CD83+肿瘤浸润性树突状细胞在胃癌组织的表达及临床意义

目的肿瘤组织浸润树突状细胞(tumor infiltrating dendritic cells,TIDCs)数量和功能对患者预后有显著床意义,但CD83 TIDCs在胃癌组织中的表达情况尚不清楚,需要进行研究.方法采用免疫组化、原位杂交及流式细胞术检测45例胃癌TIDCs的CD83蛋白、CD83 mRNA以及S-100表达,并分析其临床意义.结果免疫组化显示胃癌组织(42/45)中有S100 散在表达;CD83主要表达于胃癌组织癌旁及正常胃黏膜上.原位杂交显示CD83 mRNA在少数标本中(7/45)表达.流式细胞术检测到低水平CD83表达(4%,45/45).S-100和CD83 mRNA表达数量与患者年龄、性别、肿瘤部位、浸润深度、病理分期及淋巴结转移情况无显著相关性.CD83蛋白免疫组化表达与胃癌TNM分期显著负相关(r=-0.924,P＜0.01);CD83流式细胞检查的表达率与胃癌TNM分期及淋巴结转移呈显著负相关(r=-0.879,P＜0.01;r=-0.782,P＜0.05).结论胃癌TIDCs CD83表达与胃癌TNM分期及淋巴结转移有关,可作为临床研究指标使用.     

CD80、CD83、CD86检测在非小细胞肺癌中的应用价值

目的 探讨CD80、CD83、CD86检测在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义。 方法 收集2012年1月-2015年12月在台州市第一人民医院治疗的NSCLC患者113例及健康对照组30例。采用流式细胞术分析NSCLC患者和健康对照者外周血CD80、CD83、CD86的表达水平。数据比较采用t检验和方差分析,患者生存时间采用Kaplan-Meier法和log-rank分析来确定是否有差异。 结果 NSCLC患者CD80、CD83、CD86水平明显低于正常对照组(t=10.026、4.963、4.870,均P<0.05),不同分期患者CD80、CD83水平差异有统计学意义(F=12.750、9.481,均P<0.05)。NSCLC患者术后CD80、CD83、CD86水平较术前明显升高(t=-3.648、-4.621、-4.257,均P<0.05)。CD80水平较高的NSCLC患者具有更好的生存率(P=0.040),而CD83、CD86水平与生存率无关(P=0.118、0.084)。 结论 检测NSCLC患者CD80、CD83、CD86水平具有一定价值,CD80、CD83与肿瘤分期密切相关,且CD80是NSCLC患者生存时间的独立预测因子。      

反义肽核酸对树突状细胞CD86表达的抑制作用

目的 探讨CD86mRNA反义肽核酸（peptide nucleic acid,PNA)阻断树突状细胞CD86表达和第二信号传递的可能作用。方法 采用激光共聚焦显微镜研究生物素化PNA的细胞内化；利用流式细胞术，荧光细胞组织化学以及RT-PCR研究CD86反义PNA对CD86分子表达的抑制作用，结果 （1）激光共聚焦显微镜光学细胞切片证明，培养的人未成熟树突状细胞能够有效内化生物素化PNA。（2）流式细胞术和荧光细胞组织化学证实CD86反义PNA在蛋白质水平上对CD86分子表达有抑制作用。（3）RT-PCR证明反义PNA能够抑制DCCD86mRNA水平。结论 CD86反义PNA能够抑制人树突状细胞CD86mRNA的表达，从而为进一步利用反义PNA阻断第二信号传递，诱导免疫耐受奠定了基础。     

外周血树突状细胞Tim-3蛋白、CD80、CD86表达与骨髓增生异常综合征预后的相关性

目的 分析外周血树突状细胞(DC)T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(Tim-3)、CD80、CD86表达与骨髓增生异常综合征(MDS)患者预后的相关性.方法 选取2015年11月—2017年11月于四川大学华西医院血液内科就诊的MDS患者104例作为研究对象(观察组),并根据MDS国际预后评分系统(IPSS)将患者分为低...     

