特发性血小板减少性紫癜与人类疱疹病毒6型感染关系初探

目的：了解特发性血小板减少性紫癜与人类疱疹病毒6型（HHV－6）感染间的关系。方法：聚合酶链反应（PCR）检测特发性血小板减少性紫癜（ITP）骨髓，外周血中的HHV－6－DNA健康体检者和缺铁性贫血者为对照组。结果：20例ITP患者，10例缺铁性贫血患者和30例健康体检者外周血的HHV－6－DNA检出率分别为25％（5／20），10％（1／10）和3．33％（1／30），ITP患者组与健康体检组间，差异有显著性（P＜0．05）。ITP患者组与缺铁性贫血组间差异无显著性。15例ITP患者骨髓和10例缺铁性贫血患者骨髓，HHV－6－DNA检出率分别为46．67％（7／15）和0，二者间差异有显著性（P＜0．05）。10例ITP治疗前，治疗后第5天，第10天时外周血HHV－6－DNA检测，分别有3，3，2例阳性。结论：ITP与HHV－6的感染呈正相关，骨髓中HHV－6－DNA检出率高于外周血中     

儿童血细胞异常4 590例疾病构成分析

目的 探讨骨髓细胞形态学分析在儿童血液疾病临床诊断中的意义.方法 选择山西省儿童医院2009年1月至2014年12月初次骨髓穿刺检查的患儿标本4 590例,对其骨髓细胞形态学分析结果进行回顾性分析.结果 4 590例患儿骨髓标本中婴儿期比例最高,占29.0％(1 333/4 590),其次为幼儿期(26.7％,1 224/4 590).各年龄段均以特发性血小板减少性紫癜构成比最高.骨髓细胞形态学诊断中最常见的疾病依次为特发性血小板减少性紫癜、缺铁性贫血、感染性骨髓象、白血病(急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病)、再生障碍性贫血等.结论 准确的骨髓细胞形态学诊断仍然是儿童造血系统疾病最基本、快捷的诊断方法,具有重要价值.除血液系统疾病外,有其他不明原因发热、肝脾大及淋巴结肿大时,也应尽早行骨髓细胞形态学检查,早期诊断,早期治疗.     

孕妇特发性血小板减少性紫癜在围产期的治疗:被动免疫性血小板减少症的危险因素

孕妇患特发性血小板减少性紫癜(ITP)并不少见,且常伴严重出血、自发性流产、宫内胎儿发育迟缓(IUGR)、宫内胎儿死亡或胎儿颅内出血(ICH),以致围产期死亡率高达20％。我们主要观察母体ITP的治疗对胎儿被动免疫性血小板减少症(PIT)发生率的影响。 39例(2例为双胎)ITP孕妇治疗主要用类固醇药物、大剂量静脉输注丙种球蛋白、孕前脾切除术,13例虽有血小板减少,但怀孕期间未用药。28例接     

巨噬细胞集落刺激因子可溶性受体与儿童血液病关系初探

目的：探讨儿童血液病患者血清M-CSF可溶性受体(M-CSFsR)水平的异常表达及其临床意义。方法：通过特异性检测M-CSFsR的双抗体夹心ELISA检测了正常儿童26例、急性淋巴细胞白血病(ALL)92例、急性非淋巴细胞白血病(ANLL)31例、再生障碍性贫血(AA)43例、特发性血小板减少性紫癜(ITP)42例患儿的M-CSFsR。用免疫沉淀及Western-blot测定阳性血清的M-CSFsR。结果：急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病患儿血清M-CSFsR表达水平低于正常对照组[ALL：(0.15±0.21)ng／mL，P=0.001；ANLL：(0.19±0.19)ng／mL，P=0.009]。特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿的血清M-CSFsR水平显著高于正常对照组(P=0.016)。Western-blot显示阳性血清中的M-CSFsR分子量约90kD。结论：血液病患儿中息性淋巴细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病及特发性血小板减少性紫癜(ITP)患儿的血清M-CSFsR水平均异常，为深入研究M-CSFsR的病理意义奠定了基础。     

