探讨新型隐球菌脑膜炎不同检测方法的诊断价值

目的比较新型隐球菌脑膜炎不同检测方法的试验效果,评价各方法学在新型隐球菌脑膜炎诊断中的临床价值。方法采用隐球菌抗原胶体金免疫层析法、印度墨汁染色、隐球菌真菌肉汤培养在隐球菌感染时对脑脊液标本进行同期检测并对结果进行比较,评价各方法学优劣。结果隐球菌胶体金法灵敏度100%,特异性98.33%;墨汁染色灵敏度65.95%,特异性98.33%;隐球菌培养灵敏度63.63%,特异性100%。结论不同检测方法在隐球菌脑膜炎诊断中都具有一定的临床意义,隐球菌抗原胶体金免疫层析法对隐球菌脑膜脑炎患者的快速诊断具有重要的参考价值。     

隐球菌荚膜抗原胶体金免疫层析法在非HIV患者隐球菌脑膜炎诊断中的价值

目的探讨隐球菌荚膜抗原胶体金免疫层析法在非HIV患者隐球菌脑膜炎中的诊断价值。方法回顾性分析2013-2018年复旦大学附属华山医院3627例疑似中枢神经系统感染的住院患者的临床资料,收集符合隐球菌脑膜炎初诊的患者214例,分析各检验结果对隐球菌脑膜炎的诊断价值。结果隐球菌脑膜炎患者多数表现为脑脊液糖和氯化物水平显著下降,蛋白含量增高,白细胞增多且以单核细胞为主,脑脊液真菌镜检和培养的阳性率分别为75.23%和78.04%,脑脊液隐球菌胶体金免疫层析法检测阳性率高达100%。隐球菌脑膜炎患者随治疗时间的推移,脑脊液和血的隐球菌荚膜抗原滴度逐渐下降。结论胶体金免疫层析法适用于非HIV患者隐球菌脑膜炎的快速诊断,灵敏度高、特异性强,对隐球菌肺炎的患者能提前筛查是否有中枢神经系统感染,对荚膜抗原的动态监测有助于隐球菌病治疗疗效的观察。     

乳胶凝集法检测隐球菌荚膜多糖抗原在隐球菌性脑膜炎和隐球菌肺炎中的早期诊断价值

目的 研究乳胶凝集试验在隐球菌性脑膜炎和隐球菌肺炎中的早期诊断价值.方法 选取2005年1月至2006年4月广州市3家医院确诊的隐球菌性脑膜炎和隐球菌肺炎患者24例作为新生隐球菌组;选取念珠菌感染患者50例,细菌感染患者31例,怀疑隐球菌感染患者62例,正常者30名作为非新生隐球菌组,采用乳胶凝集试验检测隐球菌荚膜多糖抗原,并与培养和直接镜检方法相比较,评价其诊断的灵敏度和特异度.结果 乳胶凝集试验、培养和直接镜检3种方法诊断的灵敏度分别为96.2%、70.8%和83.3%,而特异度分别为99.4%、100.0%和100.0%.结论 乳胶凝集试验具有准确率高、快速简便的特点,可作为隐球菌性脑膜炎和隐球菌肺炎的早期诊断方法.     

白念珠菌烯醇化酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立

摘要：目的：建立检测白念珠菌烯醇化酶（enolase, Eno）的双抗体夹心ELISA法,并试用于几种真菌培养上清液的检测。 方法：将抗白念珠菌Eno单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗Eno抗体作为检测抗体,用方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体浓度,建立检测Eno的ELISA法,对方法的精密度、特异性、最低检测限等指标进行评价。用该法检测白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母等不同真菌培养上清中Eno水平。 结果：Eno浓度为20 ng/mL和5 ng/mL时,批内和批间变异系数(CV)分别为6.61%、9.19%和6.98%、13.81%;最低检测限为1.25 ng/mL。本法可从白念珠菌37 ℃培养24 h后的上清中检出Eno,Eno含量与白念珠菌菌丝含量呈正相关。本法对近平滑念珠菌有微弱交叉反应,与热带念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母均无交叉反应。 结论：建立的检测白念珠菌Eno的双抗体夹心ELISA方法有较好的特异性,可用于评价Eno检测在侵袭性白念珠菌感染中的诊断价值。     

新生隐球菌常用哪些检测方法?