反义肽核酸对树突状细胞CD86表达的抑制作用

目的　探讨 CD86 m RNA反义肽核酸 (peptide nucleic acid,PNA)阻断树突状细胞 CD86表达和第二信号传递的可能作用。方法　采用激光共聚焦显微镜研究生物素化 PNA的细胞内化 ;利用流式细胞术、荧光细胞组织化学以及 RT- PCR研究 CD86反义 PNA对 CD86分子表达的抑制作用。结果　 1激光共聚焦显微镜光学细胞切片证明 ,培养的人未成熟树突状细胞能够有效内化生物素化 PNA。 2流式细胞术和荧光细胞组织化学证实 CD86反义 PNA在蛋白质水平上对 CD86分子表达有抑制作用。 3RT- PCR证明反义 PNA能够抑制 DC CD86m RNA水平。结论　 CD86反义 PNA能够抑制人树突状细胞 CD86 m RNA的表达 ,从而为进一步利用反义 PNA阻断第二信号传递 ,诱导免疫耐受奠定了基础     

小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒载体的构建及体外对树突状细胞的作用

 目的 构建小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒表达载体,并在体外观察其对小鼠骨髓源性树突状细胞（dendritic cell,DC）的作用。方法 针对已经筛选确定的CD80基因RNA干扰有效靶序列,合成靶序列的双链DNA,接入pGCL-GFP载体,再与pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度;同法构建出CD86基因RNA干扰慢病毒载体。慢病毒感染体外培养的DC,通过荧光显微镜检测感染效率,Annexin V/PI双染色法检测感染细胞凋亡和坏死情况,流式细胞仪检测CD80和CD86的表达情况。结果 PCR和测序证实,pGCL-CD80shRNA和pGCL-CD86shRNA慢病毒载体构建正确,病毒滴度均达2×107TU/mL,适合感染DC的MOI值为20,此时慢病毒对DC具有低毒性,感染效率为85.42%。CD80和CD86表达的抑制率分别为82.05% 和77.78%。结论 成功构建出小鼠CD80和CD86基因RNA干扰慢病毒载体,其有明显抑制DC表面CD80和CD86的表达,这为移植物排斥提供了新的治疗手段。     

乳腺癌患者外周血中树突状细胞表面标记CD1a、CD83的研究

目的：对乳腺癌患者外周血中培养的树突状细胞（dendritic cells,DC)表面分子CD1a,CD83的表达进行研究。方法：采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞，用粒细胞-单核细胞集落刺激因子（GM-CSF），白细胞介素-4（IL-4），肿瘤坏死因子α（TNF-α）细胞因子组合，刺激DC增殖，分化，用标有荧光素的单抗标记培养细胞，在流式细胞仪上分析所培养的细胞。结果：该细胞表达CD1a,CD83分子，但CD1a,CD83在CD3^ T,CD19^ B淋巴细胞上也表达，CD1a,CD83在活化的淋巴细胞上表达水平比未活化的高，CD19^ B细胞上表达水平比CD3^ T细胞高。结论：CD1a,CD83等分子并非DC特有的标记，目前鉴定DC仍然要靠细胞形态，细胞表达CD1a,CD83以及共刺激分子等综合因素来确定DC。     

CD80和CD86在肝癌、肝硬化组织中的表达

0　引言　 T细胞介导的细胞免疫在实质器官肿瘤的抗肿瘤免疫应答中起着重要的作用 [1 ] .这种免疫应答的产生至少涉及 2种信号 .其一由 MHC与特异性抗原的复合物与 TCR相互作用提供 ,其二由共刺激分子提供 .在适当的条件下 ,共刺激分子 B7家族与 MHC , 类分子在肿瘤细胞上的共同表达 ,可以在抗原特异性免疫应答和肿瘤的免疫排斥中引起 T细胞亚群的成功活化 .不表达 CD80和 CD86的肿瘤细胞是没有免疫原性的 [2 ] .因此 ,我们采用免疫组织化学方法对肝细胞肝癌 (HCC)、癌周组织 (pericancerous tissuse,PCT)及肝硬化 (L C)组织细胞…     