慢性免疫性血小板减少性紫癜患者滤泡辅助性T细胞变化的研究

目的 探讨滤泡辅助性T细胞（Tfh）在成年人慢性免疫性血小板减少性紫癜（ITP）免疫发病机制中的作用.方法 采用流式细胞术检测42例慢性ITP患者治疗前后、42名健康者外周血CXCR5＋CD4＋细胞比例,采用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素（IL）-21浓度.结果 初发ITP患者组外周血中CXCR5＋CD4＋T细胞占CD4＋T细胞比例高于健康对照组[（12.15±6.82）％比（8.79±4.91）％,P＜ 0.005];经过激素治疗后,ITP患者外周血中CXCR5＋CD4＋T细胞占CD4＋T细胞比例有所下降[治疗后（9.01±5.13）％,P＜ 0.001],治疗后与健康对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）.初发ITP患者外周血血浆IL-21浓度高于健康对照组[（97.56±29.48） μg/ml比（30.36±12.93） μμg/ml,P＜0.001];经过激素治疗后,ITP患者外周血血浆IL-21浓度较治疗前有所下降[治疗后（67.35±20.58） μμg/ml,P＜0.001],但仍高于健康对照组（P＜ 0.001）.结论 慢性ITP患者存在Tfh细胞分布及功能异常,可能与慢性ITP的发生发展有关.     

PAIgG检测对恶性淋巴瘤的临床意义

自1975年Dixon等以补体溶解抑制试验首次直接测定血小板表面相关免疫球蛋白G(PAIgG)以来,新方法不断问世。本文对52例恶性淋巴瘤患者及21例急性白血病进行了PAIgG测定,以探讨PAlgG值与恶性淋巴瘤的关系。材料与方法一、病例选择1.病人:慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)35例(男12例,女23例,年龄10～64岁)。初发或复发未经治疗者12例,其余为经药物治疗无效(顽固性)及进步者(尚未缓解)。血小板计数均<100×10~9/L(10万/mm~3),少数患者不到<10×10~9/L。各例均经临床及骨髓细胞形态学检查,根据1984年洛阳全国血液会议制定的ITP诊断标准(草案)而确诊。急性白血病21例,按FAB分类计L_14例,L_23例,M_13例,M_24例,     

多发性骨髓瘤患者病毒HHV-6 HHV-8的检测

多发性骨髓瘤(MM)是以骨髓中单克隆性浆细胞恶性增殖和异常积聚为特征的肿瘤,其相关基因及发病机制尚不清楚[1].许多学者致力于研究MM与病毒感染的关系,其中人类疱疹病毒8(HHV-8)与MM发病关系存在争议.人类疱疹病毒6(HHV-6)与人类的多种疾病有关,是引起多种恶性肿瘤的一种转化病毒.为了解MM与HHV-6、HHV-8感染的关系,我们应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测了2000年2月～2003年7月12例MM患者(MM组)及24例健康者(对照组)感染HHV-6、HHV-8情况,现报道如下.     

骨髓增生异常综合征患者Dickkopf-3基因启动子区甲基化状态研究

目的 了解骨髓增生异常综合征(MDS)患者WNT/β-catenin信号转导通路中拮抗基因Dickkopf-3(Dkk3)的甲基化状态,初步探索其甲基化状态与MDS发生及疾病进展的关系.方法 应用甲基化特异性PCR(MSP)法对43例MDS患者的骨髓或外周血Dkk3基因启动子区甲基化状况进行检测,并以70例门诊普通患者的外周血检测结果作为对照,同时对患者进行随访.结果 43例MDS患者中检出7例(16.3％)Dkk3甲基化,其中5例(11.6％)为半甲基化状态,2例(4.7％)为完全甲基化状态,70例正常对照中1例(1.4％)为Dkk3甲基化,组间DKK3甲基化率差异有统计学意义(x2=8.93,P=0.005).7例Dkk3甲基化的样本中,2例来自骨髓,5例来自外周血,其中难治性贫血(RA)2例,难治性细胞减少伴多系异常(RCMD)1例,难治性贫血伴原始细胞增多(RAEB)4例.单因素分析示不同性别、染色体核型、样本来源(骨髓/外周血)、危险度(WHO分类的预后评分系统≤2分及＞2分)及老年组与非老年组间甲基化率差异均无统计学意义(均P＞0.05).在35例长期随访患者中,9例患者转化为急性髓系白血病(AML)(6例DKK3甲基化者中3例,29例DKK3非甲基化者中6例),疾病进展组与稳定组间甲基化率差异无统计学意义(P＞0.05);死亡12例中3例为Dkk3甲基化阳性,但甲基化与非甲基化组间生存率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MDS患者中Dkk3基因存在较高的甲基化修饰,这可能是MDS发病的分子机制之一.本组患者例数较少,尚未发现甲基化与临床预后间的相关性.     

