茶多酚对人羊膜上皮细胞FL系CYP1A1mRNA水平和转录的影响

本文采用快速印迹杂交和延续转录试验两种特异ｍＲＮＡ检测技术，在经β－萘黄酮（β－ＮＦ）诱导的人羊膜上皮细胞ＦＬ系中，观察了茶多酚对人羊膜上皮细胞ＦＬ系ＣＹＰ１Ａ１ｍＲＮＡ水平和转录的影响，结果表明，细胞中ＣＹＰ１Ａ１ｍＲＮＡ的含量和细胞核ＣＹＰ１Ａ１转录水平均比空白对照组增加，茶多酚可明显抑制其基础表达及β－ＮＦ的诱导作用。因此，我们认为茶多酚预防肿瘤的作用还可能与它影响细胞ＣＹＰ１Ａ１基因表达，     

茶多酚对人羊膜上皮细胞FL形成B（a）P－DNA加成物的影响

应用３２Ｐ后标记法检测人羊膜上皮细胞（ＦＬ）经不同浓度茶多酚（２５μｇ／ｍｌ，５０μｇ／ｍｌ和１００μｇ／ｍｌ，终浓度，下同）和β－萘黄酮（２×ｌ０－５ｍｏｌ／Ｌ）所形成的Ｂ（ａ）Ｐ－ＤＮＡ加成物，观察茶多酚化学预防作用。结果表明，茶多酚不仅可以抑制β－萘黄酮对ＦＬ细胞细胞色素Ｐ４５０同功酶的活性的诱导，减少Ｂ（ａ）Ｐ－ＤＮＡ加成物的形成；也可抑制经β－萘黄酮诱导后的ＦＬ细胞形成Ｂ（ａ）Ｐ－ＤＮＡ加成物，而且该抑制效应与茶多酚剂量一致。茶多酚的化学预防作用可能与其影响细胞色素Ｐ４５０同功酶的表达调节以及抑制其活性有关。     

铬,汞,镉,镍四种重金属化合物对FL／P4501A1细胞酶活性的影响

利用不同浓度的重金属化合物溴化汞、三氯化铬、硫酸镉、氯化镍处理人羊膜ＦＬ／Ｐ４５０１Ａ１细胞，其半数抑制浓度（ＩＣ５０，ｍｇ／ｍｌ）分别为６．０２６０，３７．５２１３，２４．５４９１和４５．３８４５。结果表明：不同的重金属化合物对ＦＬ／Ｐ４５０１Ａ１细胞的毒性相差很大，溴化汞和硫酸镉的细胞毒性较大。ＦＬ／Ｐ４５０１Ａ１细胞带有Ｐ４５０１Ａ１基因，该基因产物为乙氧基异吩恶唑Ｏ－去乙基酶（ＥＲＯＤ）。     

细胞色素P4501A1,2D6和谷胱甘肽硫转移酶基因多态性与肺癌易感性的研究

目的探讨细胞色素Ｐ４５０１Ａ１（ＣＹＰ１Ａ１），２Ｄ６（ＣＹＰ２Ｄ６）和谷胱甘肽硫转移酶（ＧＳＴＭ１）基因多态性与肺癌易感性的关系。方法用病例对照研究方法及ＰＣＲ┐ＲＦＬＰ等技术检测原发性肺癌和住院对照各５９例，分析ＣＹＰ１Ａ１基因ＭｓｐＩＣ型、ＣＹＰ２Ｄ６Ｃｈ型（Ｔ／Ｔ型）和ＧＳＴＭ１缺陷型〔ＧＳＴＭ１（－）〕三种纯合突变型频率分布及其交互作用。结果突变型在病例和对照组的频率分别为（ＣＹＰ１Ａ１ＭｓｐＩＣ型２５．４％、１５．３％（Ｐ＝０．１７），ＣＹＰ２Ｄ６ＣｈＴ／Ｔ型３５．６％，４７．５％（Ｐ＝０．２６），ＧＳＴＭ１（－）型５７．６％、４９．２％（Ｐ＝０．４６），无显著性差异。协同分析发现在男性中，１１．６％（５／４３）肺癌兼有ＭｓｐＩＣ型和ＧＳＴＭ１（－）型，对照组无１例（０／４３），Ｐ＝０．０３。结论结果提示在男性中ＣＹＰ１Ａ１ＭｓｐＩＣ型和ＧＳＴＭ１（－）型可能协同增加患肺癌的危险性。     

