双向凝胶电泳技术在胰腺癌蛋白质组学研究中的应用及条件优化

目的将双向凝胶电泳技术用于胰腺癌蛋白质组学研究并对其条件进行优化。方法对胰腺癌组织、癌旁组织、胰液等标本在组织研磨、裂解、蛋白抽提及双向凝胶电泳等各个环节进行调整和优化。结果液氮研磨法可得到更多的蛋白质点;超声方法去除组织中核酸效果较好;二硫苏糖醇（DTT）平衡时间12—15min,碘乙酰胺（IAA）平衡时间应等同或略长于DTT平衡时间时可得到高质量图谱;丙酮沉淀法可获得较多的胰液生物标志物蛋白点;将2—3根长度〈13cm的IPG胶条在1块凝胶上进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）的方法（Msoc）使双向电泳的重复性和通量显著提高。结论本研究成功建立了双向凝胶电泳技术平台,所获得的电泳图谱分辨率高、重复性好,能够较好地用于胰腺癌蛋白质组学研究。     

高脂血症对胰腺组织损伤机制的蛋白质组学分析

目的 探讨高脂血症对大鼠胰腺的损伤机制.方法 采用断乳1周雄性SD大鼠,随机分成2组,各5只.一组为高脂血症组,喂以高脂饮食,另一组为对照组,喂以普通饲料.实验6周后处死动物,取胰腺组织,裂解提取蛋白质.采用相差凝胶电泳(DIGE)和二极质谱技术,检测两组胰腺组织蛋白质差异,并用Western blotting验证.结果 高脂血症组胰腺与正常胰腺相比,上调蛋白质3种,其中精氨酸酶Ⅱ、甘氨酸脒基转移酶、核糖核酸酶抑制剂分别为对照组的2.19倍、1.82倍和1.12倍;下调蛋白质11种,酪氨酰tRNA合成酶、α-淀粉酶、脂肪酶、DJ-1蛋白和Cu、Zn超氧化物歧化酶等较对照组分别下降2.48倍、2.37倍、1.85倍、1.73倍和1.65倍(P＜0.05).Western blotting显示高脂血症组胰腺的精氨酸酶Ⅱ表达较对照组明显增强,α-淀粉酶表达较对照组明显减弱.结论 高脂血症胰腺组织中精氨酸酶升高可能是高三酰甘油对胰腺造成损伤的机制之一,而淀粉酶和脂肪酶下降可能为胰腺自身保护机制.     

蛋白质组学技术在消化疾病研究中的应用

随着人类基因组草图的初步完成,生命科学已经跨入“蛋白质组学”的新时代。蛋白质组学以基因组编码的所有蛋白为研究对象,从细胞水平及整体水平上研究蛋白质的组成及其变化规律,从而深入认识有机体的各种生理和病理过程。蛋白质组学主要包含3个方面:(1)表达蛋白质组学(expressi     

蛋白质组学在人类疾病研究中的应用

蛋白质组学是后基因组时代生命科学研究的热点和前沿领域,应用蛋白质组学对临床疾病进行研究,不仅从蛋白质水平上揭示疾病的本质,还有助于全面探讨其病理生理机制,寻找诊断和预后标志物,发现药物治疗靶点。目前蛋白质组学广泛用于肿瘤、心血管疾病和肾脏疾病等领域。     

蛋白质组学及其在人类疾病研究中的应用

一、蛋白质组学的产生和概念以人类基因组“工作框架图”完成为标志 ,生命科学已进入了后基因组时代 ,生命科学研究的重心已从揭示生命的所有遗传信息转移到在分子整体水平对功能的研究上 ,从而产生了功能基因组学 (ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｇｅｎｏｍｉｃｓ)。但是基因仅是遗传信息的携带者 ,而生命功能的真正执行者是蛋白质 ,仅仅从基因的角度来研究是远远不够的。人类基因组测序草图显示 ,人类共有 3 0万～ 3 5万个基因 ,而与蛋白质合成有关的基因只占基因组的 2 % [1 ] ,如此有限和相对稳定的基因与蛋白质表达的时空多样性、动态性形成鲜明…     

蛋白质组学在消化系疾病中医药研究中的应用

自然界各种生命物质都是由蛋白质组成的,各种蛋白质按不同的组成、结构和修饰,组成各种细胞和生命物质.蛋白质组学通过从整体角度分析细胞内动态变化的蛋白质组成、表达水平、修饰状况、蛋白质之间以及蛋白质与其他生物分子之间的相互作用,从而了解蛋白质的功能及其在生命过程中的作用.它包括双向凝胶电泳、生物质谱鉴定、生物信息学.当人体中某部分发生生理、病理变化时,该机体组织的蛋白质组发生变化,或代谢物的蛋白质组发生变化,就可以通过蛋白质组学技术找到这些新产生的蛋白质(称为"上调"或"表达增高)或减少甚至消失的蛋白质(称为"下调"或"表达降低"),这些蛋白质叫做"差异蛋白",是用于研究生理、病理变化诊断的潜在"靶点".     

