RP-HPLC法测定人血清中水杨酸的浓度

目的：建立测定人血清中水杨酸浓度的方法。方法：采用反相高效液相色谱法，HYPERSIL ODS（200×4．6mm，5μl）色谱柱；流动相：甲醇：1％乙酸（45：55）；流速：0．9ml／min；检测波长：299nm；柱温：35℃。结果：水杨酸在0．51-32．64μg／ml范围内有良好的线性关系，r=0．9999，血清中药物最低检测浓度为0．1μg／ml（S／N=3），提取回收率为90％，血清中三种浓度回收率分别为103．92％、99．68％、99．51％，日内、日间RSD分别为3．9％、1．6％、1．0％及5．9％、3．2％、1．9％。结论：本法操作简单、快捷，方法灵敏度和准确度较高，适用于血药浓度及生物利用度的测定。     

高效液相法同时测定血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥的实验方法学研究

【摘要】目的建立高效液相色谱／二极管阵列同时测定血清中卡马西平、苯妥英钠、苯巴比妥含量的检测法。方法以600μl乙酸乙酯为萃取溶剂;样品用量0．2ml血清,萃取时间3min,以3500r／min速度离心4min,取400txl萃取剂于75℃水浴中挥发至干;用1．0ml流动相溶解残留物,10000r／min离心20min后进样分析。分析条件：柱温30℃,流动相（甲醇：水=60：40）,波长254nm,实现了3种药物的有效分离。结果在优化条件下,3种待测组分在1．52～120mg／L范围内呈线性,相关系数（r）≥0．999,检出限（S／N=3）为0．4—1．5mg／L,样品的平均加标回收率为91．3％～111％,相对标准偏差（RSD）〈5％。结论该方法确定了最佳样品预处理条件,优化了色谱分离及检测条件,灵敏、准确,能够满足血清中抗癫痫药物浓度的监测要求。     

高效液相色谱法测定隐球菌性脑膜炎患者脑脊液中两性霉素B和伊曲康唑含量

目的建立人脑脊液（cerebrospinal fluid,CSF）中两性霉素B（amphotericin B,AmB）和伊曲康唑（itraconazole,ITZ）含量测定的高效液相色谱方法,并用于隐球菌性脑膜炎患者脑脊液样品的测定。方法脑脊液样品经固相萃取后直接进样。AraB测定采用Gemini5wC18柱,流动相为5mmol／L乙二胺四乙酸二钠（醋酸调pH至4．5）／乙腈（62／38,V/V）,流速0．3mL／min,DAD检测器;检测波长410nm。ITZ测定采用YMC C18柱,流动相为0．2％三氟乙酸／乙腈（45／55,V/V）,流速1．1mL／min,荧光检测器：激发波长260nm,发射波长365nm。结果AmB和ITZ的线性范围均为5ng／mL-100ng／mL,线性相关系数大于0．999,最低定量限为5ng／mL,低、中、高浓度质控样品在日内、日间精密度均小于7．6％。结论该方法灵敏、快速、简便,适用于隐球菌性脑膜炎患者治疗药物监测。     

一种中药复方消毒剂杀灭微生物效果的实验研究

考察由苦参、黄柏、大桉叶、蛇床子等中草药制成的中药复方消毒剂的杀菌作用。载体浸泡定量杀菌试验表明，以其1／2稀释液，对金黄色葡萄球菌作用10min，杀菌率为99．98％；以其1／4稀释液，对大肠杆菌作用20min，杀菌率为99．95％；以其1／2稀释液,对白色念珠菌作用20min，杀菌率为99．93％。菌悬液含25％和50％小牛血清对其杀菌效果无影响。该消毒剂小于54℃温度放置14d（有效期一年试验），杀菌效果基本不足。     

高效液相色谱法测定人血浆罗哌卡因的浓度

目的 建立测定人血浆罗哌卡因浓度的高效液相色谱方法。方法 LC-6A高效液相色谱仪，色谱柱为Hy—persilC18（150mm×4．6mm，5μm）。以布比卡因为内标，流动相采用乙腈：水=17：83（V／V），流速2．0ml／min，在紫外检测波长210nm处进行检测。结果 本方法标准曲线线性方程为Y=1．1236X＋0．0245（y=0．9997，线性浓度范围为0．025～2．5mg／L）；最低检测限为0．0125mg／L；平均方法回收率为99．63％；日间、日内精密度RSD均〈9％。结论 本方法简便、灵敏、快捷、准确，可用于临床上罗哌卡因血药浓度的监测和药代动力学研究。     