茶多酚对FL细胞EROD活性及细胞CPYIA1mRNA水平影响的研究

茶多酚对ＦＬ细胞ＥＲＯＤ活性及细胞ＣＰＹＩＡ１ｍＲＮＡ水平影响的研究冯磊，余应年，陈星若（浙江医科大学病理生理学教研室及医学生物学实验室杭州３１００３１）茶多酚是茶叶提取物的主要成份。许多研究表明它具有抑制亚硝胺类和ＡＦＢ１等致癌物对动物的致癌作用。...     

SAM肝细胞色素P4503A对衰老的作用

大鼠肝细胞色素Ｐ４５０含量与年龄相关的变化是由特异的细胞色素Ｐ４５０酶引起的。探讨衰老与细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性是否有关。本文用红霉素Ｎ－脱甲基酶活性测定法分别检测了ＳＡＭ－Ｒ１、ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ８三组衰老加速鼠中肝微粒体细胞色素Ｐ４５０３Ａ的活性。每动动物分为７ｗｋ、３６ｗｋ组。结果发现ＳＡＭ－Ｐ１和ＳＡＭ－Ｐ组中随年龄增长,ＣＹＰ３Ａ的活性均降低。１３ｗｋ时,ＳＡＭ－Ｐ１组ＣＹＰ３活     

CYP2B6cDNA导入V79、FL和CHL细胞中稳定表达及其初步鉴定

ＣＹＰ２Ｂ６ｃＤＮＡ导入Ｖ７９、ＦＬ和ＣＨＬ细胞中稳定表达及其初步鉴定吴健敏，董海涛，余应年，朱丽君（浙江医科大学病理生理学教研室及医学分子生物学实验室杭州３１００３１）细胞色素Ｐ４５０是代谢活化大多数前致突变物／致癌物的主要酶系，在建株细胞中这些基...     

大白菜抑制大鼠体内致癌物PhIP-DNA加合物形成及其可能的作用机理

目的研究大白菜（ｂｒａｓｓｉｃａｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）对结肠致癌物２－氨基－１－甲基－６－苯基咪唑［４,５－ｂ］吡啶（ＰｈＩＰ）致癌的预防作用及机理。方法雄性ＳＤ大鼠喂饲基础饲料或掺有大白菜粉（２０％）混合饲料１０天后,经口摄入ＰｈＩＰ（１０ｍｇ／ｋｇ）。以３２Ｐ－后标记方法分析动物结肠粘膜、心、肺和肝中ＰｈＩＰ－ＤＮＡ加合物含量,并测定参与ＰｈＩＰ代谢的细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ）１Ａ１和１Ａ２以及谷胱甘肽转硫酶（ＧＳＴ）活性。结果经喂饲含大白菜饲料的大鼠,其结肠、心、肺、肝等器官中,ＰｈＩＰ－ＤＮＡ加合物含量显著低于喂饲基础饲料的动物（Ｐ＜０．０１）,抑制率结肠为８２．３％、心脏为６０．６％、肺为４８．４％、肝脏为４８．９％。大白菜对参与ＰｈＩＰ解毒的ＣＹＰ１Ａ１和ＧＳＴ有显著的诱导作用。与对照组比较,喂饲大白菜大鼠的肝ＣＹＰ１Ａ１活性增加８０．６％（Ｐ＜０．０１）,肝和肺细胞浆ＧＳＴ活性分别增加１８．２％和３５．６％（Ｐ＜０．０５）。结论食用大白菜可有效抑制ＰｈＩＰ－ＤＮＡ加合物形成,其作用机理可能是诱导解毒酶     

血清九项肿瘤标志物组合检测原发性肝癌初步评价

用甲胎蛋白（ＡＦＰ）、γ－谷氨酰转肽酶（ＧＧＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、α１－抗胰蛋白酶（α１ＡＴ）、总唾液酸（ＴＳＡ）、铁蛋白（Ｆｔ）、铜蓝蛋白（ＣＰ）、ＬＤＨ同功酶及ＧＧＴ同功酶计９项血清肿瘤标志物作原发性肝癌的鉴别诊断。其中５项计量资料的统计学分布检验证明ＣＰ和ＴＳＡ近似正态（Ｐ＞０．１），ＧＧＴ、ＬＤＨ和α１ＡＴ呈正偏态，经自然对数转换后呈近似正态（Ｐ＞０．１），提示应根据资料分布特征确定     