CD28、CD80、CD86在银屑病皮损中的表达

目的研究共同刺激分子CD28、CD80、CD86在银屑病患者皮损中的表达及其在银屑病发生、发展中的作用.方法采用免疫组织化学ABC法检测22例银屑病患者皮损和15例正常对照皮肤中CD28、CD80、CD86的表达水平.结果银屑病皮损中CD28在真皮乳头、表皮基底层及棘层有较强的表达,与正常皮肤相比有显著性差异(P＜0.01);CD80、CD86在表皮颗粒层、棘层的表达相对正常皮肤均有明显的增强(P＜0.01).结论CD28、CD80、CD86在银屑病发病中起重要作用.     

手足口病患儿外周血共刺激分子CD80、CD86的变化观察

目的观察手足口病(HFMD)患儿外周血共刺激分子CD80、CD86的变化。方法根据病情将55例手足口病患儿分为普通组30例、重症重型组25例。以20例健康儿童作为对照,采用流式细胞术,检测75例小儿外周抗凝全血的CD80细胞、CD86细胞的相对计数。结果手足口病患儿外周血CD80细胞的百分率(F=53.032,P=0.000)和CD86细胞的百分率(25.188,P=0.000)在各组间数值比较,差异有统计学意义。对照组与普通组和重症重型组数值比较差异均有统计学意义(P均<0.001),普通组与重症重型组数值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CD80和CD86共刺激分子参与了HFMD的发病。     

喉癌组织中血管内皮生长因子表达与CD83阳性树突状细胞分布的关系

目的探讨喉癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达与CD83阳性树突状细胞(DC)分布的关系。方法42例喉癌组织经抗VEGF、抗CD83抗体免疫组化染色,观察喉组织中CD83阳性DC及VEGF分布,以及CD83阳性DC密度与VEGF表达强度的相关性。结果42例肿瘤标本中“-”12例,“+”者14例,“++”者16例。CD83+树突状细胞形态不规则,表面有许多不规则树状突起,主要分布于癌周组织内,趋向于成群分布;偶可见到CD83+DC位于靠近癌周组织的癌巢间间质内。喉癌组织中VEGF的表达明显升高的病例,其CD83+DC密度显著降低。结论VEGF的表达与喉癌组织中CD83+DC含量呈明显的负相关。     

LPS刺激对大鼠视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40表达的影响

目的 研究脂多糖(LPS)刺激对CD80、CD86、CD40在大鼠视网膜小胶质细胞上表达的影响,探讨视网膜小胶质细胞在视网膜和视神经病变中与T细胞活化的关系.方法 分离培养大鼠视网膜小胶质细胞并进行OX42染色鉴定,当细胞培养达80%融合状态时分为正常培养组和LPS刺激组.采用RT-PCR法检测两组细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达,硝酸还原法和ELISA法检测两组细胞一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌量.结果 RT-PCR检测显示,LPS刺激组的视网膜小胶质细胞CD80、CD86和CD40 mRNA的表达较正常培养组显著增加,两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).正常培养组的视网膜小胶质细胞有少量NO和TNF-α分泌,LPS刺激组的小胶质细胞培养上清液中NO和TNF-α的分泌量较正常组显著增加[(18.10±1.57)μmol/L vs (1.55±0.15)μmol/L,(51.07±4.30)pg/mL vs (2.37±0.31)pg/mL],两组比较差异有统计学意义(均P<0.01).结论 培养的大鼠视网膜小胶质细胞有共刺激分子表达,LPS刺激后表达上调,提示视网膜小胶质细胞可能与T细胞活化有关.     

CD80和CD86在食管癌组织中的表达

目的:观察食管癌组织中共刺激分子CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达,以了解共刺激途径在食管癌肿瘤免疫中的作用和意义.方法:以正常食管组织和癌周组织为对照,采用免疫组织化学方法观察食管癌组织中CD80(B7-1)和CD86(B7-2)的表达.结果:CD80在食管癌组织中的表达阳性率及阳性频数均明显低于癌周组织和正常食管组织(P＜0.05、P＜0.01).CD86的表达阳性率在3组组织中无显著性差异(P＞0.05),但食管癌组织中阳性频数显著低于正常组织(P＜0.05).CD80和CD86存在细胞核,细胞质2种表达,缺乏细胞膜上的表达.结论:共刺激分子CD80与CD86在食管癌组织中呈低水平表达,并且存在着向细胞膜转运的障碍,可能与食管癌的发生、发展相关.     