蛋白质组学在肝脏疾病中的应用

蛋白质组学是系统研究分子体系、亚细胞系、细胞、组织、器官乃至整体水平蛋白质组成及其活动规律的一门学科。蛋白质组学技术为开展肝病研究建立了新的技术平台,并已成功筛选出一些具有潜在应用价值的蛋白标记物,用于肝病诊断和预后判断,同时发现一些新的药物治疗靶点,为肝脏疾病的诊断和治疗带来了新的机遇。本文旨在介绍蛋白质组学的相关研究技术及其在肝脏疾病研究中的应用。     

蛋白质组学研究方法

随着人类功能基因组计划的实施和推进，以蛋白质组(Proteome)和蛋白质组学(Proteomics)的提出为标志，人类从蛋白质水平全面揭示生命本质的研究进入一个全新的领域。“工欲善其事，必先利其器”，近年来蛋白质组学的迅猛发展与研究方法的改进和研究手段的提高是密不可分的。蛋白质组学的发展是伴随着蛋白质研究技术，尤其是双向凝胶电泳(2-D凝胶电泳)和新型质谱技术以及生物信息学的发展而发展的。本文将对主要蛋白质组学技术作一概述。     

蛋白质组学在肺癌研究中的应用

肺癌是引起人类死亡的主要病因之一,因为缺乏早期诊断的有效方法,近十几年虽然各种肿瘤的生存率得到了不同程度的提升,但是肺癌的5年存活率仍然不到10%.蛋白质组学是继基因组学后提出的一个新概念.它在肺癌中的应用使得我们对肺癌的发病机制有了更深的认识.为寻找肺癌各种特异性生物标记物提供了更好的平台,为肺癌的诊断和鉴别诊断提供了更好的依据.本文主要介绍了蛋白质组学的主要研究方法及其在肺癌诊断和鉴别诊断中的研究现状.     

蛋白质组学及其在寄生虫学研究中的应用

蛋白质组学是研究生命体的一种重要的高通量研究手段， 本文介绍了蛋白质组学的研究内容及主要技术， 并对现代蛋白质组学在寄生虫领域的发展进行了综述。     

蛋白质组学及其在寄生虫学中的应用

随着多种生物基因组测序计划的完成,应用蛋白质组学方法在整体水平上研究复杂生命现象的后基因组时代已经到来.蛋白质是生物生长、分化、代谢及调控的主要执行者,因而蛋白质组学方法成为研究生物体不同状态下差异蛋白表达非常重要的技术手段.差异蛋白质组学主要用于筛选和鉴定不同种类和状态下各样本之间蛋白质组之间的区别和变化,寻找任何有...     

蛋白质组学在心力衰竭研究中的应用进展

鉴于世界范围的高发病率及高死亡率,心力衰竭已受到越来越多的关注。蛋白质组学技术现已能对组织和血液中的蛋白谱、蛋白功能、蛋白之间的相互作用进行相关研究。目前,该技术已被有效地应用于各项心衰研究,并发现多种蛋白表达水平变化与心衰发生、发展有着密切联系。相信随着蛋白质组学技术更迅速的发展,以及更广泛地被运用于心衰研究,人们将会不断深化对该疾病的认识,并有潜力发现更多新的生物学标志,从而为心力衰竭的诊断、评估、治疗等提供有效指导。     

Pancreatic tuberculosis: an elusive diagnosis

BackgroundPancreatic tuberculosis is a rare disease. Its presenting features are usually vague and non-specific, while the radiological features mimic pancreatic malignancy in many cases and pancreatitis in others. Ultrasound- or CT-guided fine-needle aspiration cytology (FNAC) or biopsy may show caseating granulomatous inflammation but microbiological confirmation may not always be possible. Laparotomy may be required if other investigations prove inconclusive. The response to treatment is good.Case outlinesWe report two young men with pancreatic tuberculosis. The diagnosis was obtained by FNAC in one and laparotomy in the other. Each patient responded to anti-tuberculous chemotherapy and is now asymptomatic.ConclusionTuberculosis should be considered in the differential diagnosis of an obscure pancreatic mass, and the condition is readily curable.     

蛋白质组学与中医药现代化研究

结合中医药的历史发展与现状，探讨复杂生命现象时。蛋白质组学技术在对机体的整体性认识与中医理论上的认识有一定的趋同性，从蛋白质组学在揭示中医证候研究、中药作用机理研究、中药药效评价方面的作用，说明将蛋白质组技术应用于中医药现代化研究，对于加快传统中医药与现代生命科学技术的结合。推动中医药现代化国际化必将产生重大影响。     

胰腺癌的蛋白质组学研究进展

胰腺癌高居于癌症致死病的第四位,诊断后5年生存率小于5%,需要寻找新型生物标志物来提高早期诊断,并发现有效的治疗新靶点。蛋白质组学技术的发展提供了更好的分辨率和灵敏度,有助于在蛋白水平上更好地理解肿瘤发病机制,进而提高早期诊断和治疗的能力。近来在胰腺组织、胰液、血清、血浆、细胞株的蛋白质组学诸多研究鉴定了胰腺癌的差异表达蛋白,并发现新的潜在诊断生物标志物。本文就近年来胰腺癌的蛋白质组学研究结果及局限性做一综述。     

蛋白组学在大肠癌研究中的应用

利用蛋白组学筛选、检测和鉴定大肠癌的生物学标志物,并应用于临床治疗成为了大肠癌研究的最前沿领域和热点之一。本文对近年来蛋白组学在大肠癌研究中的应用进展予以简要综述。     

蛋白质组学与胃肠相关心因性疾病

蛋白质组学以细胞、组织或机体内全部蛋白质为研究对象,研究其结构、功能和相互作用,具有高敏感性和特异性。蛋白质组学可发现精神疾病的特异性标记物,提高对精神疾病病理和发病机制的认识。采用蛋白质组学检测精神疾病的特异性蛋白质图谱,继而建立实验诊断模型,可为精神疾病的病因、诊断、分型、潜在药物靶点等的研究提供科学依据。本文就蛋白质组学与胃肠相关心因性疾病的关系作一综述。