以特发性血小板减少性紫癜为早期表现的骨髓增生异常综合征2例报告

 病例报告病例 1,男 ,2 7岁。因反复皮肤瘀点、瘀斑 ,牙龈出血 18年于 1996年 3月18日入院。患者 7岁时 ,“感冒”后出现双下肢皮肤多处瘀点、瘀斑 ,刷牙时牙龈渗血 ,在当地医院检查发现外周血血小板明显减低 ,PLT (35～ 4 3)× 10 9/L ,白血病和血红蛋白正常。后在我院经骨髓涂片检查诊断为“特发性血小板减少性紫癜 (ITP)”。经强的松 4 0mg/d口服治疗后 ,血小板逐渐升至 (6 0～ 75 )× 10 9/L。强的松维持治疗 6个月后逐渐减量 ,1年后停药。住院期间及出院后多次复查血常规 ,血小板均保持在 5 0× 10 9/L以上 ,虽未完全恢复正常 ,但因无出血症状 ,未再检查治疗。入院前 3个月 ,患者无诱因出现低热、四肢皮肤弥漫性出血点 ,同时伴牙龈自发性出血。当地血常规结果显示 ,WBC 3.2× 10 9/L ,Hb 96 g/L ,PLT 2 8× 10 9/L。自服强的松 6 0g/d治疗 ,症状无明显改善。入院后行骨髓涂片检查 ,结果示 :有核细胞增生明显活跃 ,原始粒细胞占 6 .5 % ,原始及幼稚单核细胞占 15 .5 % ,部分粒细胞核浆发育不...     

白介素11在血小板减少疾病中的临床应用

目的观察国产重组人白介素11(rhIL-11)在治疗血小板减少疾病中的疗效.方法将55例血液肿瘤患者分为AB,BA 两组进行自身交叉对照;特发性(难治性)血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)组入选15例;血液肿瘤患者每例均化疗2个疗程(28 d为1个疗程).A疗程化疗结束后24 h加rhIL-11,剂量为25 μg/(kg*d),皮下注射,于化疗结束后24 h开始连用14 d,B疗程化疗后不使用rhIL-11,作为空白对照;自化疗开始隔日查血常规1次,观察各疗程外周血小板计数变化.ITP患者皮下注射rhIL-11 25 μg/(kg*d),连用14 d.结果血液肿瘤组:A疗程用rhIL-11后外周血小板数均值、最高值均大于 B疗程,A、B两疗程血小板数在用药前后差异有显著意义(P<0.05).A疗程血小板数低于50×109/L 的持续天数、恢复至75×109/L以上需要天数均有不同程度缩短;ITP组:rhIL-11治疗后患者血小板数均值逐渐升高,至第15天达(99±27)×109/L,用药前后血小板数差值为(80±16)×109/L.结论 rhIL-11对难治性血小板减少性紫癜及血液肿瘤化疗导致血小板减少有一定疗效,可耐受性好.     

非小细胞肺癌患者外周血和骨髓中LUNX基因表达的临床意义

[目的]探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血和骨髓微转移的肺特异性X蛋白（LUNX）基因诊断的临床意义.[方法]应用荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,对42例肺癌患者和12例肺良性病变患者的外周血和骨髓中LUNX基因mRNA表达进行检测.[结果]42例肺癌患者有14例在外周血中检测到LUNX基因mRNA的表达,阳性表达率为33.3%,有10例在骨髓中检测到LUNX基因mRNA的表达,阳性表达率为23.8%.LUNX mRNA的表达与CK-19基因mRNA的表达率无显著性差异（P＞0.05）.外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及TNM分期均存在密切关系（P＜0.05）.[结论]外周血和骨髓LUNX基因mRNA的表达是检测肺癌微转移的一个有价值的指标,为制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据.     