沉默CD86树突状细胞在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的 作用研究

目的 探讨沉默CD86 的树突状细胞（DC）在异种胰岛混合淋巴细胞培养中的作用。方法 分离培养BALB/c小鼠骨髓来源DC,流式细胞仪鉴定后,以CD86 siRNA转染DC。分离纯化SD大鼠胰岛,吖啶橙（AO）/碘化丙啶（PI）双荧光染色方法检测胰岛细胞活性;提取SD大鼠脾脏淋巴细胞,与经siRNA沉默CD86 的DC混合培养,使DC负载SD大鼠抗原。在400胰岛当量SD大鼠胰岛细胞+1×10⁶个BALB/c小鼠淋巴细胞（对照组1）基础上,混合普通DC（负载SD大鼠抗原）（对照组2）或siRNA沉默CD86 的DC（负载SD大鼠抗原）（实验组）进行体外培养,另以单纯SD大鼠胰岛细胞为空白组,培养3 d后倒置显微镜下检测细胞形态学变化,测定上清液中反映淋巴细胞增殖的细胞因子白介素（IL）-2、IL-4、IL-10及干扰素（IFN）-γ水平,AO/PI染色观察胰岛活性,并行葡萄糖刺激胰岛素释放实验,计算刺激指数。结果 培养所得的细胞具有典型的DC形态,流式细胞仪检测DC表面CD11c、CD80、CD86的表达阳性率分别为（86.26±9.73）%、（72.64±8.55）%、（77.18±10.23）%。CD86 siRNA转染DC后CD86沉默。SD大鼠胰岛杂质较少,形态正常,细胞活性>95%。混合细胞培养3 d后,与对照组1、2比较,实验组的IL-10水平升高（P<0.05）,IL-4水平相当（P>0.05）,IL-2、IFN-γ均降低（P<0.05）,淋巴细胞增殖最少,胰岛功能最好,刺激指数最高。实验组4种细胞因子均高于空白组（P<0.05）,刺激指数低于空白组（P<0.05）。结论 沉默CD86 的DC负载供体抗原后,与供体胰岛、受体淋巴细胞混合培养,可在一定程度上减轻免疫排斥反应,从而保护供体胰岛功能。     

鼻咽癌组织中CD80、CD86表达量与鼻内镜术后复发及肿瘤凋亡、侵袭的相关性

目的:研究鼻咽癌组织中CD80、CD86表达量与鼻内镜术后复发及肿瘤凋亡、侵袭的相关性。方法:选择2013年2月~2014年3月期间在南充市中心医院手术切除的鼻咽癌患者并根据术后3年复发情况分为复发组、未复发组,选择同期活检的正常鼻黏膜组织,检测病灶中CD80、CD86以及凋亡分子、侵袭分子的表达量。结果:复发组、未复发组病灶组织中CD80、ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的表达量显著高于对照组(P<0.05),复发组病灶组织中CD80、ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的表达量显著高于未复发组(P<0.05);复发组、未复发组、对照组病灶组织中CD86的表达量差异无统计学意义(P>0.05)。CD80高表达的鼻咽癌病灶内ARD1、Survivin、Shh、Ptch1、S100A4、Ezrin、N-cadherin的mRNA表达量显著高于CD80低表达的鼻咽癌病灶(P<0.05)。结论:鼻咽癌组织中CD80的高表达能够通过促进细胞增殖及侵袭来参与肿瘤的复发。     