答 :新生隐球菌的检测方法有墨汁负染法 ,如脑脊液标本检查。乳胶凝集试验用于检测新生隐球菌的荚膜多糖抗原 ,可以检测脑脊液、血液及其他体液标本。该试验具有很高的特异性和敏感性 ,是少数可以靠免疫学方法诊断的真菌性疾病。该试验还可以检测滴度 ,对疗效监测和估计预后有一定的指导意义。咖啡酸试验 :新型隐球菌可产生深棕色色素。尿酶试验 :新生隐球菌能够产生尿素酶 ,常用Ｃｈｒｉｓｔｅｎｓｅｎｕｒｅａａｇａｒ培养 ,新生隐球菌产生的尿素酶分解尿素 ,使培养基变为红色。新生隐球菌常用哪些检测方法?@陈剑 @李若瑜…     

改进的多重PCR技术鉴定白色念珠菌、新生隐球菌及烟曲霉的实验研究

[目的]建立一种快速而简便的鉴定白色念珠菌、新生隐球菌及烟曲霉的分子生物学方法。[方法]应用通用引物ITS1与ITS4，PCR扩增真菌的内转录间隔区（包含5．8SrDNA），然后将白色念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉的单条种特异性异物与引物ITS1结合，对通用引物的扩增产物进行多重PCR扩增，达到鉴定上述菌株的目的。[结果]实验所采用的所有致病真菌，经通用引物的PCR扩增均能扩增出特异性的条带，而非真菌菌株扩增为阴性；白色念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉的3种种特异性引物与ITS1结合进行的多重PCR扩增，只对目的菌株进行了有效扩增，其他菌株扩增为阴性。应用此方法对临床分离的菌株，白色念珠菌，新生隐球菌，烟曲霉进行鉴定，也得到特异性扩增条带。[结论]改进的多重PCR技术，更加经济，简单，快速，为致病真菌菌种的鉴定提供了有效手段。     

(1,3)-β-D葡聚糖检测联合其他微生物学检测在侵袭性真菌病诊断中的相关性分析

目的研究(1,3)-β-D葡聚糖检测(G 试验)联合真菌涂片、真菌培养及隐球菌荚膜抗原检测等微生物学检测在侵袭性真菌病(IFD)诊断中的临床意义。方法收集2018年2-12月在复旦大学附属华山医院同时进行G试验、真菌涂片、真菌培养的942例患者资料,其中184例另行隐球菌荚膜抗原检测。回顾性分析G试验、真菌检测和隐球菌荚膜抗原检测结果,分别计算不同检测方法及联合检测的灵敏度、特异度、阳性和阴性预测值。结果 942例患者中,确诊IFD 115例,拟诊33例,疑似154例,非感染640例。对除隐球菌病外的IFD诊断的灵敏度、特异度:G试验单独检测时为92.9%、59.0%;真菌涂片为57.5%、96.6%;真菌培养为77.9%、93.0%;三者联合检测时为97.3%、93.2%。对于隐球菌病,G试验灵敏度、特异度分别为77.1%、81.2%。结论 G试验灵敏度良好,特异度一般。将G试验与传统真菌学检测方法联合使用,能弥补单项检测不足,可作为辅助指标为临床及时正确诊断提供帮助。     

血液分枝杆菌/真菌培养瓶在获得性免疫缺陷综合征患者血流感染诊断中的应用

目的了解血液分枝杆菌/真菌培养瓶在获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者中应用的情况,以及分枝杆菌/真菌在AIDS患者血流感染病原菌中的分布情况。方法采集住院AIDS患者血液进行分枝杆菌/真菌培养。结果 3 012例AIDS患者送检血培养标本,培养阳性425例,阳性率14.1%;分离病原菌425株,其中真菌195株,菌种依次为马尔尼菲篮状菌129株、新生隐球菌62株、其他真菌4株;检出分枝杆菌属172株,其他细菌58株。结论 AIDS患者使用血液分枝杆菌/真菌培养瓶,真菌和分枝杆菌属感染率分别是6.5%(195/3 012),5.7%(172/3 012);病原菌检测前三位分别是分枝杆菌属、马尔尼菲篮状菌和新生隐球菌。与文献报道不尽相同。     

三种阴道分泌物念珠菌检测方法的比较及临床应用

目的：阴道分泌物念珠菌三种检测方法（盐水湿片法、五联检测法、真菌培养法）的比较及临床应用.方法：对477例疑似阴道念珠菌感染标本同时做盐水湿片、五联检测和真菌培养检测.结果：盐水湿片检测,五联检测及真菌培养检测分别显示阳性率为22.5％,34.1％,45.2％.五联检测与盐水湿片法阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）,五联检测与真菌培养阳性率差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：盐水湿片法快速方便,但阳性率较低,五联检测结果稳定快速,但易受干扰因素影响.实验室应结合二种方法,提高患者阳性率检测.真菌培养能鉴定念珠菌菌株及报告药敏试验,适用于念珠菌反复发作的患者.     