乳腺癌患者骨髓GalNAcT mRNA的检测及其临床意义

目的：研究乳腺癌患者骨髓β1，4-N-乙酰半乳糖胺转移酶（GalNAcT）mRNA的表达，探讨其作为乳腺癌骨髓微转移检测指标对临床的应用价值。方法：对40例乳腺癌患者的骨髓及外周血采用巢式RT—PCR方法检测GalNAcT mRNA表达，同时以免疫组化的方法检测骨髓标本中细胞角蛋白（cytokeratin，CK）的表达。结果：40例患者骨髓中GalNAcT mRNA阳性表达17例（42．5％），外周血阳性表达7例（17．5％）；10例血液系统良性疾病患者骨髓和15例健康志愿者外周血中GaINAcT mRNA均为阴性。免疫组化结果显示：40例乳腺癌骨髓中有11例（27．5％）CK阳性，其GalNAcT mRNA都阳性；有6例（15．0％）CK阴性而GalNAcT mRNA阳性。结论：RT—PCR和免疫组化都是检测乳腺癌患者骨髓微转移的可靠的方法，但前者的敏感性高于后者。GalNAcT mRNA可作为一种新的肿瘤标志物来检测乳腺癌患者骨髓微转移。     

非霍奇金淋巴瘤骨髓侵犯的临床及血液学分析

 目的 探讨NHL骨髓侵犯的临床特点以及与血液学之间的关系。方法 分析95例NHL骨髓侵犯患者的临床资料,进行常规骨髓穿刺和血液学检查。结果 发生骨髓侵犯病例中Ⅰ期4例（4.2%）,Ⅱ期12例（12.6%）,Ⅲ期36例（37.9%）,Ⅳ期43例（47.4%）;病理类型以小淋巴细胞性,弥漫型裂细胞性（改为：弥漫性大B细胞型淋巴瘤）和淋巴母细胞性淋巴瘤多见;纵隔淋巴结肿大、脾脏肿大和脾受侵患者易发生骨髓侵犯;骨髓侵犯患者外周血中贫血56例（58.9%）,血小板减少42例（44.2%）,白细胞减少27例（28.4%）,白细胞增高49例（51.6%）,以贫血多见;三项均异常30例（31.6%）,至少一项不正常65例（68.4%）,淋巴瘤细胞白血病患者外周血象异常发生率高于骨髓浸润患者,尤其是白细胞增高或三项均异常者更常见于白血病;66例（69.5%）外周血分类中发现异常细胞;骨髓侵犯化疗有效率65.2%,中位生存期11.5个月。结论 NHL患者发生骨髓侵犯与临床分期、病理类型和受累部位相关,外周血象多有异常,应常规对初诊NHL患者进行骨髓检查,并要经常检测外周血象。     

非小细胞肺癌患者淋巴结、外周血及骨髓微转移分子诊断在肺癌外科治疗中的作用

目的 探讨检测肺癌患者区域淋巴结、外周血和骨髓中微转移在肺癌外科治疗中的临床意义,以及区域淋巴结、外周血和骨髓肺癌微转移三者之间的相关性。方法 应用巢式RT－PCR技术,对29例肺癌患者和11例肺良性病变患者的淋巴结、外周血和骨髓中CK19基因mRNA表达进行联合检测。结果 本实验建立的巢式RT－PCR技术的敏感性可达到10^-6。术前10例患者检测到外周血微转移,6例患者检测到骨髓肺癌微转移,101枚纵隔淋巴结中55枚检测到肺癌微转移。肺癌患者淋巴结、外周血和骨髓中微转移阳性检出率分别为54．5％、34．5％和20．7％,三者之间存在显著正相关（P＜0．05）,外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P－TNM分期均存在密切关系（P＜0．05或P＜0．01）。结论 RT－PCR法是一种特异性,敏感性均较高的肿瘤微转移检测方法;检测CK19 mRNA表达应用于肺癌微转移的分子诊断有助于选择外科手术适应证,并具有广阔的临床应用前景。     