高效液相色普法测定铃兰欣的含量

目的用高效液相色谱法同时测定复合制剂铃兰欣成分注射用头孢哌酮钠和舒巴坦钠的含量。方法本法以外标法为基础，色谱条件：以ODS-3反相柱作为分析柱。流动相组成为0．005mmol／L四丁基氢氧化铵-乙腈（825：175，V／V），磷酸调整PH=5．0。流速为1．2ml／min。再自外检测器272nm进行检测。结果本法注射用头孢哌嗣钠和舒巴坦钠的最低检出浓度分别为10mg／L和5mg／L，在20-1000mg／L范围内呈线形，注射用头孢哌酮钠和舒巴坦钠的绝对回收率分别为99．4％-102．9％和95．0％～105．3％．批内和批间RSD分别为1，4％1．5％和1．8％1．9％。结论此方法简便、快速、准确，可作为测定复合制剂铃兰欣含量方法。     

HPLC法测定脑梗死患者血清PDE活性及临床意义

目的建立血清磷酸二酯酶（PDE）活性测定的HPLC方法并探讨其在脑梗死患者的临床意义。方法分离293例脑梗死患者和148例对照组外周血白细胞，匀浆可溶部分为酶样品，以cAMP为反应底物，采用底物的减少来测定PDE的活性。色谱柱为Nova—Pak^18C（3．9mm×150mm，4μm），流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（10：90，V／V）；流速为0．8mL／min，柱温为室温；检测波长为254nm。结果PDE底物（cAMP、cGMP）和系列产物（5＇AMP、5＇GMP、腺苷、次黄嘌呤和腺嘌呤）分离良好。无干扰。cAMP和cGMP检测限分别为0．125μmoL／L和0．0625μmoL／L；平均回收率91．2％～102．8％；日内及日间RSD均〈10％。脑梗死组外周血PDE活性为（13．805±3．121），对照组为（7．334±2．324），差异有统计学意义（P〈0．001）。结论脑梗死患者PDE活性增高；HPLC法简单易行，能精确可靠地测定外周血白细胞的PDE活性。     

RP -HPLC法同时测定蟾麝救心滴丸中蟾酥华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量

目的建立采用RP—HPLC法同时测定蟾麝救心滴丸中蟾酥华蟾酥毒基和酯蟾毒配基含量的方法。方法采用反相HPLC法测定华蟾酥毒基、酯蟾毒配基的含量,C18色谱柱;流动相：乙腈-水,梯度洗脱（0→25min,56：44;26→44min,0：100;45→50min,56：44,V／V）,流速：1．0ml／min,检测波长为296nm,柱温为35℃。结果华蟾酥毒基在0．2118—2．118μg范围内呈现良好的线性关系（r=0．9997）,平均回收率为99．49％,RSD值为1．2％（n=6）;酯蟾毒配基在0．2012—2．012μg范围内,呈现良好的线性关系（r=0．9996）,平均回收率为99．97％,RSD值为1．7％（n=6）。结论RP-HPLC法简便可行、准确、重现性好,可作为蟾麝救心滴丸中蟾酥华蟾酥毒基和酯蟾毒配基的含量测定方法。     

曲咪新乳膏中两种成分的含量测定研究

目的建立高效液相色谱法测定曲咪新乳膏中醋酸曲安奈德及硝酸咪康唑的含量。方法（1）采用C18色谱柱；以甲醇：水（75：25）为流动相；流速1．0mL/min；柱温为室温；检测波长为240nm测定醋酸曲安奈德的含量。（2）采用C18色谱柱；以乙腈：甲醇：0．5％的醋酸铵溶液（42．5：42．5：15）为流动相；流速1．0mL／min；柱温为室温；检测波长为230nm测定硝酸咪康唑的含量。结果醋酸曲安奈德在7．68～38.38μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9996，n=5），平均回收率为99．8％（RSD=0．52％）；硝酸咪康唑在85．10。425．52μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9993，n=5），平均回收率为99．9％（RSD=0．81％）。结论反相高效液相色谱法测定曲咪新乳膏中醋酸曲安奈德及硝酸咪康唑的含量方法简便、灵敏、准确。     

RP-HPLC法测定当归芍药散中芍药苷的含量

目的：建立测定当归芍药散中芍药苷含量的方法。方法：采用反相高效液相色谱法．色谱柱为ODS Diamonsil C18（150min×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-0．5％醋酸（30：70），检测波长为230nm，流速为1．0ml／min。结果：芍药苷在20-100μg／ml浓度范围内有良好的线性关系（r=0．9996）；平均回收率为（99．9±1．6）％，RSD为1．14％。结论：本法测定当归芍药散中芍药苷的含量，结果准确、可靠。     