干扰素及异体骨髓移植对慢性粒细胞白血病细胞β2整合素及L—选择素表达的

目的 探讨慢性粒细胞白血病（ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ,ＣＭＬ）细胞黏附分子Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ（ＣＤ６２Ｌ）、Ｍａｃ－１（ＣＤ１１ｂ）、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ）的表达与ＣＭＬ的发生、疗效的关系。方法 采用三色流式细胞仪检测３４例ＣＭＬ骨髓ＣＤ３４＾＋ＣＤ３８＾－－＋细胞表达ＬＦＡ－１、Ｍａｃ－１、Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达。结果 初治的ＣＭＬ３４＾＋ＣＤ３８＾－－＋细胞黏附分子Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＬＦＡ－１明显低于正常造血细胞的表达。Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达与Ｐｈ’阳性细胞数呈负相关（ｒ＝－０．６８）。８例ＣＭＬ经干扰素治疗后,其Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、Ｍａｃ－１、ＬＦＡ－１的表达均正常。结论 ＣＭＬＣＤ３４阳性细胞黏附分子Ｌ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＬＦＡ－１的低表达反映了ＣＭＬ细胞     

健康人和骨肉瘤病人来源的LAK细胞体外抗瘤作用

采用５１Ｃｒ释放试验对健康人和骨肉瘤病人外周血单个核细胞（ＰＢＭ）在重组白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）条件下，ＬＡＫ细胞的诱导形成及对４种传代瘤细胞的体外杀伤活性进行探讨。实验结果表明：２种来源ＬＡＫ细胞对Ｋ５６２（人慢性髓样红白血病细胞系）、ＳＭＭＣ７７２１（人肝癌细胞系）、ＬＡＸ（人肺腺癌细胞系）的杀伤活性均在５５％以上（按效靶比例５０：１），而对ＯＳ细胞（人骨肉瘤细胞系）的活性普遍低下，杀伤率低于３５％。结果证实：１）健康人和骨肉瘤病人的ＰＢＭ均能在ｒＩＬ－２条件下诱导形成具有广谱抗瘤活性的ＬＡＫ细胞群，二者的杀伤格局和效力相近。２）骨肉瘤细胞本身对ＬＡＫ细胞的杀伤作用存在强烈抗性。     

脑脊液中β2—微球蛋白,铁蛋白,癌胚抗原联合检测对诊断中枢神经？…

我们对３４例急性白血病（ＡＬ）合并中枢神经系统白血病（ＣＮＳ－Ｌ）和８２例ＡＬ不合并ＣＮＳ－１患者患者了脑脊液（ＣＳＦ）中β２－微球蛋白（β２－ＭＧ）、铁蛋白（Ｆｔ）和癌胚抗原（ＣＥＡ）含量测定（ＣＥＡ）含量测定。结果表明：合并ＣＮＳ－Ｌ患者ＣＳＦ中的各单项标记物平均含量均高于不合并ＣＮＳ－Ｌ患者。用阶梯分割线法分析β２－ＭＧ＋ＣＥＡ或≥β２－ＭＧ＋Ｆｔ联合应用的结果表明双标记物联合测定的诊断特异     

重组人粒系集落刺激因子对白血病细胞的作用

作者观察了重组人粒系集落刺激因子（ｒｈＧ－ＣＳＦ）对ＨＬ－６０细胞和原代培养的急性髓系白血病（ＡＭＬ）细胞的作用，结果显示，ｒｈＧ－ＣＳＦ可刺激白血病细胞生长，并诱导部分ＡＭＬ细胞向粒系分化。提示ｒｈＧ－ＣＳＦ对白血病细胞存在着增殖与分化的双重作用，这种作用对改进白血病治疗可能产生重要影响。     

