基质金属蛋白酶及其抑制物与肝纤维化

肝纤维化(liver fibrosis)是继发于肝脏炎症或损伤后组织修复过程中的代偿反应，由肝脏细胞外基质(ECM)蛋白聚集所致。这种聚集可以是ECM在肝组织内的沉积增加或降解减少的结果。其中，基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在ECM的合成和降解中扮演着重要角色，并为抗纤维化治疗开辟新的途径。     

基质金属蛋白酶及其抑制物与肝纤维化

肝纤维化(liverfibrosis)是继发于肝脏炎症或损伤后组织修复过程中的代偿反应,由肝脏细胞外基质(ECM)蛋白聚集所致。这种聚集可以是ECM在肝组织内的沉积增加或降解减少的结果。其中,基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制物(TIMPs)在ECM的合成和降解中扮演着重要角色,并为抗纤维化治疗开辟新的途径。     

基质金属蛋白酶与肝纤维化的研究进展

肝纤维化是慢性肝脏疾病的重要病理特征，主要由于肝脏细胞外基质代谢失衡，合成超过降解所致，肝纤维化和原代细胞培养的早期，肝星状细胞（HSC）短暂表达基质金属蛋白酶－3（MMP－3）、MMP－13和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA)并表现为降解基质的表型，肝纤维化进展期和HSC培养的晚期，HSC可表达降解正常肝基质，但抑制肝纤维化中沉积的胶原纤维降解的MMPs成分，同时金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)的表达增加，抑制MMPs的活性，肝纤维化恢复期TIMPs迅速下调，MMPs活性增加。肝基质降解，导致肝纤维化消退。     

血清基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与肝纤维化

在正常肝脏纤维组织中存在着细胞外基质(ECM)的合成与降解的动态平衡。肝纤维化时纤维结缔组织的形成，是由于各种不同致病因子导致ECM合成与降解的失衡所致。基质金属蛋白酶(MMPs)是ECM降解的主要酶系，而其组织抑制因子(TIMPs)通过抑制MMPs，阻止ECM的降解，从而形成或促进肝纤维化。     

基质金属蛋白酶与肝纤维化的研究进展

肝纤维化是慢性肝脏疾病的重要病理特征,主要由于肝脏细胞外基质代谢失衡,合成超过降解所致,肝纤维化和原代细胞培养的早期,肝星状细胞(HSC)短暂表达基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、MMP-13和尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)并表现为降解基质的表型,肝纤维化进展期和HSC培养的晚期,HSC可表达降解正常肝基质,但抑制肝纤维化中沉积的胶原纤维降解的MMPs成分,同时金属蛋白酶组织抑制物(TIMPs)的表达增加,抑制MMPs的活性,肝纤维化恢复期TIMPs迅速下凋,MMPs活性增加。肝基质降解,导致肝纤维化消退。     

基质金属蛋白酶、金属蛋白酶组织抑制剂在心室重构中的作用和调节

心室重构是决定心脏病患者心功能及其预后的主要因素之一 ,是心脏基质成分合成或降解代谢失平衡的结果。心脏基质在维护心脏结构和功能完整性方面起着重要的作用。基质重构引起心肌纤维化和进行性心室扩张 ,最终导致心力衰竭。在心肌中存在的能降解所有心脏基质成分的基质金属蛋白酶 (ＭＭＰｓ) ,是重构过程中心脏基质降解的主要因素。在衰竭的心脏中 ,ＭＭＰｓ活性升高导致纤维胶原降解、细胞外基质重构和进行性心室扩张。ＭＭＰｓ在转录前和转录后水平都可调节 ,而且可通过底物间的相互作用和通过内源性生理抑制剂即金属蛋白酶组织抑制剂 …     

去势对雄性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响

去势对雄性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响@李东$北京军区白求恩国际和平医院肝病科!河北医科大学三院感染科研究生，石家庄050082 @李兵顺$河北医科大学三院感染科 @刘金星$河北医科大学三院感染科 @甄真$河北医科大学三院感染科~~     

基质金属蛋白酶-9与肝纤维化关系的研究进展

肝纤维化是由于基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinasas,TIMPs)比例失调,造成细胞外基质大量沉积在细胞间质中,引起的病理改变。目前研究发现MMP-9在肝纤维化形成过程中有诱发和促进作用,但也有一些相反的意见,认为其具有逆转肝纤维化的作用,与肝纤维化呈负相关。因此,本文就近年来对MMP-9功能的研究作一概述。     

基质金属蛋白酶与高血压肾纤维化研究进展

基质金属蛋白酶是降解细胞外基质的主要蛋白水解酶,在肾脏纤维化疾病中,其表达及活性明显增强,这种情况同样存在于高血压肾脏损伤过程中。基质金属蛋白酶的蛋白水解活性受金属蛋白酶组织型抑制剂的抑制,高血压过程中多种因素调节这两种酶系的水平,最终共同影响细胞外基质的代谢,引起肾纤维化的加重。     