542例抗痫药副作用的前瞻性研究

本文报告对５４２例癫痫病人抗痫药毒副反应的前瞻性研究结果。在抗痫治疗的１０年中，有９５例（１７．５３％）病人出现没的毒副反应。其中，苯妥英的毒副反应发生率为４６．５７％、卡马西平的发生率为９．６２％、丙戊酸为７．１０％、苯巴比妥为９．６２％。毒副反应中最常见见的是皮诊，共济失调、眼球震颤及胃肠道症状，有３例病人出现明显肝功能损伤。本文还讨论了毒副反应的发生规律及其对策。     

同时测定血清中苯巴比妥、苯妥英及卡马西平的反相高效液相色谱法

为了探讨高效液相色谱法同时测定苯巴比妥（ＰＢ）、苯妥英（ＰＨＴ）、卡马西平（ＣＢＺ）血药浓度的最佳实验条件，将标本在ｐＨ７．６条件下用二氯甲烷提取后经高纯度氮气在５０℃水浴中吹干，再用甲醇重溶后进行色谱分析。色谱条件：ＹＷＧ－Ｃ１８柱（２５０ｍｍ×４．６ｍｍ，１０μｍ），流动相甲醇：水为６０∶４０，流速１ｍｌ／ｍｉｎ，柱温４０℃，波长２５４ｎｍ。结果ＰＢ、ＰＨＴ、ＣＢＺ的最低检出浓度各为０．６７μｇ／ｍｌ、０．９４μｇ／ｍｌ和０．３１μｇ／ｍｌ。在三个不同水平下，ＰＢ、ＰＨＴ、ＣＢＺ的平均回收率各为９８．１４％、９６．７２％和９９．３６％，日内和日间变异均低于６．２５％，内源性物质及１０种常用药物未见干扰，在分析范围内具有良好的线性关系。该方法操作简便、快捷、准确，可满足临床和科研的需要。     

RP-HPLC法同时测定人血清和脑脊液中苯巴比妥、苯妥英钠和卡马西平浓度

目的建立RP-HPLC法同时测定人血清和脑脊液中苯巴比妥（PB）、苯妥英钠（PHT）和卡马西平（CBZ）浓度的方法。方法色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（250mm×4.6mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-水（27.5∶27.5∶45）;流速：1.0mL.m in-1;检测波长：210nm;柱温：40℃;进样量：10μL。结果血清中PB、PHT、CBZ的线性范围依次为：2.64～52.75μg.mL-1、1.45～29.00μg.mL-1、1.04～20.80μg.mL-1;脑脊液中PB、PHT、CBZ的线性范围依次为：1.32～42.20μg.mL-1、0.73～23.20μg.mL-1、0.52～16.64μg.mL-1;血清中PB、PHT、CBZ的平均提取回收率分别为：93.17%、96.17%、94.67%,脑脊液中PB、PHT、CBZ提取回收率接近100%;日间、日内RSD均小于4%。结论本方法简单、快速、准确,适用于临床血及脑脊液浓度的检测。     

抗癫痫药物对血中同型半胱氨酸、叶酸、维生素B12浓度的影响

目的：探讨抗癫痫药物(Antiepileptic Drugs, AEDs)对血同型半胱氨酸(Homocysteine, Hcy)、叶酸、维生素B12(VitaminB12,VitB12)浓度的影响。方法：采用荧光定量法和电化学发光免疫法测定88例服用单一药物治疗的癫痫患者（服用卡马西平、苯妥英钠各30例、服用丙戊酸28例）和30例未服用AEDs的癫痫对照者及40例健康对照者血Hcy、叶酸、VitB12浓度,比较各组间差异。结果：服用卡马西平和苯妥英钠的患者血Hcy水平明显高于癫痫对照组和正常对照组(P＜0.001),叶酸水平明显低于癫痫对照组和正常对照组(P＜0.001),服用丙戊酸的患者血Hcy水平有下降趋势、叶酸水平有上升趋势,但与两对照组相比,差异无统计学意义。VitB12在癫痫组有下降趋势,但与两对照组相比,差异无统计学意义。结论：服用卡马西平、苯妥英钠的患者Hcy水平升高而叶酸水平降低,对这类癫痫患者适当补充叶酸、VitB12可能有益于降低心脑血管病的发病率。     