全反式维甲酸激活的人肺腺癌细胞基因的筛选

筛选人肺腺癌细胞中全反式维甲酸（ａｌｌｔｒａｎｓ－ｒｅｔｉｎｏｃｉａｃｉｄ，ＡＴＲＡ）激活表达的基因。方法以我室构建的ＡＴＲＡ诱导前后人肺腺癌细胞系ＧＬＣ－８２的ｃＤＮＡ文库Ｌｉｂ．ＧＬＣ－８２，Ｌｉｂ，ＧＬＣ－８２．ＲＡ１，Ｌｉｂ，ＧＬＣ－８２．ｒａ４ＦＪＴＦ     

细胞色素P450多态及其在肿瘤易感性和突变研究中的进展

细胞色素Ｐ４５０多态及其在肿瘤易感性和突变研究中的进展薛开先江苏省肿瘤防治研究所南京２１０００９近年来，ＣＹＰ４５０及其在肿瘤易感性、诱变性检测和抗突变机理研究中取得了显著的进展，现择要作一综述。１．外源性物质代谢与ＣＹＰ４５０（１－３）外源性化合物...     

逆转录病毒载体介导人 GM-CSF 基因在 HL-60 白血病细胞的高效转移和表达

目的探讨将外源基因导入白血病细胞的条件及可行性，为造血系统恶性肿瘤的基因治疗奠定基础。方法采用脂质体（ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ）包装技术将Ｎ２Ａ／ＣＭＶ／ｈＧＭ－ＣＳＦ导入包装细胞ＰＡ３１７，获得重组逆转录病毒，将重组病毒悬液感染人髓系白血病ＨＬ－６０细胞，经Ｇ４１８筛选出ＨＬ－６０转基因细胞群，应１用ＭＴＴ法测定ＧＭ－ＣＳＦ活性。结果ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测结果证实，ＧＭ－ＣＳＦ基因成功地转移并整合到ＨＬ－６０细胞基因组中，而未转基因和转空载体Ｎ２Ａ的ＨＬ－６０细胞经ＰＣＲ检测未能扩增出特异性片段。经ＧＭ－ＣＳＦ依赖株ＴＦ－１检测，转基因细胞分泌的ＧＭ－ＣＳＦ生物学活性为６０～２００ｎｇ／ｍｌ（细胞１×１０６，培养２４小时），而未转基因及转空载体Ｎ２Ａ的ＨＬ－６０细胞培养上清无ＧＭ－ＣＳＦ活性。结论逆转录病毒载体介导的ｈＧＭ－ＣＳＦ基因能在体外培养的人ＨＬ－６０白血病细胞中获得高效的转移和表达。     

淫羊藿甙逆转转化生长因子β_2免疫抑制作用的抗肿瘤研究

目的：研究淫羊藿甙（ＩＣＡ）对ＰＧ细胞分泌转化生长因子β２（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒβ２,ＴＧＦβ２）的影响、ＩＣＡ逆转ＴＧＦβ２介导的免疫抑制作用及其机制。方法：ＭＴＦ法检测细胞增殖、杀伤活性,ＲＴ－ＰＣＲ检测ＴＧＦβ２、穿孔素,流式细胞术检测ＴＧＦβ２、ＩＬ－２Ｒα水平。结果：ＩＣＡ可抑制ＰＧ细胞中ＴＧＦβ２的蛋白和ｍＲＮＡ表达,能够逆转受ＴＧＦβ２抑制的ＬＡＫ和ＣＤ３ＡＫ细胞的杀伤活性,并能部分恢复受ＴＧＦβ２抑制的ＬＡＫ细胞表面ＩＬ－２Ｒα表达和ＣＤ３ＡＫ细胞内穿孔素ｍＲＮＡ水平,以及ＣＤ３ＡＫ细胞的增殖活性。结论：淫羊藿甙通过抑制肿瘤细胞免疫抑制因子ＴＧＦβ２的产生,增强免疫效应细胞的杀伤活性等机制而发挥抗肿瘤作用。     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞系中通过TRAF2活化NF-kB

