Survivin基因在大肠癌中的表达

目的探讨Survivin基因在大肠癌中的表达。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测20例大肠癌及其癌旁组织survivin mRNA表达情况。结果65％大肠癌组织表达survivin mRNA，而癌旁组织25％表达。Survivin基因表达与肿瘤大小、侵袭深度、淋巴结转移及分化程度无明显关系。结论Survivin基因在大肠癌发生发展中可能起作用，Survivin表达上调和端粒酶激活可能通过各自不同的信号途径在大肠癌变中发挥协同作用。     

DCC基因在大肠癌中的表达及其临床意义

目的：探讨DCC基因在大肠癌组织中的表达及其与临床病理学特征的关系。方法：采用免疫组化En Vision^TM法,对30例正常大肠组织和91例大肠癌组织中的DCC蛋白表达状态进行检测,并对其结果与各临床病理因素进行相关的统计分析。结果：30例正常大肠组织中DCC均为阳性表达。91例大肠癌中DCC阴性Cox回归模型进行单因素和多因素分析,发现只有分期与DCC表达水平可做为大肠癌独立的预后因素。结论：DCC基因的表达缺失可作为判断大肠癌转移潜能及预后的独立指标。     

BAX基因在遗传不稳定的大肠癌,胃癌突变的研究

目的：了解Ｂａｘ基因在大肠癌,胃癌的突变情况。方法：用ＱＩＡａｍｐ方法提取肿瘤和正常组的ＤＮＡ,选择５对引物,经ＰＣＲ扩增,走ＤＮＡ序列胶电泳,检测其ＭＩ及Ｂａｘ基因编码区序列。结果：胃癌有８例ＭＩ阳性,其中３例Ｂａｘ基因有突变,大肠癌有１４例ＭＩ阳性,其中６例Ｂａｘ基因有突变。结论：Ｂａｘ基因突变在胃癌和大肠癌的发生过程中起重要作用,Ｂａｘ基因是胃癌、大肠癌ＭＩ＾＋的遗传改变受累的一个靶基因。     

p^53cDNA突变和突变型p^53蛋白表达与大肠癌预后的关系

目的 探讨ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变和突变型ｐ＾５３基因蛋白表达与大肠腺癌预后的关系。方法 ＲＴ－ＳＳＣＰ检测大肠腺癌组织ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变，ＰＡｂ２４０单抗免疫组化检测腺癌组织突变型ｐ＾５３基因蛋白表达，比较两者与大肠腺癌预后的关系。结果 １００例大肠腺癌中，ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变５１例（５１％），突变型ｐ５３基因蛋白高表达７６例（７６％），两者同步阳性４９例：ｐ＾５３基因ｃＤＮＡ突变与突     

大肠癌COX-2表达和p53突变

目的　探讨大肠癌COX 2表达和 p5 3突变的关系。 方法　手术切除的大肠癌标本 4 9例 ,正常大肠组织标本 10例。免疫组化检测大肠癌及正常大肠组织COX 2表达水平及突变型 p5 3表达。 结果　突变型 p5 3表达阳性组和阴性组COX 2表达有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论　大肠癌COX 2表达可能和p5 3突变有关     

p53基因、PCNA在大肠癌中的异常表达及其意义

目的：旨在探讨p53蛋白与大肠癌发生及发展的关系，并结合细胞增殖相关抗原PCNA的表达，进一步探讨p53基因在细胞周期调控中与细胞增殖的关系。方法；收集手术切除大肠标本63例，采用免疫组化ABC法检测p53基因及PCNA抗原的表达。结果判断：p53和PCNA表达均以细胞核出现棕黄色颗和为阳性细胞。数据进行卡方检验。结果：大肠癌中p53蛋白阳性表达率68％，PCNA阳性7．1％，大肠癌p53和PCNA在高中分化组42％及46％，低未分化组88．5％及91．4％。p53突变表达时肿瘤细胞具有较高的增殖活性，而当p53表达明显增高时，PCNA表达也增高。结论：在大肠癌发生发展过程中与p53异常密切相关，p53过度表达和PCNA过度表达肿瘤分化程度低，转移率高表明预后不良，可作为判断预后的有效指标。     

Cx43基因启动子甲基化下调乳腺癌Cx43的表达

目的：探讨乳腺癌细胞中Cx43蛋白的表达与基因启动子甲基化的关系。方法：免疫组化检测乳腺标本中Cx43蛋白的表达,甲基化PCR检测Cx43启动子甲基化的频度。5-氮杂脱氧胞苷培养乳腺癌MD-MBA-231细胞后,RT-PCR乳腺癌细胞中Cx43 mRNA,免疫组化、Western Blot检测Cx43蛋白表达,甲基化PCR检测启动子甲基化的变化。结果：与正常乳腺组织相比,乳腺癌中Cx43蛋白的表达下调,启动子甲基化频度高。在应用5-Aza-dC处理前,MD-MBA-231 Cx43基因呈甲基化状态,经4.0μmol/L的5-Aza-dC作用48h后,乳腺癌细胞Cx43基因甲基化逆转,Cx43基因mRNA及蛋白表达增加。结论：Cx43在乳腺癌组织中表达下调可能与启动子甲基化有关。5-Aza-dC能逆转乳腺癌细胞MD-MBA-231的Cx43基因异常甲基化,促进Cx43基因的再表达。     

