紫苏梗影响结肠平滑肌细胞收缩作用的实验研究

[目的]观察紫苏梗水提液对肢体缺血再灌注大鼠离体结肠平滑肌细胞运动的影响,并探讨其作用机制。[方法]建立肢体缺血/再灌注大鼠胃肠动力障碍模型。酶法分离大鼠结肠平滑肌细胞,采用图像分析系统测定细胞长度,利用工具药探讨机制。[结果]肢体缺血/再灌注后,结肠平滑肌细胞平均长度明显增加。紫苏梗水提液可明显增加模型大鼠结肠平滑肌细胞的收缩率,最适剂量为50g/L。钙鳌合剂(EGTA)和钙通道阻断剂盐酸维拉帕米均可完全抑制紫苏梗水提液对结肠平滑肌细胞的收缩作用。[结论]紫苏梗水提液对肢体缺血再灌注大鼠离体单个结肠平滑肌细胞有明显的收缩作用,其作用主要通过胞外Ca²⁺内流介导。     

糖尿病结肠动力障碍大鼠远端结肠平滑肌细胞bax、bcl-2及caspase-3的表达

目的:探讨糖尿病(DM)结肠动力障碍大鼠远端结肠平滑肌细胞凋亡基因的表达。方法:雄性SD大鼠18只应用链脲佐菌素40mg/kg尾静脉注射后成功建立DM结肠动力障碍大鼠模型,分为模型6周和10周组;另18只分为正常对照6周和10周组,各组9只大鼠。应用实时荧光定量PCR检测各组大鼠远端结肠平滑肌细胞的bax、bcl-2和caspase-3mRNA表达,采用免疫组化SP法检测其蛋白的表达。结果:不同组别和作用时间各组大鼠远端结肠平滑肌细胞bax、bcl-2、caspase-3mRNA和蛋白的表达差异均有统计学意义(P均<0.001),模型组与同一时间点正常对照组以及模型10周组与6周组大鼠比较,远端结肠平滑肌细胞bax和caspase-3mRNA和蛋白的表达增强,bcl-2mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05)。结论:远端结肠平滑肌细胞凋亡基因bax、bcl-2及caspase-3表达的改变可能是DM大鼠结肠动力障碍发病机制之一。     

结肠平滑肌瘤2例报告

例1.女,42岁。患者半月前无意中们及腹内一包块,活动,无任何消化道症状.查体:腹软下可触及7cmX6cm肿块,质较硬,似有结节感,     

结肠血管平滑肌脂肪瘤1例

患者,女,74岁。因右上腹痛6个月伴腹部肿块1月余,入院治疗。专科检查发现右上腹有一直径5～6 cm的包块,质硬。CT示升结肠软组织肿块,大小4 cm×6 cm。遂行结肠肿块切除术,术后     

自体游离结肠平滑肌片腹膜外结肠造口的应用

对41例肛管直肠癌行自体游离肠管平滑肌片腹膜外结肠造口,取一段正常的长约3 cm乙状结肠,去除结肠浆肌层上的脂肪和黏膜,行节制性腹壁结肠造口。结果:粪便节制率为73.2%(30/41),15例行测压检查,造口处静息压平均为35.5±7.1 mmHg,无手术死亡,无远期并发症。提示自体游离肠管平滑肌片腹膜外结肠造口具有术后并发症少和排便节制功能好的优点,可提高患者术后的生活质量,值得临床推广使用。     

番泻叶提取物对豚鼠结肠平滑肌细胞的收缩作用（英文）

目的　研究番泻叶提取物对游离的豚鼠结肠平滑肌细胞收缩的影响 .方法用含 1 g· L-1胶原酶及 0 .1 g· L-1大豆胰蛋白酶抑制剂的消化液消化 ,获得游离的单个豚鼠结肠平滑肌细胞 ;将不同浓度番泻叶提取物加入细胞悬液中 ,用测微尺观察随机遇到的 50个细胞长轴变化情况 ,计算用药前后细胞平均长度 .结果　成功获得了游离的结肠平滑肌细胞 .证实不同浓度的番泻叶提取物 (0 .2 2 ,0 .44,0 .89g· L-1 )与平滑肌细胞共孵育后 ,可使细胞的平均长度缩短为 (93±2 0 ) ,(86± 2 5) ,(85± 1 5)μm,生理盐水对照组为 (1 0 2± 2 3)μm,细胞长度下降的百分数为 8.7% ,1 5.7%和 1 6.6% ,与对照组相比有显著差异 (P<0 .0 5) ;在剂量为 0 .2 2～ 0 .89g·L-1 范围内 ,番泻叶对平滑肌细胞的收缩作用逐渐增强 (P<0 .0 5) ,呈剂量 -效应关系 .结论　番泻叶提取物对豚鼠结肠平滑肌细胞有直接的收缩作用     

结肠平滑肌肿瘤2例报道

结肠平滑肌肿瘤２例报道严晓星宋元俊结肠平滑肌肿瘤较为少见，因其缺乏特殊Ｘ线表现，常易误诊。本文收集经手术后病理证实的２例，报道如下。１病例摘要例１男，４８岁。右下腹疼痛不适伴纳差、乏力半年，因逐渐加重而入院。体检：Ｔ３７．２℃，心肺（－），腹平软，剑...     