胃肠道癌患者外周血和骨髓中微转移检测的意义

目的：探讨胃道肠癌患者外周血和骨髓中微转移的检测及其意义。方法：以CK19作指标，用巢式RT－PCR方法检测75例胃、结肠癌患者术前外周血中癌细胞，同时对其中33例患者骨髓进行检测。结果：75例中，24例（32.0％）外周血中检测出CK19mRNA的表达，其中60例胃癌患者的检出率为30.0%(18/60)，15例结肠癌的检出率为40.0%(6/15)。外周血阳性率随着肿瘤分期的增加而增加。其中33例的骨髓阳性率为48.5%，高于这些患者的血液中阳性率（33.3%)。结论：检测外周血和骨髓中微 转移可提高胃结肠癌患者临床分期的准确性，帮助判断患者的预后。     

Quantification of human herpesvirus 6 in healthy volunteers and patients with lymphoproliferative disorders by PCR-ELISA.

To determine whether actual numbers of human herpesvirus 6 (HHV-6) genome in hematologic neoplasias are associated with disease condition, we developed a quantitative PCR-ELISA for detection of HHV-6. The amount of viral DNA was determined using externally amplified known amounts of the plasmid DNA containing the viral target sequences. First, we determined a viral burden in peripheral blood leukocytes obtained from 23 healthy volunteers and four specimens of lymph nodes with reactive hyperplasia. Using 1 microg of DNA, the prevalence of HHV-6 was 43.4% (10/23), ranging from 0 to 100 HHV-6 genomes in blood obtained from healthy volunteers. The amounts of HHV-6 genomes were < 10 in four non-neoplastic lymph node specimens. We next examined the amount of viral DNA in 21 blood specimens and 19 lymph node specimens obtained from patients with lymphoproliferative diseases (LPD) at the time of diagnosis. The number of HHV-6 genomes in most of the B-cell lymphoma was < 5 in both blood and lymph node specimens, however, two lymph node specimens obtained from immunoblastic lymphadenopathy (IBL) and T-cell lymphoma had very high levels of HHV-6 viral DNA (3705 and 810, respectively). We also found that HHV-6 genomes in peripheral blood were more than 1000 in two patients with chronic lymphocytic leukemia. For all LPD patients combined, there were significantly higher levels of viral DNA (200.6 +/- 654.8 HHV-6 genomes per 1 microg purified DNA) compared to those in healthy volunteers (10.0 +/- 21.0 HHV-6 genomes per 1 microg purified DNA) (P < 0.05). This study demonstrates that a high level of HHV-6 viral DNA is occasionally associated with LPD patients. Although it is still uncertain whether HHV-6 is related to the pathogenesis in LPD or not, our results suggest that measurement of HHV-6 genomes using PCR-ELISA may be useful not only to understand the mechanism of HHV-6 infection in hemopoietic neoplasia but also to manage the care of immnocompromised patients such as bone marrow transplant patients.     

胃癌患者外周血及骨髓微转移检测的临床意义

目的:探讨检测胃癌患者外周血和骨髓CK20 mRNA表达的敏感性、特异性及临床意义.方法:采用RTPCR技术,同时对照检测49例胃癌患者、5例胃良性病变患者及5例健康志愿者骨髓与外周血中的CK20 mRNA表达.结果:49例胃癌患者中,骨髓和外周血CK20阳性表达率分别为49.0%(24/49),32.7%(16/49),二者差异有统计学意义(P＜0.05).其中2例外周血CK20表达阳性,骨髓表达阴性.健康志愿者及良性病变患者外周血及骨髓中未检测到CK20表达.本实验中CK20 mRNA RT-PCR技术的灵敏度为10～-5.胃癌的微转移状况与组织分化程度和肿瘤TNM分期有关.结论:应用RT-PCR法以CK20为标志物检测胃癌微转移细胞特异性高.骨髓检测胃癌微转移较单次采血更敏感,但外周血检测仍能提供一些有价值的资料.     

