氧化苦参碱和槐定碱对青霉素致痫大鼠海马的影响

目的观察氧化苦参碱和槐定碱对青霉素致痫大鼠行为学和海马组织形态学的改变。方法取大鼠雌雄各半,随机分为7组,每组10只,分别为正常对照组、癫痫模型组、阳性药物苯巴比妥钠组、氧化苦参碱高剂量组、氧化苦参碱低剂量组、槐定碱高剂量组和槐定碱低剂量组。大鼠腹腔注射大剂量青霉素致痫模型,并腹腔注射氧化苦参碱和槐定碱,观察其行为学和海马组织形态学改变。结果与致痫组相比氧化苦参碱低、高剂量组和槐定碱低剂量组均能不同程度地延长痫性发作潜伏期,并且降低痫性发作程度;光镜、电镜观察使用氧化苦参碱和小剂量槐定碱后致痫大鼠海马组织神经细胞肿胀、细胞器损伤等改变得到改善。结论氧化苦参碱和小剂量槐定碱对脑组织损伤有一定的保护作用。     

苦参碱与槐定碱的镇痛作用比较

目的：比较苦参碱与槐定碱的镇痛作用。 方法：尾静脉注射受试药物,分别对小鼠进行热板、扭体及压痛实验。 结果：在热板实验中,苦参碱大剂量与槐定碱大、中、小剂量均能显著延长小鼠的痛阈,显示出一定的镇痛作用,与对照组比较差异有显著性（P<0.05或P<0.01）,槐定碱大、中剂量组小鼠痛阈时间长于同剂量的苦参碱（P<0.05）;在扭体反应实验中,苦 参碱及槐定碱均可显著减少小鼠扭体反应次数,与对照组比较差异有显著性（P<0.01或P<0.001）,槐定碱大、中剂量组小鼠扭体反应次数少于同剂量苦参碱（P<0.05或P<0.01）;在压痛实验中,苦参碱大剂量与槐定碱大、中、小剂量可延长小鼠对压痛反应的时间（P<0.01或P<0.001）,槐定碱各给药组小鼠对压痛反应的时间均长于同剂量的苦参碱（P<0.05或P<0.01）,且槐定碱的镇痛作用持续时间长于同剂量的苦参碱（P<0.05或P<0.01）。 结论：在相同剂量下,槐定碱的镇痛作用强于苦参碱。     

槐定碱、氧化槐定碱的药理学研究进展

槐定碱(sophoridine,SR)、氧化槐定碱(oxysophoridine,OSR)是从豆科槐属植物苦豆子(sophora alopecuroides L)中提取到的一对重要的生物碱,其基本结构是由2个三价氮原子稠和的双哌啶环。近几年,关于这两种生物碱的研究又有了很大的进展,探索了其多方面的药理活性。本文对其药代动力学、药理作用、作用机制及应用前景做一综述,为进一步认识、研究、开发利用这一对生物碱提供参考。     

槐定碱和氧化槐定碱对豚鼠心率的影响

目的：本文观察氧化槐定碱（ＯＳＲ）和槐定碱（ＳＲ）对豚鼠心肌自律性及心率的影响。方法∶应用离体心房实验法及整体动物试验法观察药物对心肌自律性及动物心率的影响。结果∶对整体豚鼠，ｉｖＯＳＲ５００ｍｇ／ｋｇ和ＳＲ１０ｍｇ／ｋｇ可使心率分别由４５８±２０次／ｍｉｎ，４３３±２０次／ｍｉｎ减慢到３７１±２８次／ｍｉｎ（Ｐ＜００１），４１１±１５次／ｍｉｎ（Ｐ＜００５），并能对抗ｉｖ异丙肾上腺素１０μｇ／ｋｇ增加心率的作用，对豚鼠离体左心房，ＯＳＲ（１９ｍｍｏｌ／Ｌ）和ＳＲ（６０μｍｏ１／Ｌ）均可使肾上腺素诱发自律性的阈浓度由９６±３７μｍｏｌ／Ｌ降低到４８±１８μｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜００５），５７±２３μｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜００５）。结论∶ＯＳＲ和ＳＲ可减慢整体豚鼠的心率，对抗异丙肾的加快心率的作用；而在离体心肌，它们能够使肾上腺素诱发离体心房自律性的浓度降低，表现为加快心率的作用     