外周血共刺激分子CD80、CD86表达与重症手足口病患儿治疗效果的关系

目的 观察重症手足口病（hand, foot, and mouth disease, HFMD）患儿外周血共刺激分子CD80、CD86的表达情况,并分析二者与患儿治疗效果的关系。方法 回顾性收集2017年3月—2021年3月武汉市中医医院收治的252例重症HFMD患儿的临床资料,患儿均进行规范化治疗并评估治疗效果。记录患儿基线资料及实验室相关指标检测结果,采用流式细胞仪检测外周血CD80、CD86细胞阳性率。采用Logistic回归分析上述指标与患儿治疗效果的关系;绘制受试者工作特征曲线（receiver operating curve, ROC）评估上述指标预测患儿治疗效果的价值。结果 经规范化治疗后,48例患儿治疗无效,204例患儿治疗有效;患儿血清CD80 [（2.28±0.84）% vs （2.12±0.33 ）%]、CD86 [（3.35±0.96）% vs （2.23±0.41）%]水平较入院时均下降,差异有统计学意义（t=2.851、16.991,P<0.05）。治疗无效组患儿入院时血乳酸、血清C反应蛋白（C-reactive protein, CRP）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9, MMP-9）、CD80、CD86水平均高于治疗有效组,差异有统计学意义（P<0.05）。Logistic回归分析显示,入院时血清CRP（OR=10.929）、MMP-9（OR=1.926）、CD80（OR=3.943）、CD86（OR=1.947）过表达可能是患儿治疗无效的风险因子（P<0.05）;模型拟合优度检验结果显示,拟合优度较高（χ²=6.245,P=0.620）;模型共线性结果显示,各自变量的方差膨胀因子（variance inflation factors, VIF）值均<2,各主要指标之间不存在共线性;模型个体独立性检验结果显示,D-W=0.279,各主要指标之间相互独立性较差。ROC曲线分析显示：入院时血清CD80预测患儿治疗效果的曲线下面积（area under the curve, AUC）为0.762,cut-off值为2.390%,特异度、灵敏度、约登指数分别为0.598、0792、0.390;CD86预测的AUC为0.739,cut-off值为3.280%,特异度、灵敏度、约登指数分别为0.510、0.896、0.406;联合预测的AUC为0.823,特异度、灵敏度、约登指数分别为0.696、0.833、0.529。结论 外周血共刺激分子CD80、CD86参与HFMD病情进展,二者过表达可能提示重症HFMD患儿治疗无效高风险,早期动态监测血清CD80、CD86表达对患儿治疗效果具有一定的预测价值。     

RNAi缄默小鼠树突状细胞CD80、CD86表达诱导T细胞无能的体外研究

目的：探讨RNAi对DC表面抗原CD80、CD86表达的缄默作用及siRNA干扰后树突状细胞（DC）诱导T淋巴细胞无能的机制.方法：体外转录合成针对CD80、CD86 mRNA序列特异性siRNA;半定量RT-PCR、流式细胞仪检测转染前后DC中CD80、CD86 mRNA表达水平以及细胞表面抗原CD80、CD86表达情况;混合淋巴细胞培养观察siRNA干扰对DC刺激T淋巴细胞增殖能力的影响,并以半定量RT-PCR测定混合淋巴细胞培养反应体系中IL-2、IFNγ、IL-10 mRNA表达水平.结果：siRNA转染DC后,CD80、CD86 mRNA表达水平明显减低,细胞表面抗原CD80、CD86阳性率由84%、67%下降至35%、30%;混合淋巴细胞培养结果显示,siRNA干扰后DC对T淋巴细胞刺激指数明显下降（P＜0.01）,且反应体系中IL-2、IFNγ mRNA表达水平明显降低（P＜0.01）,同时IL-10 mRNA表达水平增高.结论：RNAi可高效、特异地抑制CD80、CD86表达.经RNAi敲减后DC激活异系淋巴细胞的能力降低,合成、分泌IL-2能力下降,并诱使Th细胞分化方向发生免疫偏离,诱导T细胞无能.     