单个胃肠道平滑肌细胞的分离及其细胞膜离子通道检测

目的:建立胃肠道平滑肌细胞的分离及离子通道检测方法,为胃肠道动力性疾病和离子通道相关性疾病的研究提供技术平台。方法:酶消化法急性分离胃肠道平滑肌细胞,运用离子通道膜片钳技术在全细胞模式下检测单个平滑肌细胞膜上离子通道的状况。结果:用酶消化法急性分离可获得细胞膜完整生物活性状态良好的单个胃肠道平滑肌细胞,该细胞符合膜片钳实验的要求;运用离子通道膜片钳技术在全细胞模式下可以记录基础状态和干预后单个胃肠道平滑肌细胞细胞膜上离子通道的开放状况,可用于相关的病理、生理、药理研究。结论:酶消化急性分离法是获得单个胃肠道平滑肌细胞的一种简单、有效、易操作的方法,运用该方法结合离子通道膜片钳技术可以准确记录胃肠道平滑肌细胞细胞膜上离子通道的开放状况。     

大鼠血管平滑肌细胞的培养与鉴定

目的:改进大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的培养方法。方法:采用机械刮除、差异贴壁等手段进行组织贴块法原代培养,胰蛋白酶消化传代,并应用相差显微镜和即用型SABC免疫组化染色试剂盒对细胞进行形态学和免疫组化鉴定。结果:镜下培养细胞呈典型的"谷-峰状"生长,免疫组化染色显示胞浆内-αactin阳性表达,锥虫蓝染色检测细胞传代成活率95%。结论:本法可获纯度高、结构和功能良好的VSMCs。     

呼吸道平滑肌细胞的分泌功能

支气管哮喘的重要特征是呼吸道慢性炎症和呼吸道重构,而两者与支气管平滑肌的功能密切相关。呼吸道平滑肌细胞(ASMCs)除了收缩、增殖和迁移特性外,还具有重要的分泌调节功能。ASMCs能发生表型转化,转变成合成型,合成型ASMCs能以自分泌、旁分泌的方式产生多种细胞因子、趋化因子、生长因子、细胞黏附分子及大量细胞外基质,在启动和维持哮喘呼吸道炎症和呼吸道重构方面起着重要作用。     

内皮祖细胞定向分化平滑肌细胞的实验研究

目的内皮祖细胞是一种理论上非常合适的血管组织工程种子细胞,最终分化成成熟内皮细胞。实验拟证实内皮祖细胞可以定向分化成平滑肌细胞。方法以猪为实验动物,采集骨髓单核细胞,分离培养内皮祖细胞,然后应用血小板衍生生长因子(PDGF)BB诱导内皮祖细胞定向分化。通过免疫组化和免疫荧光法鉴定细胞类型。结果经过诱导的内皮祖细胞定向分化成平滑肌细胞。未经诱导的细胞分化成内皮细胞。结论内皮祖细胞不仅可以分化成内皮细胞,而且可以在PDGF-BB作用下分化成平滑肌细胞,是一种理想的血管组织工程种子细胞来源。     

改良大鼠血管平滑肌细胞的原代培养

目的探讨提高大鼠血管平滑肌细胞原代培养效率的方法。方法采取组织块贴壁法进行原代培养,高糖DMEM培养基中加入血小板源性生长因子-B(platelet-derived growth factor-b,PDGF-B),用细胞形态学及免疫组织化学法对血管平滑肌细胞鉴定。结果原代培养,4～6天可见细胞长出,2周可以传代;传代培养,1周可以传代1次。镜下可见细胞以梭形为主,呈"峰-谷"状生长,免疫组化染色可见细胞浆内有大量染成棕黄色的肌丝。结论在采用组织块贴壁法进行培养时,加入PDGF-B培养,可获得纯度高、活性好的血管平滑肌细胞,并缩短了培养周期。     

黑松花粉对豚鼠离体肠道平滑肌活动的影响

目的 观察黑松花粉对豚鼠离体小肠、结肠平滑肌活动的作用。方法 用破壁与未破壁的黑松花粉液进行对比，通过换能器用二道生理记录仪记录肠段的机械活动。结果 破壁黑松花粉液能增强小肠与结肠平滑肌的张力，与基础未破壁花粉液比较，差别有显著性（P＜0．001和0．01）。     