槐定碱、氧化槐定碱对常见泌尿生殖道感染细菌的抑菌作用

目的研究槐定碱（sophoridine,SR）、氧化槐定碱（oxysophori-dine,OSR）对常见泌尿生殖道感染病原菌的体外抑菌作用。方法采用纸片扩散法初步测定SR、OSR对大肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、表皮葡萄球菌体外抑菌的范围,利用液体倍比稀释法测定SR、OSR对各细菌的最小抑菌浓度（MIC）。结果 SR对4种受试菌均有显著的抑菌作用,SR对大肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌和表皮葡萄球菌的MIC分别为8.0、8.0、8.0和4.0mg·m L^-1;OSR的抑菌作用较弱,其对大肠杆菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌和表皮葡萄球菌的MIC分别为256、256、256和128mg·m L^-1。结论槐定碱对4种常见泌尿性殖道感染细菌具有一定的抑菌作用,而氧化槐定碱的抑菌效果最弱。     

大剂量腹腔注射槐定碱和青霉素对SD大鼠致痫作用的比较

目的比较槐定碱和青霉素制作大鼠癫痫模型的效果。方法对SD大鼠腹腔注射大剂量槐定碱和青霉素,分别观察其行为学、电生理学和海马细胞形态学变化。结果槐定碱组和青霉素组相比较,前者可以缩短潜伏期,延长癫痫发作时间,提高发作成功率;海马区脑电图出现频发性尖波、棘波等癫痫样波形;光镜、电镜观察可见海马区神经细胞肿胀,细胞器损伤等改变。结论槐定碱具有明确的致痫作用,效果优于青霉素。     

RP-HPLC法测定苦豆子总碱注射液中槐定碱、苦参碱和槐果碱的含量

目的建立苦豆子总碱注射液的含量测定方法。方法采用RP—HPLC法同时测定苦豆子总碱注射液中的槐定碱、苦参碱、槐果碱的含量。结果槐定碱、苦参碱、槐果碱的线性范围分别为7．32～732、1．43～143、0．372～37．2μg／mL,平均回收率分别为101．3％、98．74％、99．58％,RSD分别为0．86％、1．32％、1．13％。结论该方法简便、准确、重现性好,可作为苦豆子总碱注射液中生物碱的质量控制方法。     

苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞RAW264.7表达CD91、CD13和分泌TNF α的抑制作用

目的探讨苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞RAW264.7表达CD91、CD13和分泌TNF-α的抑制作用。方法(1)用6孔板培养巨噬细胞RAW264.7,制作细胞爬片,然后与不同浓度(0、12.5、25、50、100、200mg/L)的苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱共培养,细胞爬片免疫组化染色,检测CD91和CD13的表达情况,并采用MediaCybernetics公司的图像分析系统进行定量分析,测量积分光密度(IOD)值。(2)6孔培养板培养巨噬细胞RAW264.7,加入不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱与巨噬细胞共培养1d后,收集培养孔中的培养液,采用ELISA方法检测培养液中TNF-α的含量。结果苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱均能抑制巨噬细胞表达CD91和CD13,其抑制作用随浓度变化也有不同,苦参碱更明显。不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞分泌TNF-α有抑制作用,苦参碱对巨噬细胞RAW264.7分泌TNF-α的抑制作用更明显。结论苦参碱、氧化苦参碱和槐定碱对巨噬细胞表达CD91、CD13和分泌TNF-α有明显的抑制作用。     

氧化槐定碱对小鼠中枢神经系统的影响

目的 探讨氧化槐定碱对中枢神经系统的影响。方法 采用行为药理学方法观察并测定氧化槐定碱对阈剂量和阈下剂量戊巴比妥催眠作用的影响,对小鼠外观活动和自身活动的影响及对戊四氮惊厥的影响。结果 腹腔内注射氧化槐定碱250,500,1000mg/kg,小鼠自发活动抑制率分别为42．6％,57．2％和76．3％,戊巴比妥钠入睡时间分别缩短38．4％,49．0％和39．7％,而睡眠时间分别延长172％,138％和389％,并能明显加强阈下剂量戊巴比妥钠的催眠作用。氧化槐定碱500,1000mg/kg不能对抗戊四氮引的惊厥。结论 氧化槐定碱具有镇静、催眠等中枢抑制作用。     

