含量分析

食物成分表 [1]中 ,仅分析了部分野生蔬菜三大营养素 :钙、磷、铁、胡萝卜素、硫胺素、尼克酸及抗坏血酸。本研究对山东省 5 0种常食野生植物的α-生育酚含量进行了测定 ,旨在为开发利用野生资源 ,提供科学依据。1　材　料　与　方　法1 .1　样品　　采集山东省境内可食期的野生植物 ,取其可食部洗净、擦干、塑料袋装 ,贮于冰箱 ( - 4℃ )供分析用。1 .2　仪器与试剂　　无水乙醚 ( AR) ;氢氧化钾 ( 5 0 % ) ;无水硫酸钠( AR) ;甲醇 ( CR) ;乙醇 ( AR) ;α-生育酚标准品 (德国进口 ) ;Waters- 2 0 9高压液相色谱仪 :5 1 0泵 ;490紫外检…