检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的临床意义

目的探讨检测肺癌患者外周血和骨髓微转移的特异性、敏感性及临床意义。方法应用巢式RT-PCR技术,检测59例肺癌患者、11例肺部良性病变患者和20例健康人外周血、骨髓中CK19 mRNA表达。结果巢式RT-PCR检测技术的敏感性达到10-6。59例肺癌患者中,20例检测出外周血微转移,13例检测出骨髓微转移,其阳性检出率分别为33.9％(20/59)和22.0％(13/59),二者有显著正相关(P<0.05)。肺癌患者外周血和骨髓微转移与肺癌组织学类型、细胞分化程度及P-TNM分期均存在密切关系(P<0.05或P<0.01)。肺良性病变患者、健康人外周血和骨髓中均未检测出CK19 mRNA表达。结论肺癌患者外周血和骨髓中均存在用常规方法检测不出的微转移;应用巢式RT-PCR技术检测肺癌患者外周血和骨髓中CK19 mRNA表达,对肺癌微转移的分子诊断具有重要的理论意义和临床应用前景。     

MUC1基因在血液系统恶性肿瘤中的表达及临床意义

  目的 探讨MUC1基因在血液系统恶性肿瘤中的作用机制、临床意义及在肿瘤生物治疗中的应用前景。方法 应用半定量RT-PCR检测了55例血液系统恶性肿瘤患者的骨髓及外周血标本中MUC1基因的mRNA表达。其中多发性骨髓瘤（MM）10例、白血病21例、淋巴瘤24例,对照组外周血和骨髓各10例。结果 10例MM患者MUC1mRNA阳性表达率8／10（80 %）和12例急性髓性白血病（AML）阳性表达率7／12（58.3 %）均高于对照组1／10（10 %）（P＜0.05）。24例淋巴瘤患者阳性表达率13／24（54.1 %）,其中非霍奇金淋巴瘤（NHL）阳性表达率11／21（52.4 %）,霍奇金淋巴瘤（HD）阳性表达率2／3（66.7 %）,均高于对照组0／10（0）（P＜0.05）。MUC1高表达与AML患者的髓外浸润呈正相关,与淋巴瘤患者的分期呈正相关。结论 MUC1mRNA在血液系统恶性肿瘤中高表达,其表达与血液系统恶性肿瘤的病情进展及预后相关。为MUC1作为血液系统恶性肿瘤治疗性疫苗的研究从mRNA水平提供有力的证据。     

Qualitative and quantitative analysis of human herpesviruses in chronic and acute B cell lymphocytic leukemia and in multiple myeloma.

Real-time quantitative polymerase chain reaction (qPCR) was used to quantify viral loads of human herpesviruses (HHVs) at diagnosis in 61 samples of malignant B cells: 21 chronic lymphocytic leukemia (B-CLL), 29 acute lymphoblastic leukemia (B-ALL) and 11 multiple myeloma (MM); control samples were blasts from 16 acute myeloid leukemia (AML) and 24 blood or bone marrow samples from healthy donors. The majority of samples from healthy donors and patients (B-ALL, B-CLL or AML, but not MM) was positive for EBV and contained <100 ebv copies/100 ng dna. ebv loads were occasionally high (>500 copies/100 ng DNA) in B-ALL (2/16) and in B-CLL (2/21) samples. The fractions of samples positive for HHV-8 and HHV-6A, less than 10% for MM patients, were high for adults with B-ALL (18.8% HHV-8+, 43.8% HHV-6A+) or B-CLL (28.6% HHV-8+, 52.4% HHV-6A+). B-ALL, B-CLL and MM samples were rarely positive for HHV-6B and HHV-7. Lastly, 75% of B-ALL samples were positive for CMV, and CMV loads were significantly higher in B-ALL samples than in MM, B-CLL or AML samples. We also used PCR with consensus-degenerate hybrid oligonucleotide primers (CODEHOP) to look for novel HHVs in B cell samples: no sequence indicative of a new HHV was detected. Altogether, the data indicate that the presence of multiple HHVs, including EBV and CMV at high loads, is not rare in B-ALL and B-CLL cell samples. Future prospective studies should determine whether patients with high EBV/CMV loads at diagnosis in tumor samples face a higher risk of delayed hematological recovery, virus-related complications or relapse.