共刺激分子CD80和CD86表达对鼻咽癌进展及预后的影响研究

背景 CD80和CD86是T淋巴细胞活化的重要共刺激分子,肿瘤细胞可通过低表达或缺失共刺激分子发生免疫逃逸。目的 探讨共刺激分子CD80和CD86表达对鼻咽癌进展和预后的影响。方法 选取2001年1月-2003年12月经中山大学肿瘤防治中心病理科诊断为鼻咽癌并有相应临床随访资料的鼻咽癌组织标本557例。患者均初次诊断且未进行任何治疗,随访时间2～114个月,随访过程中发生转移113例,死亡235例。采用免疫组织化学法检测CD80和CD86表达,采用Kaplan-Meier生存曲线、Log-rank检验及单因素Cox比例风险回归分析探讨CD80和CD86表达与鼻咽癌患者进展及预后的关系。结果 免疫组织化学法发现,CD80和CD86主要定位在细胞膜上,在肿瘤间质很少表达。557例患者中CD80低表达组309例,CD80高表达组248例;CD86低表达组470例,CD86高表达组87例。Kaplan-Meier生存曲线和Log-rank检验结果显示,CD80低表达组与CD80高表达组鼻咽癌患者无瘤生存时间比较,差异无统计学意义（χ2=3.551,P=0.060）;CD80低表达组与CD80高表达组鼻咽癌患者总生存时间比较,差异有统计学意义（χ2=5.521,P=0.019）。CD86低表达组与CD86高表达组鼻咽癌患者无瘤生存时间及总生存时间比较,差异无统计学意义（χ2=0.948,P=0.330;χ2=0.662,P=0.416）。单因素Cox比例风险回归分析结果显示,CD80高表达组鼻咽癌患者发生转移复发及死亡的风险高于CD80低表达组（P＜0.05）;CD86低表达组与CD86高表达组鼻咽癌患者发生转移复发及死亡的风险比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。Spearman秩相关分析结果显示,鼻咽癌组织中CD86表达与间质中CD68+巨噬细胞数量呈正相关（rs=0.103,P=0.015）。结论 鼻咽癌组织中CD80高表达与鼻咽癌患者预后差有关,增加局部复发和远处转移风险;未发现CD86表达与鼻咽癌患者进展及预后相关。     

人可溶性CD83基因的克隆、原核表达和纯化

目的:构建人可溶性CD83基因原核表达载体,并在大肠杆菌中表达和纯化.方法:利用反转录PCR方法从正常人外周血单个核细胞中获得可溶性CD83基因,克隆到表达载体pET-32a载体,构成重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达6×His融合蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot检测和鉴定.表达产物包涵体经Ni-NTA亲和层析纯化.结果:经酶切鉴定及测序证实可溶性CD83蛋白基因的原核表达载体构建正确.经SDS-PAGE及Western blot显示在M,约32 000处出现融合表达条带.融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量的45%.重组蛋白经Ni-NTA亲和层析进行纯化后,得到了高纯度的融合蛋白.结论:成功克隆人外周血单个核细胞来源的可溶性CD83基因片段,并在大肠杆菌B121(DE3)中高效表达,亲和层析纯化后获得高纯度融合蛋白.     

树突状细胞在人正常子宫内膜的表达及周期性变化研究

目的：研究树突状细胞（DCs）在人正常子宫内膜的表达及周期性变化。方法免疫组织化学法分别测定 CD1a 、CD83阳性细胞在40例人正常子宫内膜的表达（增生期20例,植入窗期20例）,结合血清雌二醇（E2）、黄体酮（P）水平,分析 DCs表达水平与 E2、P 的相关性。结果增生期子宫内膜 CD1a＋ DCs 阳性率为90％（18／20）,植入窗期 CD1a ＋ DCs 阳性率为100％（20／20）,所有标本均未检测到 CD83表达。 DCs 数量随月经周期变化而变化,植入窗期 CD1a＋ DCs 细胞密度为（18．2±5．76）个／mm2,显著高于增生期子宫内膜 CD1a ＋ DCs 细胞密度（6．5±4．05）个／mm2（P＜0．05）。子宫内膜 DCs 数量与血清 P 水平具有相关性（r＝0．630,P＜0．01）。结论植入窗期子宫内膜 CD1a＋ DCs 数量增加可促进母胎免疫耐受。