Fas基因转导大肠癌细胞株的表达

目的：建立表达外源性Fas基因的大肠癌细胞株，观察Fas基因在转导前后的表达，方法：采用分子克隆技术将Fas基因插入真核表达载体pBK-CMV的多克隆位点之间，以脂质体介导法将Fas基因导入受体细胞LoVo ,用G418筛选克隆细胞，以dot blotting,Westting blotting检测转导细胞Fas基因的表达，结果：成功建立了Fas基因表达株，转导株在RNA及其蛋白水平表达均明显高于非转导株，转导细胞增殖速度，倍增时间，对数生长期等均比非转导株更为缓慢，但无显著性差异，在Fas抗体作用下，转导株细胞生长明显受到抑制，有非常显著性差异，结论：Fas基因在大肠癌细胞中处于低表达状态，通过真核表达载体介导，Fas基因在RNA及其蛋白水平能有效表达，Fas表达株在Fas抗体作用下可明显抑制体外培养的大肠癌细胞的生长增殖。     

P-gp在大肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨大肠癌组织多药耐药基因(MDR-1)产物P-糖蛋白(P-gp)表达与大肠癌临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学染色法检测80例大肠癌组织P-gp的表达情况,对其临床病理学因素进行分析.结果:80例大肠癌患者中,P-gp阳性表达率为43.75%(35/80).P-gp表达与大肠癌的分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移无关(P＞0.05);与年龄有关,≥60岁者P-gp的阳性表达率明显低于60岁以下者(P＜0.01).结论:大肠癌组织P-gp的表达率较高,并且与年龄相关,临床检测P-gp对选择个体化化疗方案具有重要意义.     

结肠癌K-ras和P~(53)基因序列改变

采用PCR和DNA双链四色荧光单道测序方法对 31例结肠癌组织、13例大肠息肉伴不典型增生、11例结肠癌术后并发腹水标本进行K ras基因外显子 1、2和P53基因外显子 5、6、7、8测序分析。结果显示 :31例癌组织中发现K ras突变 7例 ,P53突变 12例 ,阳性率分别为 2 2 .58%和 38.71% ;13例息肉伴不典型增生组织中发现P53突变 2例 ;11例术后腹水标本中发现K -ras突变 1例 ,P53突变 2例 ,且突变与患者包埋组织结果一致。表明结肠组织癌变与这两个基因突变密切相关 ,癌基因突变是结肠癌较早期的细胞损害 ;DNA测序方法是研究癌基因突变的最精确可靠的方法。     

间隙连接蛋白43突变与皮肤疾病相关性研究

间隙连接蛋白(Cx)在保证细胞间物质信息传递及维持皮肤屏障稳态方面发挥着重要作用,其基因突变,甚至表达水平异常均会引起多种疾病,严重影响患者生活质量。在编码人类Cx家族的21个基因中,与Cx基因突变相关的临床伴随疾病至少有14种。其中,Cx43分布最广,不仅在大多数器官组织中均有报道,也是伤口愈合、皮肤角质化,以及皮肤肿瘤发展等重要生理病理过程中的关键调控节点。本文总结了近年来Cx43基因(GJA1)在皮肤屏障中的作用、GJA1基因突变相关皮肤疾病及其潜在致病机制这几个快速发展领域中的研究成果,以期为Cx43临床伴发疾病防治及相关研究提供参考。     

顺铂诱导人结肠癌细胞系SW1116凋亡的实验研究

应用光镜、电镜、荧光染色、ＤＮＡ琼脂凝胶电泳等技术，系统地观察了顺铂处理后的人结肠癌细胞系ＳＷ１１１６的形态变化和生化特征。结果发现，癌细胞呈现染色质边集凝聚、胞浆皱缩等改变，符合凋亡细胞的形态学特点；凋亡细胞的出现具有时间和剂量的依赖性；在药物作用９６ｈ左右，检出“阶梯样”的ＤＮＡ片段，这与血液系肿瘤细胞药物作用数小时就能检测到类似结果的报道不同，说明ＤＮＡ寡核小体片段的出现并非结肠癌细胞系ＳＷ１１１６凋亡过程的早期事件。上述模型的建立，可用于深入研究细胞凋亡的发生机制。     

PTEN基因在膀胱癌组织中的表达和突变

目的 检测抑癌基因PTEN在膀胱癌组织中的表达和突变情况。方法 分别应用免疫组化和聚合酶链反应单链构象多态性分析（PCR-SSCP）技术对62例膀胱癌及18例膀胱良性病变组织（对照组）中PTEN的表达及其第1和第7个外显子的突变情况进行检测。结果 在62例膀胱癌组织中．PTEN表达的阳性率为53．2%．而对照组全部为阳性表达；62例膀胱癌组织中．第7外显子突变率为25．8％．第1外显子未发现突变．在对照组织中．末发现有指示突变的异常带型；膀胱癌PTEN的突变率可能与肿瘤的病理学分级有关。结论 PTEN基因突变所致表达障碍可能在膀胱癌的发生、发展中有着重要的作用。     