二步酶消化法分离大鼠主动脉血管平滑肌细胞及活性鉴定

目的:建立一种有效、方便的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)的酶解分离方法.方法:采用二步酶消化法分离VSM-Cs,显微镜下观察细胞形态,锥虫蓝染色观察细胞成活率,荧光显微镜检测细胞内钙荧光强度(FI)在KCl激下的变化,全细胞膜片钳记录电压-依赖性钾电流.结果:分离的VSMCs镜下呈典型的梭状或长条状,成活率达68.0％;VSMCs内钙FI在KCl刺激下可增高;并可记录到稳定的电压-依赖性钾电流.结论:本法可获得大量形态和结构良好的VSMCs,且胞膜离子通道功能良好.     

一氧化氮介导内皮细胞对平滑肌细胞增殖的调节作用

用噻唑蓝比色法观察了过氧化氢、Ｌ精氨酸、ＮＧ硝基Ｌ精氮酸处理的内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞增殖的影响。结果显示：过氧化氢和ＮＧ硝基Ｌ精氨酸处理的内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞增殖有明显促进作用;而Ｌ精氨酸内皮细胞条件培养液有明显的抑制平滑肌细胞增殖作用;说明内皮细胞通过合成释放一氧化氮调节平滑肌细胞增殖。     

一种改良的猪肺动脉干平滑肌细胞培养方法

在本室已建立的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)培养方法的基础上作了改进①用含400ml.LPASMC条件培养液和100ml／L胎牛血清(FBS)的PASMC混合培养液(PASMCMM)代替含100ml/LFBS的M199培养液;②传代时间选在90％长满,即PASMC处在对数生长期末而停滞期前;③用5～8滴／瓶混合消化液传代,然后用含100ml／L小牛血清的M199培养液终止反应,并使其贴壁,第2d改换成PASMCMM。经此法培养的PASMC具有生长快、分散更均匀的特点。细胞倍增时间(45．6h)较改进前(56．8h)缩短11．2h。改进后的培养方法更加简便、实用、高效。因此是一种快速、并可大量获取优质PASMC的有效方法。     

腺病毒介导的脾酪氨酸激酶对血管平滑肌细胞表型转换的影响

目的 构建脾酪氨酸激酶(Syk)重组腺病毒并感染血管平滑肌细胞(VSMC),观察Syk对VSMC表型转换的影响.方法 运用pDC315-GFP腺病毒载体系统,细菌同源重组法构建含目的 基因Syk腺病毒重组质粒pDC315-GFP-Syk,经过包装、扩增、纯化后获得Syk重组腺病毒;测定病毒滴度并感染体外培养的大鼠VSMC,饥饿处理24 h,用Real-time PCR法和Western blot法对Syk、平滑肌22a蛋白(SM22α)及平滑肌α肌动蛋白(α-SM-actin)表达活性进行检测,观察Syk对平滑肌细胞表型转换的影响.结果 成功构建携带Syk基因的重组腺病毒,纯化后滴度为1011 pfu/mL,腺病毒感染VSMC后5 d,与空病毒组和对照组相比,Syk mRNA(741638.70±35213.53)和蛋白表达水平(2.14±0.71)增高(P<0.01);α-SM-actin(0.80±0.04)和SM22α mRNA表达水平(1.00±0.01)下降(P<0.05),同时,二者的蛋白表达水平也降低(0.61±0.10和0.18±0.06,P<0.01).结论 在VSMC中,Syk通过对其表型转换进行调控,进而影响平滑肌细胞的增殖和迁移.     

血管内皮和平滑肌细胞联合培养构建组织工程化血管的方法

目的：探讨组织工程血管种子细胞原代培养、传代扩增、鉴定的方法，为组织工程血管的构建提供理想的种子细胞。方法：无菌条件下取正常产妇分娩的脐带动静脉，ROSS法（即组织贴块法）原代培养混合血管细胞。倒置相差显微镜、免疫组化法对细胞进行鉴定。结果：倒置显微镜显示原代细胞及经传代培养后的细胞，呈现内皮样细胞、平滑肌样细胞混合生长的特征。免疫组化法检测示内皮细胞Ⅷ因子、平滑肌细胞α-肌动蛋白呈阳性反应。细胞经3次～5次传代，数量可增殖达到8×10^6—10×10^6。结论：使用组织贴块法原代培养可获得内皮细胞、平滑肌细胞混合体，细胞经体外联合培养、传代可以达到组织工程血管种子细胞所需的数量。