红霉素对酰胺咪嗪药动学及稳态血药浓度的影响

本文以家兔为实验对象,研究了红霉素对酰胺咪嗪(CBZ)的药动学及稳态血药浓度的影响。结果表明:当 CBZ 与红霉素合用时,参数曲线下面积(AUC)增加而清除率(CL)下降,CBZ 浓度增加,其它参数无明显变化。当 CBZ 处于稳态水平合用红霉素时,则在24小时内其浓度开始升高,连续用药至72小时,平均升高2.3倍。停用红霉素后,在24小时内 CBZ 浓度明显下降,48小时内多数动物可恢复至稳态水平。因此,当长期服用 CBZ 的病人需要抗感染时,最好选用其它种类的抗生素。     

常用抗癫(癎)药物对大鼠认知功能的影响

目的研究常用抗癫癎药物(AEDs)对大鼠认知功能的影响。方法选用健康雄性青春期SD大鼠70只,随机均分为7组。随机选取1组作为正常对照组(NS组),其余6组用戊四氮(PTZ)点燃,致癎后随机选取1组作为癫癎对照组(PTZ组),其余5组分别给予卡马西平(CBZ组)、苯妥英钠(PHT组)、丙戊酸钠(VPA组)、妥泰(TPM组)及拉莫三嗪(LTG组)以控制癫癎发作。治疗2周后采用Morris水迷宫进行认知功能测试。统计学处理采用方差分析。结果TPM组大鼠完成每次测试所用时间大多长于其他6组。TPM组每天测试所用时间均明显长于PTZ、CBZ、VPA和LTG组(P值均<0.05)。将各组之间完成6次测试总时间进行两两比较,TPM组明显长于其他6组(P值均<0.01),PHT组明显长于其余5组(P值分别<0.05、0.01);LTG组明显短于其他6组(P值分别<0.05、0.01)。将各组之间完成4 d测试总时间进行两两比较,TPM组均明显长于CBZ、VPA、PTZ和LTG组(P值分别<0.05、0.01)。TPM组大鼠定向寻找平台象限的时间明显长于其他6组(P值均<0.01)。TPM组定向逗留平台象限的时间明显短于CBZ和LTG组(P值分别<0.05、0.01)。结论TPM和PHT损害大鼠的认知功能,VPA、CBZ和LTG对大鼠的认知功能有一定改善作用。     

左室心肌松弛性对压差半降时间法判定主动脉瓣反流程度的影响

①目的　探讨主动脉瓣反流时左室心肌松弛性对反流的压差半降时间 (PHT)与反流分数 (RF)相关性的影响。②方法　选择 55例主动脉瓣反流病人 ,应用脉冲波多普勒记录二尖瓣口和肺静脉血流频谱 ,测量舒张早期峰值充盈速度 (E)、心房收缩期峰值充盈速度 (A)、E/A比值、舒张早期充盈减速时间 (DECT)、肺静脉血流的收缩波与舒张波的峰值速度比 (S/D)和心房收缩波峰值流速 (Ar)以估测左室心肌松弛性。连续波多普勒记录主动脉瓣反流血流频谱以测量PHT .脉冲波多普勒和二维超声测定左右室每搏量以计算RF .③结果　在全部 55例病人RF与PHT之间存在低相关性 (r=- 0 .31 ,P <0 .0 5) ,在 2 5例无左室心肌肥厚的病人 ,RF与PHT的相关性显著 (r =- 0 .73 ,P <0 .0 0 1 ) ,而在 30例存在左室心肌肥厚的病人 ,RF与PHT之间无相关性。在左室心肌松弛性正常时 ,RF与PHT之间存在显著的相关性 (r =- 0 .67,P <0 .0 0 1 ) ,而在左室心肌松弛性减退时 ,RF与PHT之间相关性消失。④结论　PHT法只适用于估测没有左室心肌松弛性异常的主动脉瓣反流     

Pharmacokinetic study of carbamazepine and its carbamazepine 10,11-epoxide metabolite in a group of female epileptic patients under chronic treatment