目的：为了探讨ＥＢ病毒（ＥＢＶ）中ＬＭＰ１的致瘤机制,对鼻咽癌ＬＭＰ１激活重要的核转录因子ＮＦ－_ＫＢ的机制进行了研究。方法：①以ＬＭＰ１阴性的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２及表达载体（ｐＳＧ５）的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２－ｐＳＧＳ为对照,采用免疫共沉淀－Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法在稳定表达ＬＭＰ１的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ２－ＬＭＰ１中证实ＬＭＰ１与ＴＲＡＦ２是否直接结合形成免疫共沉淀复合物;②在ＨＮＥ２－ＬＭＰ１细胞系导入ＴＲＡＦ２表达质粒或不同剂量ＴＲＡＦ２显性负性突变体（ＴＲＡＦ２Ａ６－ ８６）表达质粒,以 ＮＦ－ｋＢ报道基因方法确定 ＬＭＰ1是否通过 ＴＲＡＦ2活化 ＮＦ－ｋＢ ;③将ＬＭＰ１（１－２３１）（ＣＴＡＲ２缺失区）或ＬＭＰ１△１８７－３５１（ＣＴＡＲＩ缺失区）及不同剂量ＴＲＡＦ２Ａ６－８６瞬时导入ＨＮＥ２中以证实ＬＭＰ１ ＣＴＡＲ１或ＣＴＡＲ２是否介导了这种效应;④以转染或未转染ＴＲＡＦ２６－８６的ＨＮＥ２－ＬＭＰ１细胞系为材料,应用免疫共沉淀－Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法,确定ＴＲＡＦ２△６－８６是否竞争性抑制ＴＲＡＦ２与ＬＭＰ１结合。结果：①在ＨＮＥ２－ＬＭＰ１中ＬＭＰ１与ＴＲＡＦ２形成复合物     

脂质体干扰素α对小鼠Lewis肺癌转移及脾细胞增殖的影响

Ｃ５７ＢＬ／６Ｎ小鼠尾静脉注射Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞后，腹腔注射脂质体干扰素α（Ｌ－ＩＦＮ－α）和未包裹干扰素α（ＩＦＮ－α），连续１０ｄ；测小鼠肺湿重、肺转移结节数和ＣｏｎＡ诱导的脾细胞ＤＮＡ掺入量。结果ＩＦＮ－α５、２０万ｕ·ｋｇ（－１）组，小鼠肺湿重较对照组减小１４．１、１９．６％，肿瘤肺转移结数减少３２．７、５０．０％，ＣｏｎＡ刺激的脾细胞ＤＮＡ掺入量增加２４．６、４６．８％。１／１０剂量的Ｌ－ＩＦＮ－α可产生相同的药理活性。小鼠环磷酸胺５０ｍｇ·ｋｇ（－１）ｉｐ３ｄ后，尾静脉注射瘤细胞，实验处理同上。结果Ｌ－ＩＦＮ－α和ＩＦＮ－α对环磷酰胺处理小鼠的Ｌｅｗｉｓ肺癌细胞肺转移的抑制作用更为明显。本文结果表明，ＩＦＮ－α可抑制小鼠Ｌｅｗｉｓ肺癌转移，促进ＣｏｎＡ刺激的脾细胞增殖，并与剂量明显相关。脂质体包裹ＩＦＮ－α可使其生物活性提高约１０倍。对免疫功能受抑小鼠作用更为显著。     

粘附性淋巴因子活化的杀伤细胞抗自体白血病细胞作用的研究

建立了一套培养和处理粘附ＬＡＫ细胞（Ａ－ＬＡＫ）的系统，将１２例缓解期急性髓系白血病（ＡＭＬ）患者（ＲＰＳ）的Ａ－ＬＡＫ细胞与常规制备ＬＡＫ细胞（ＲＴ－ＬＡＫ）进行了对照研究，结果显示ＲＰＳ－Ａ－ＬＡＫ细胞于培养第１０天时其扩增指数（２０．１±１３．９）较ＲＴ－ＬＡＫ细胞的扩增指数（７．５±２．１）明显提高（Ｐ＜０．０５）。形态学研究显示Ａ－ＬＡＫ细胞主要由大颗粒淋巴细胞组成，免疫表型分析显示其主要由ＣＤ１６＋的ＮＫ细胞组成，ＲＴ－ＬＡＫ细胞主要由ＣＤ３＋的Ｔ细胞组成。其杀伤活性与ＣＤ１６＋ＮＫ细胞之间有很好的相关性（ｒ＝０．８２，Ｐ＜０．０５）。这提示ＣＤ１６＋ＮＫ细胞是Ａ－ＬＡＫ细胞的主要组成细胞，代表了杀伤功能最强的亚群。