国产隐球菌荚膜多糖胶体金法检测试剂盒性能评价

目的 评价由丹娜(天津)生物科技股份有限公司生产的隐球菌荚膜多糖检测试剂盒(胶体金法,考核试剂)的检测性能.方法 选取隐球菌和隐球菌近缘菌及肺部感染常见菌种共28属100株菌作为研究对象,配制0.5麦氏浊度单位(0.5 M)菌液检测试剂的特异性,0.5 M阳性的菌株以10倍倍比稀释液作为灵敏度检测菌液,以2 M和4 M...     

两步法聚合酶链反应在深部真菌感染诊断上的应用

本研究采用两步法聚合酶链反应 (two stepPCR)技术 ,检测 95份怀疑深部真菌感染的临床标本 ,并与真菌分离培养进行比较。一、材料和方法1.研究对象 :标本取自可疑深部真菌感染患者 ,90例病人共收集标本 95份 (血标本 64份 ,尿标本 10份 ,脑脊液标本 10份 ,胸水 5份 ,腹水 6份 )。严格无菌采样 ,标本 1式 2份 ,分别用于真菌分离培养和PCR检测。实验所用真菌菌种包括白念珠菌CCCC17C1a、近平滑念珠菌CCCC17C、热带念珠菌CCCC17C2a、新生隐球菌CCCC17D、罗伦隐球菌CCCC17Y2、烟曲霉A1、黑曲霉A3、红曲霉CCCC17B3 8、花果曲霉CC…     

恒温扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中的应用

目的 评价恒温扩增芯片法在下呼吸道感染病原体检测中的应用价值.方法 选取四川大学华西医院2021年1—6月下呼吸道疑似感染患者1432例作为研究对象,采用恒温扩增芯片法检测感染病原体阳性率并与细菌传统培养法检测结果进行比较分析.结果 研究对象采用恒温扩增芯片法检测出阳性例数为597例(阳性率为41.7％),采用细菌传统...     

荧光定量聚合酶链反应检测常见致病真菌方法的建立

目的建立快速的检测临床致病真菌的荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法。方法使用真菌的通用引物ITS86和ITS4,检测临床常见的致病性真菌,并观察检测方法的敏感性和特异性。结果建立的荧光定量PCR可以准确地检测念珠菌属、曲霉菌属和新型隐球菌等常见的致病真菌,白色念珠菌的敏感性为0.87fg,光滑念珠菌的敏感性为4.2fg,与细菌和人类基因组DNA以及病毒DNA均无交叉反应,根据融解曲线的Tm值可以进行菌种的初步鉴定。结论荧光定量PCR方法检测真菌的敏感性和特异性好,可以应用于临床进行快速检测。     

一种快速提取新生隐球菌及其他酵母样真菌DNA方法

目的寻找一种快速提取酵母样真菌DNA的方法。方法使用酶溶解法提取新生隐球菌及其他酵母样真菌DNA,并对提取的DNA通过特异性引物进行PCR,所得产物进行酶切验证。结果用此方法提取的新生隐球菌基因组DNA浓度为280～395ng/μL,OD260/OD280比值为1.6～1.8,所提取的DNA可用于PCR的扩增检测特异性酵母样真菌。结论该方法可以用于提取新生隐球菌及其他酵母样真菌。     

两种方法检测阴道念珠菌的对比研究

目的采用两种方法即盐水湿片法和真菌培养法检测阴道念珠菌，其真菌培养法中同时进行2种培养：沙保琼嘉培养和科玛嘉念珠菌显色培养，并同时比较他们的方法学异。方法对250例阴道炎病人的分泌物同时做盐水湿片及真菌培养。结果调查250例阴道炎病人盐水湿片法从90例阴道炎病人的分泌物找到了芽孢及假菌丝，阳性率为36．0％，而真菌培养法中，沙保琼脂培养阳性率41．6％，科玛嘉培养基总的阳性率42．8％。结论盐水湿法能快速检测真菌，但阳性率低于培养法，真菌培养法能将念珠菌鉴定到种并做出药敏试验有利于临床用药，但所需时间较长（平均2～3d），不利于快速诊断，早期治疗。需根据临床者疾病特点选择不同的检测方法或几种检测方法相互结合，避免误诊或漏诊。     