RP-HPLC法测定苦参总碱中苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱

苦参总碱是由豆科植物苦参Sophora flavescens Ait．的根中提取得到的总生物碱，主要包括苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱。具有抗心律失常、增加冠脉流量、保护心肌缺血、增加心肌收缩力、调血脂、抗肝炎、抗肿瘤、防止白细胞减少、抗辐射、抗过敏、镇痛平喘、祛痰等作用。目前上市的制剂有心律宁片（苦参总碱片），     

未成熟大脑对惊厥性脑损伤耐受性的分子生物学机理研究

目的:探讨幼龄鼠未成熟脑组织对惊厥性脑损伤中细胞凋亡与坏死病理过程具有主动保护性抑制机制的分子生物学机理.方法:健康成年及幼龄Wistar鼠经皮下与腹腔内注射美解眠致惊.两组分别于严重惊厥发作后1、2、4、12、24、48、72h、7天时点上断头处死取脑,在进行组织病理学动态观察神经元坏死、凋亡的基础上,采用免疫组化法,原位检测脑片凋亡相关基因bcl-2、P53的表达变化,分别计算其弱、强阳性表达细胞数.结果:(1)严重惊厥后,成年鼠与幼鼠脑内P53和bcl-2的表达截然不同.成年鼠P53阳性表达率高达90%,其中一半属中、高度强阳性.但bcl-2表达率仅57%,且主要呈低度表达;相反,幼鼠以bcl-2强表达为主,其阳性表达率达85%以上.(2)动态观察获类似结果.严重惊厥后3天,成年鼠脑内仍有持续P53强表达,但其bcl-2于发作后仅数小时,已回落与对照无差异;相反,幼鼠则在发作3天内显示bcl-2的持续强表达,而P53于发作后12h开始明显降低,并于24h后与对照不再有差异.结论:持续惊厥发作后,未成熟及成熟期神经元中凋亡的诱导和抑制基因均同时表达,但两者间存在显著年龄差异.未成熟脑神经元中,以凋亡抑制基因bcl-2表达为主,而成熟脑神经元中凋亡诱导基因P53表达更显著.     

新生期反复惊厥大鼠神经行为改变及溶酶体酶抑制剂的干预作用

目的 探讨溶酶体酶抑制剂(CBI)在三氟乙醚致新生期大鼠反复惊厥性脑损伤中的干预作用及其信号通路.方法 90只生后6d(P6)的健康SD大鼠随机分为3组(n=30):对照(CONT)组、反复惊厥(RS)组及CBI组,RS组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作5次,每次间隔30min,连续9d;CONT组同样操作但不吸入三氟乙醚;CBI组惊厥前腹腔注射CBI(总量2μl),同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥,方法同RS组.分别于生后不同时间段检测体格、神经发育以及认知情感能力,并于末次惊厥后1.5 h、3h、6h、24h及第35天五个时间点(n=6)取大脑皮层组织,采用免疫印迹技术检测自噬相关蛋白cathepsin B的表达.结果 P14时RS组体质量(27.28±1.60)kg,低于CONT组(33.45±1.57)kg,差异具有显著性(P＜0.0001).神经发育指标显示悬崖回避时间,日龄P12时RS组历时(2.10±1.45)s,延长于CBI组(1.05±0.32)s,差异有显著性(P＜0.05).旷场行为测试:RS组水平运动(20.00±13.08)次,少于CONT组(57.83±33.22)次,差异有显著性(P＜0.05);RS组垂直运动(2.50±2.43)次,少于CONT组和CBI组[分别为(22.17±10.74)次,(9.33±5.39)次],差异有显著性(P＜0.01).Western blot法检测,RS组在1.5h、3h、6h、24h各时间点Cathepsin B的表达明显高于CONT组(P＜0.05);CBI组于1.5h、3h、6h、24h各时间点Cathepsin B的表达明显低于RS组(P＜0.05).P35时间点3组之间差异无显著性(P＞0.05).结论 CBI能够通过自噬信号途径抑制发育期惊厥所致神经行为损伤.