基质金属蛋白酶与肝纤维化的基因治疗

肝纤维化是多种慢性肝病进展的共同病理结果,目前尚无有效的治疗肝纤维化的药物,随着分子生物学的发展和肝纤维化发生机制被不断阐明,基因治疗有望成为一种有效的抗肝纤维化手段。基质金属蛋白酶是一组锌离子依赖的酶家族,能够特异性地分解细胞外基质,减轻肝脏纤维化的程度,为抗纤维化基因治疗提供了新的途径。     

组织金属蛋白酶抑制物在老年大鼠肾小管间质病理损害中的动态变化

目的研究组织金属蛋白酶抑制物(TIMPs)及基质金属蛋白酶(MMPs)在不同鼠龄单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质中的表达变化,探讨其在老年大鼠肾小管间质损害中的作用. 方法选用3月龄(青年)、26月龄(老年)大鼠制备UUO模型,采用病理及免疫组化等方法动态观察不同年龄大鼠UUO术后3、7、14d梗阻侧肾脏的组织学变化和TIMP-1、TIMP-2 、MMP-2、MMP-9等在梗阻肾小管间质中的表达情况. 结果 TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9主要表达于肾小管上皮细胞和间质细胞.在对照组中,TIMP-1、TIMP-2仅微弱表达于青年鼠肾脏中,而在老年大鼠肾脏中其表达显著增加(TIMP-1 0.84±0.23 vs 2.17±0.85,P<0.01; TIMP-2 0.93±0.12 vs 2.31±0.87,P<0.01),MMP-2、MMP-9在正常青年鼠与老年鼠肾脏中均有表达,二者之间差异无显著性(P＞0.05).与对照组相比,3、26月龄大鼠梗阻侧肾脏的TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9在术后各时间点的表达均显著增高(P<0.01),肾小管间质纤维化面积随UUO术后时间的延长而增加,且TIMP-1、TIMP-2的表达与肾小管间质纤维化面积呈正相关(TIMP-1,r=0.816,P<0.01; TIMP-2, r=0.851, P<0.01).与3月龄UUO大鼠比较,26月龄UUO大鼠TIMP-1、TIMP-2在肾小管间质中各时间点的表达均显著增高(P<0.01),肾小管间质纤维化面积在各时间点也明显增加(P<0.01). 结论 TIMPs的高表达所致的MMPs/TIMPs比例失调可能促进老年大鼠肾小管间质损害的进程.     

化学合成经修饰抗TIMP-2小干扰RNA对活化HSCs合成分泌ECM影响

目的观察化学合成经修饰抗金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）小干扰RNA（sinNA）对活化肝星状细胞（HScs）合成分泌细胞外基质（ECM）的影响。方法针对TIMP-2靶基因化学合成siRNA_366和siRNA_687，分别以不同浓度和不同时间转染活化HSCs，筛选基因沉默效率较高的一对。再将此siRNA以不同浓度作用于活化HSCs，检测培养细胞上清液中透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）和羟脯氨酸（Hyp）含量，采用荧光实时定量PCR检测TIMP-2、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Ⅰ型胶原纤维（COLI）和Ⅲ型胶原纤维（COLⅢ）mRNA的表达，western印迹检测TIMP-2蛋白表达。结果siRNA687对TIMP-2的沉默效率高于siRNA366。在活化HSCs中应用化学合成经修饰抗TIMP-2siRNA后，各siRNA组α-SMA、COLⅠ和COLⅢ的表达显著降低，且培养细胞上清液中HA、PCⅢ和Hyp的含量也随之减少。结论化学合成经修饰抗TIMP-2 siRNA能够高效抑制TIMP-2的表达，减少HSCs分泌合成ECM，抑制HSCs活化，是治疗肝纤维化的潜在有效方法。     

Expression of matrix metalloproteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in hepatic stellate cells during rat hepatic fibrosis and its intervention by IL-10

AIM: To investigate the expression of matrix metallopr-oteinase-2 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in hepatic fibrosis and the antifibrogenic role of exogenous interleukin-10 (IL-10). METHODS: Hepatic fibrosis was induced by CCI4 administration and 60 male Sprague-Dawley rats were randomly divided into normal control group (group N, 8 rats), CCI4-induced group (group C, 28 rats) and IL-10-treated group (group I, 24 rats). At the beginning of the 7th and 11th wk, rats in each group were routinely perfused with pronase E and type IV collagenase through portal vein catheter and the suspension was centrifuged by 11% Nycodenz density gradient to isolate hepatic stellate cells (HSCs). RT-PCR was used to analyze mRNA of MMP-2 and TIMP-1 from freshly isolated cells. Densitometric data were standardized with β-actin signals. Immunocytochemistry was performed to detect MMP-2 and TIMP-1 expression in HSC cultured for 72 h. RESULTS: Compared to group N in the 7th wk, MMP-2 and TIMP-1 mRNA increased in group C (P= 0.001/0.001) and group I (P= 0.001/0.009). The level of MMP-2 and TIMP-1 mRNA in group I was significantly lower than that in group C (P= 0.001/0.001). In the 11th wk, MMP-2 mRNA in group I was still lower than that in group C (P = 0.005), but both dropped compared with that in the 7th week (P = 0.001/0.004). TIMP-1 mRNA in group I was still lower than that in group C (P= 0.001), and increased in group C (P= 0.001) while decreased in group I (P = 0.042) compared with that in the 7th wk. Same results were found by immunocytochemistry. CONCLUSION: Expression of MMP-2 and TIMP-1 is increased in hepatic fibrosis. IL-10 exhibits an antifibrogenic effect by suppressing MMP-2 and TIMP-1 expression.     