念珠菌分型及药敏实验

目的：检测STD病人念珠菌细菌型及药物敏感性。方法：分别采用念珠菌显色培养基和K-B纸片扩散法进行念球菌分型及药敏实验。结果：948份标本经念珠菌显色培养基分离鉴定出念珠菌480例（50.6%)，其中，白色念珠菌365例（38.5%)，热带念珠菌47例（5.0%)，克柔氏念珠菌30例（3.2%)，光滑念珠菌14例（1.5%)，混合感染念珠菌24例（2.5%) .不同型念珠菌对常见抗真菌药物氟康唑、制霉菌素、酮康唑的敏感性依次为：（1）白色念珠菌；95.6%，92.6%，93.4%，（2）热带念珠菌：53.2%，93.6%，42.6%，（3）克柔氏念珠菌：21.0%,93.3%,83.3%.(4)光滑念珠菌：50.0%,92.9%,57.1%。（5）混合感染念珠菌：45.8%、91.7%、62.5%。结论：念珠菌显色培养基可用于快速鉴定念珠菌的细菌型；不同型念珠菌的药敏谱存在差异。     

LA检测隐球菌荚膜多糖抗原在隐球菌性脑膜炎诊断中的应用

目的 探讨乳胶凝集试验（LA）在隐球菌性脑膜炎中的早期诊断价值.方法 收集56例确诊的隐球菌性脑膜炎患 者和25例结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎患者的脑脊液,采用乳胶凝集试验检测隐球菌荚膜多糖抗原,并与真菌培养和直接镜检方法相比较,评价其诊断的灵敏度和特异度.结果 乳胶凝集试验、真菌培养和直接镜检3种方法诊断的灵敏度分别为91.1％、69.6％和73.2％,乳胶凝集试验特异度分别为96.0％、100％、100％.结论 乳胶凝集试验检测隐球菌荚膜多糖抗原可作为隐球菌性脑膜炎的早期诊断方法.     

斑点杂交法用于检测烟曲霉菌感染的实验研究

目的:建立一种利用DNA探针快速检测烟曲霉菌的斑点杂交方法。方法:在烟曲霉特异的碱性蛋白酶基因序列内设计引物,聚合酶链反应合成一段465bp的DNA探针,用地高辛标记探针并与烟曲霉、黄曲霉、念珠菌、隐球菌等真菌以及细菌DNA行斑点杂交,并将该方法应用于临床标本的检测。结果:所合成的探针具有高度特异性,与其他真菌、细菌间无交叉反应,该方法的敏感性达100fg。100份临床标本曲霉培养阳性者6份,杂交阳性者13份。结论:斑点杂交法具有快速、敏感、特异的优点,对烟曲霉菌感染的快速诊断有重要意义。     

(1,3)-β-D葡聚糖、半乳甘露聚糖、隐球菌荚膜多糖抗原联合检测对晚期艾滋病感染患者的临床意义

目的探讨(1,3)-β-D葡聚糖(BG试验)、半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)和隐球菌荚膜多糖抗原联合检测对晚期艾滋病感染患者的临床意义。方法收集AIDS晚期患者120例,根据侵袭性真菌病(IFD)诊断标准,真菌阳性数是70例。回顾性研究他们的CD4数量,真菌培养情况,BG试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原检测的敏感性和特异性的统计结果。结果 IFD组与非IFD组的CD4绝对值比较,前者显著小于后者(55±13/μl VS 250±45/μl,P0.05),90%IFD组CD4绝对值小于50/μl。120例AIDS患者中真菌培养出60例阳性(50.0%)。单独BG试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原试验的敏感性分别为:42.9%、64.3%、14.3%;特异性分别为:75.0%、90.0%、100.0%。三者联合应用的敏感性和特异性分别为:95.7%、78.9%,三者联合应用的敏感度显著大于单独试验的敏感度(P0.05),也显著大于真菌培养阳性率(95.7%VS 50%,P0.05)。结论AIDS晚期患者,尤其当CD4绝对值小于50/μl时患真菌感染概率很高,BG试验、GM试验、隐球菌荚膜多糖抗原试验的联合检测可以提高真菌诊断的敏感性,具有重要的临床意义。     

3126例血培养结果的细菌学分布及耐药性分析

目的 统计分析2008～2010年3 126例血培养标本中分离的病原菌分布及耐药情况,指导临床合理使用抗生素.方法 采用全自动血培养仪Bact/Alert 120及专用血培养瓶,阳性血培养转种血/中国兰培养基和巧克力培养基,细菌鉴定采用VITEK 2 COMPACT全自动细菌分析仪,药敏试验采用K-B法.结果 血培养阳性率为16.86%,检出致病菌共527株,革兰阳性球菌以凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌占优势,革兰阴性杆菌以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌居多,真菌以白色念珠菌居多;凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对万古霉素、替考拉宁、阿米卡星、米诺环素较敏感,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦和阿米卡星较敏感.结论 河北省邯郸市中心医院血液标本细菌检出率较高,以革兰阳性菌为主,抗生素耐药率高.了解血液感染细菌的分布特征和耐药性,对减少院内感染,指导临床合理使用抗生素有重要意义.