Abstract：

Objective To explore the intervention effect of cathepsin B inhibitor (CBI) and its signaling pathways after flurothyl inducing brain injury in rats with recurrent seizures. Methods 6-day-old (P6) SD rats were randomly divided into: recurrent neonatal seizure group ( RS group, n = 30), CBI-treated seizure group ( CBI group, n=30) and the control group( CONT group). Rats in RS group were subjected to 5 seizures with flurothyl during the first 14 days of life. In CBI group,CBI was injected each day before seizures were induced. Then examined development indexes such as the physical growth, neural reflex, neural behavior and cognitive emotional competence. Western blot was employed to determine Cathepsin B expression at different time points ( 1.5h,3h,6h,24h and P35) after the last convulsion. Results The weights of rats in RS group( (27.28 ± 1.6) kg) were lighter than CONT group( ( 33.45 ± 1.57 ) kg). They had significant difference (P＜ 0.01 ) at the age of p14. The time of cliff avoidance in RS group( (2. 10 ± 1.45 ) s) was longer than CBI group( ( 1.05 ± 0. 32) s). It showed a statistically significant (P ＜ 0.05 ) in p12. In the open-field behavior test: the activities of RS group (20.00 ± 13.08 )were markedly reduced than CONT group ( 57.83 ± 33.22 ) in the horizontal movements, the RS group ( 2.50 ±2.43 ) were significantly decreased than the CONT group and CB1 group( ( 22.17 ± 10.74), (9.33 ± 5.39 ) ) in the vertical motions (P ＜ 0. 05 ). Cathepsin-B expression in RS group( 1.5h, 3h,6h and 24h )was significantly higher than that at the same time in CONT group(P＜ 0. 05 ). Cathepsin-B expression of CBI group was significantly decreased compared with that in RS group (P＜ 0. 05 ) at the time point (1.5h ,3h,6h and 24h). There were no significant differences among three groups at P35(P＞0.05 ). Conclusions CBI can improve brain injury and regulate the expression of abnormal molecules.     

托吡酯对戊四氮点燃慢性癫痫大鼠海马Fas表达的影响

目的探讨托吡酯(TPM)对戊四氮(PTZ)慢性点燃癫痫大鼠海马Fas表达的影响及其对海马神经元的保护作用。方法48只大鼠随机分为健康对照组(A组)、PTZ单纯致痫组(B组)、TPM40mg/kg干预组(C组)、TPM80mg/kg干预组(D组),通过腹腔注射PTZ建立慢性癫痫模型,观察大鼠行为、脑电图及海马组织学改变,并用免疫组化染色观察Fas蛋白的表达。结果TPM可以明显抑制大鼠的痫性放电,减少其痫性发作级别,C组、D组与B组比较重型发作率明显降低(P<0.01);此外,TPM干预组凋亡相关基因Fas表达明显减低(P<0.01)。结论在PTZ慢性点燃癫痫大鼠模型中,TPM可降低凋亡相关基因Fas表达,从而减轻海马神经元的凋亡程度。     

迷走神经刺激对致(癎)大鼠脑内NOS免疫反应阳性细胞的影响

目的 :探讨迷走神经刺激抗癫作用与脑内一氧化氮 ( NO)的关系。　方法 :大鼠用戊四氮 ( PTZ)腹腔注射致 ,行迷走神经刺激抗癫 ,应用免疫组化方法观察大鼠脑皮质及海马一氧化氮合酶 ( NOS)免疫反应阳性神经细胞的变化。　结果 :PTZ致后 ,大鼠皮层、海马 NOS阳性细胞数及阳性细胞光密度较对照组明显增加 ( P<0 .0 1) ;而行迷走神经刺激 ( VNS)抗癫组动物上述脑区 NOS阳性细胞及光密度明显减少 ( P<0 .0 1)。　结论 :VNS的抗癫作用与脑内 NO的减少相关 ,VNS可能通过抑制脑内谷氨酸的释放而发挥抗癫作用     