组织金属蛋白酶抑制物转基因对小鼠肝脏组织结构与抗氧化能力的影响

目的探讨金属蛋白酶抑制物-1（TIMP-1）及其金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9在TIMP1转基因小鼠和正常小鼠肝脏自然衰老过程中的表达和作用。方法选择3、12和24月龄正常和TIMP_1转基因小鼠，采用HE和Masson染色，观察小鼠肝脏的组织病理学改变，用RTPCR和Westernblot法分别检测TIMP-1和MMP-2、MMP-9在不同月龄小鼠肝脏组织中的表达。测定3月龄小鼠肝脏中超氧化物歧化酶（SOD）、单胺氧化酶（MAO）活性及丙二醛含量。结果24月龄小鼠肝脏中有较多的脂肪变性和胶原沉积，TIMP1的表达随小鼠月龄增加而增高，转基因小鼠的病变更明显。两组小鼠MMP-2和MMP-9的表达均无明显变化。3月龄转基因小鼠肝脏组织学结构和形态无明显改变，但SOD活性降低，MAO活性增高，丙二醛含量增高（P〈0．05）。结论TIMP-1表达增高在肝脏衰老过程中可能起重要作用。     

MMP-1、TIMP-1及其在肝纤维化中的作用

基质金属蛋白酶(MMP)和金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)是细胞外基质(ECM)合成和降解调节中的两个重要的因素。其中MMP-1主要降解细胞外基质的主要成分Ⅰ、Ⅲ型胶原,TIMP-1可抑制MMP-1的活性。肝纤维化时MMP-1活性下降,而TIMP-1活性不断升高。研究显示,二者活性失衡是导致肝纤维化进展的重要因素。它们的来源结构、活性的调节及功能成为目前的研究热点。     

TIMP-1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的作用

目的　探讨TIMP 1表达在实验性大鼠肝纤维化发病中的意义及外源性IL 10抗肝纤维化作用的可能机制。方法　 60只SD雄性大鼠随机分为生理盐水对照组 (N组 ,8只 )、CCl4组 (C组 ,2 8只 )和IL 10干预组 (Ⅰ组 ,2 4只 ) ,建立下常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL 10干预模型。造模第 7周和第 11周 ,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉原位灌流消化 ,11%Nycodenz密度梯度离心分离肝星状细胞 (HSC)。半定量RT PCR法检测各组HSC的TIMP 1mRNA表达水平 ;免疫细胞化学法检测培养贴壁后HSC的TIMP 1蛋白表达情况。结果　各组均检出TIMP 1的mRNA表达 ;造模第 7周 ,C组与I组的TIMP 1mRNA表达均高于N组 (P <0 .0 1) ,I组低于C组 (P <0 .0 1) ;造模第 11周 ,I组明显低于C组 (P <0 .0 1) ,C组TIMP 1的表达水平较第 7周进一步增加 (P <0 .0 1) ,而I组有所下降 (P <0 .0 5 )。免疫细胞化学法检测各组TIMP 1的蛋白表达变化与mRNA表达变化一致。结论　TIMP 1随着大鼠肝纤维化进展表达逐渐升高 ,IL 10通过抑制TIMP 1的表达 ,起抗纤维化作用     

肝纤维化进程中细胞外基质对肝星状细胞的作用及机制研究进展*

肝纤维化是一种肝内弥漫性细胞外基质（ECM）过度沉积的病理过程,且肝星状细胞（HSC）的激活是肝纤维化发生发展的中心环节。本文主要介绍了在肝纤维化进程中ECM各种成分比例、分子结构的改变及其ECM分子空间结构改变对HSC的激活、增殖和凋亡的作用和机制。     

活血化淤中药治疗对脂肪性肝炎患者肝组织TIMP-1和TIMP-2表达的影响

目的探索活血化淤中药对脂肪肝肝纤维化发生的干预作用,尤其是对肝组织TIMP-1和TIMP-2蛋白表达的影响。方法用免疫组化法分别测定15例脂肪性肝炎患者治疗前后肝组织TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达。结果活血化淤药物治疗后TIMP-1和TIMP-2表达水平明显低于治疗前。对照组肝组织TIMP-1、TIMP-2表达水平无明显变化。结论TIMP-1、TIMP-2与肝纤维化形成密切相关,活血化淤中药治疗对脂肪肝患者肝内TIMP-1和TIMP-2蛋白的表达有一定的抑制作用。