结肠癌组织中P53基因及其产物变化的研究

目的 探索P53基因突变在结肠癌发生过程中的作用。方法 应用多聚酶链反应－单纯构象多态分析及免疫组化ABC法研究结肠癌组织中的P53基因及其产物蛋白质的变化。结果 结肠癌中有45％发生P53基因突变,52．50％,P53蛋白阳性;所获数据经x^2检验。结论 对P53基因突变和P53蛋白的检测可作为判断结肠癌生物学行为的重要标志。     

人类单纯性先天性心脏病患者Nkx2—5基因突变及表达的研究

目的：研究Nkx2-5基因在人类单纯性先天性心脏病患者中的突变及表达情况。方法：应用PCR－SSCP方法和NDA测序技术在58个单纯性先天性心脏病核心家系183名成员中检测Nkx2-5基因的突变情况;以β－actin作为内对照对11个室间隔缺损患者心肌标本和2个非先天性心脏病患者（正常对照）心肌标本进行RT－PCR扩增和定量分析,观察mRNA表达水平。结果：发现Nkx2-5基因同源结构域中（CCA）三碱基缺失;与非先天性心脏病患者（正常对照）相比,室间隔缺损患者的Nkx2-5基因基因mRNA表达呈下降趋势。结论：Nkx2-5基因与人类单纯性先天性心脏病密切相关,其同源结构域内的基因突变可能是人类单纯性先天性心脏病发病的重要遗传基础。Nkx2-5基因转录水平的异常可能是先天性心脏病形成的另一种潜在机制。     

间隙连接蛋白Cx32在胃癌和胃癌前病变的表达及意义

目的：通过观察间隙连接蛋白Cx32在正常胃粘膜，胃癌前病变和胃癌中的表达和分布情况，探讨Cx基因表达与胃癌发生的关系。方法：运用SP免疫组化方法检测Cx32在70例原发性胃癌，62例胃癌前病变和16例正常胃粘膜中表达规律。结果：Cx32在正常胃粘膜上皮呈一致性强阳性表达，Cx32在胃癌前病变，胃癌中表达的阳性率分别为90．3％，18．6％，Cx32在正常胃粘膜上皮，胃癌前病变和胃癌中阳性率比较差异均有显著性（P＜0．05），结论：Cx32是人正常胃上皮细胞间隙连接通道的主要成分，Cx32表达降低在胃癌发生发展中起重要作用。     

白细胞介素-2在结肠癌患者血清中变化的临床意义

采用放射免疫法，测定４５例结肠癌患者血清白细胞介素－２（ＩＬ－２）含量。结果发现：结肠癌患者血清ＩＬ－２水平明显低于正常人（Ｐ＜０．０１），并且随肿瘤的恶性度增高及病情的加重，血清ＩＬ－２水平明显降低，手术后血清ＩＬ－２水平回升，与手术前比较有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。提示：血清ＩＬ－２水平能够反映结肠癌患者的免疫状况，也可作为疗效观察的一项参考指标。     

AT基因突变与食管癌及结肠癌的关系

目的 :探讨共济失调毛细血管扩张症 (AT)基因突变与食管癌及结肠癌发病的关系。方法 :运用PCR SSCP及DNA同位素测序等技术 ,对 17例食管癌和 15例结肠癌患者的AT基因第 41～ 5 1外显子进行突变检测。结果 :15例结肠癌标本的SSCP带型与正常对照组织无差异 ;17例食管癌标本中有 1例SSCP带型比正常对照组织多一条带 ,测序发现 ,该例标本在AT基因第 49外显子发生单碱基缺失。结论 :AT基因突变可能与某些类型的食管癌发病有关 ,但尚不能判断与结肠癌的相关性     

术中肠道灌洗在梗阻性左半结肠癌根治术中的应用

目的探讨术中肠道灌洗在梗阻性左半结肠癌根治术中肠道一期切除吻合的应用价值和安全性评价。方法回顾性分析60例左半结肠癌并急性梗阻患者的术中处理。结果60例中治疗组50例行术中肠道灌洗一期切除吻合,47例恢复顺利,无并发症发生,2例出现吻合口瘘,1例出现腹腔脓肿,2例死亡;对照组8例行一期肠切除吻合而未行术中肠道灌洗,4例出现吻合口瘘,其中2例出现感染性休克,死于多器官功能衰竭;二期手术组2例行结肠造口,二期吻合。统计显示术中肠道灌洗一期肠切除吻合组并发症发生率和死亡率明显低于未行结肠灌洗组,差异有统计学意义。结论左半结肠癌性梗阻术中肠道灌洗一期切除吻合对提高病人生存率,减少并发症发生有重要意义。