BACKGROUND: Although epileptic crises are equally frequent in women and men, several factors cause female epileptics to present a series of gender-specific problems. To date, few studies have been published on the kinetics of carbamazepine (CBZ) and carbamazepine 10,11-epoxide (CBZ-E) active metabolite in a Mexican population, and no information for epileptic women of reproductive age is available. The aim of the present work was to study the pharmacokinetic behavior of this group of women during steady state. METHODS: Fourteen epileptic women under chronic treatment receiving only the anticonvulsant CBZ to control their crises were studied. A blood sample was taken before breakfast, before the morning dose of 200 mg, and after the dose at 1, 2, 3, 4, 5, and 8 h. Serum was separated by centrifugation at 1,350 x g. Serum concentrations of carbamazepine (CBZ) and of the metabolite carbamazepine 10,11-epoxide (CBZ-E) were measured by HPLC. Pharmacokinetic parameters were calculated by statistical moment method after obtaining serum concentrations. RESULTS: Maximum time (T(max)) for CBZ was reached at 2.72+/-0.71 h and for CBZ-E, it was 3.60+/-0.79 h. C(max) for CBZ was 7.30+/-2.30 microg/mL, while C(min) for CBZ was 6.30+/-2.49. Maximum serum values for CBZ-E were 1.01+/-0.57, equivalent to 13.80% of CBZ; t(12) value for CBZ and CBZ-E was 18.20 and 16.10 h, respectively. AUC values for CBZ and metabolite were 70.33+/-17.10 microg/L/h and 9.20+/-2.50 microg/L/h, respectively. CBZ and CBZ-E clearance did not show differences and were 0.37 mL/kg/min and 0.40 mL/kg/min, respectively. Extraction index for serum concentrations of CBZ and CBZ-E AUC(CBZ)/AUC(CBZ-E) was 0.13; positive correlation was observed between serum concentrations of CBZ and E-CBZ, with r=0.94. CONCLUSIONS: The schedule we suggest for therapeutic monitoring of serum concentrations of CBZ in chronic treatments is 3 h for maximum peak concentration of C(max) after dose administration and for minimum peak concentration, C(min) prior to subsequent administration of the dose.     

Carbamazepine drug interactions: the influence of concurrent drug therapy on serum concentrations of carbamazepine and its epoxide metabolite

The influence of concurrent drug therapy (phenytoin, valproate, phenobarbital, primidone) on serum concentrations of total and free carbamazepine (CBZ) and its active metabolite carbamazepine-10, 11-epoxide (CBZ-E) in 135 epileptic patients was studied. Serum CBZ and CBZ-E levels were analyzed by high performance liquid chromatography, whereas serum levels of the anticonvulsants were determined by fluorescence polarization immunoassay. Ultrafiltration was used to separate the free drugs from the protein-bound drugs in serum. Patients were divided into five groups according to the medication they received. Linear regression analyses revealed that concurrent drug therapy affected the metabolic rate of CBZ and CBZ-E in various ways. In patients on CBZ monotherapy, 78.3% of CBZ and 52.4% of CBZ-E were bound to plasma proteins. The total serum CBZ and CBZ-E concentrations significantly correlated with their respective free levels in serum. Compared with the CBZ monotherapy group, patients receiving concurrent drug therapy showed higher CBZ clearance and had elevated CBZ-E/CBZ ratios. Although the decrease in the total CBZ concentration depended on the simultaneous phenytoin and valproate concentrations (p less than 0.05), the serum levels of phenobarbital and primidone appeared to have no significant influence on the CBZ concentration. Since great interindividual variations were found in the serum concentration after a given dose, routine monitoring of the CBZ and CBZ-E serum concentrations is essential in designing a safe and effective therapeutic regimen for epileptic patients, especially for those on polytherapy.     

人血浆中磺胺甲噁唑和代谢产物的HPLC法测定及其药代动力学研究

目的建立人血浆中磺胺甲噁唑及其代谢产物的RP—HPLC测定法,研究磺胺甲噁唑及其代谢产物N4-乙酰磺胺甲噁唑的药代动力学特征。方法血样经高氯酸预处理后,进行HPLC分析,色谱柱为Lichrospher C18（5μm,250inm×4．6mm）,流动相为乙腈-水-冰乙酸-三乙胺（38：62：0．4：0．3,v／v）,流速为1．0ml／min,检测波长为240／lm。结果磺胺甲噁唑和N4-乙酰磺胺甲噁唑分别在1～160μg／ml和0．5～20μg／ml的范围内浓度与峰面积线性关系良好,定量限分别为1μg/ml和0．5μg/ml,日内精密度分别为0．91％～6．83％和1．80％-7．66％,日间精密度分别为2．12％～6．09％和4．16％～8．15％,回收率分别为95．9％～106．0％和98．8％～110．3％。结论建立的人血浆中磺胺甲噁唑及其代谢产物的RP—HPLC分析方法灵敏、准确、简便,适合于磺胺甲噁唑及其代谢产物N4-乙酰磺胺甲噁唑的药代动力学研究。