槐定碱的中枢兴奋作用及其对Glu、GABA表达的调节

目的探讨槐定碱的中枢药理作用及相关的作用机制。方法采用行为药理学方法观察槐定碱对正常小鼠一般行为、自主活动以及对戊巴比妥钠催眠作用的影响;对阈下剂量戊四氮、烟碱、士的宁、印防已毒素、异烟肼致惊厥的协同作用。采用单极引导法记录大鼠额叶皮层、海马的脑电图,并采用FFT技术定量分析槐定碱对脑电变化的影响。采用免疫组织化学技术（SABC法）,观察槐定碱对大鼠额叶皮层、海马谷氨酸和γ-氨基丁酸免疫阳性神经细胞表达的影响。结果腹腔注射槐定碱5、10、20mg/kg,小鼠出现出汗、对峙、竖胡须、震颤等兴奋症状。10、20mg/kg能明显延长戊巴比妥钠致小鼠入睡潜伏期（P〈0.01）。侧脑室注射槐定碱,0.1、0.2、0.4mg/只,大鼠额叶皮层、海马均出现痫样放电,痫样放电持续时间和频率均表现出明显的剂量依赖关系。与阈下剂量士的宁、印防己毒素、异烟肼有明显的致惊厥协同作用（P〈0.01）,但与戊四氮、烟碱无明显的协同作用（P〉0.05）。侧脑室注射槐定碱0.2mg/只,明显增加大鼠大脑皮层、海马谷氨酸免疫阳性细胞数（P〈0.01）,γ-氨基丁酸阳性细胞数数目有所下降（P〈0.01）。结论槐定碱对中枢神经系统具有明显的兴奋作用,其作用机制可能与谷氨酸和γ-氨基丁酸表达失衡有关。     

槐定碱对青霉素致痫大鼠中枢活动的影响

目的探讨槐定碱对青霉素致痫大鼠中枢活动的影响。方法大鼠50只,随机分为5组,每组10只,实验3组分别腹腔注射槐定碱2.94、5.88和11.76 mg/kg,阳性对照组和模型组分别腹腔注射苯巴比妥钠10mg/kg和生理盐水,观察槐定碱对大鼠癫痫模型大脑皮层脑电、脑组织形态学的影响及对其脑组织中MDA含量、SOD活性的影响。结果槐定碱2.94mg/kg可延长癫痫大鼠惊厥潜伏期,明显减轻大鼠痫样发作程度,明显减少大鼠皮层脑电图中的棘波;青霉素致痫大鼠后,光、电镜观察可见大鼠脑海马部位神经细胞肿胀,细胞器损伤等改变。使用槐定碱2.94mg/kg后神经元细胞肿胀明显减轻,细胞器等损伤能够得到不同程度的改善;槐定碱2.94mg/kg能降低癫痫大鼠脑中MDA含量,提高SOD活性;槐定碱5.88和11.76mg/kg未显示上述作用。结论槐定碱2.94mg/kg具有一定的抗癫痫作用,而槐定碱5.88和11.76mg/kg可能有一定的致痫作用。     

槐定碱致痫大鼠海马组织超微结构的观察

目的建立槐定碱（sophoridine,SRI）致痫大鼠癫痫模型,电镜下观察槐定碱致痫大鼠海马组织超微结构的变化,探讨癫痫发病机制。方法将30只成年SD大鼠（雌雄不拘）随机分为生理盐水对照组（NS）、槐定碱致痫组（SRI）、苯巴比妥钠＋槐定碱组（PBS＋SRI）,每组各10只。腹腔注射大剂量槐定碱（47．83mg／kg）后,观察大鼠行为学变化以及应用电镜技术观察各组大鼠致病后海马CAI区和CA3区神经元组织病理学和形态学的改变。结果腹腔注射大剂量槐定碱后,大鼠出现了痫性行为发作;电镜下可见槐定碱致痫大鼠海马CAI区和CA3区神经元核膜双层结构破坏,神经细胞核严重固缩,染色质颗粒状聚集,线粒体肿胀,嵴断裂或消失,毛细血管内皮细胞核固缩。经苯巴比妥钠干预后,槐定碱致痫大鼠海马CAI区和CA3区神经细胞的损伤程度减轻。结论大剂量槐定碱可导致大鼠在体海马神经细胞损伤,从而诱发癫痫。     

首次自发性痫性发作后复发危险性分析探讨

目的 探讨首次自发性痫性发作后复发的危险性及潜在危险因素.方法 选择1998-10～2007-06间于神经内科和小儿科首诊就诊的首次痫性发作病人66例,随访2年,记录有无再次复发,应用Kaplan-Meier乘积限法估算复发率,针对66例首次痫性发作患者,应用Cox比例风险模型的单因素和多因素分析来探讨分析影响首次痫性发作后复发的潜在危险因素.结果 66例首次痫性发作患者2年中复发36例,累积复发率为54.55%.Cox单因素和多因素分析表明,首次痫性发作后,症状性发作复发的危险性较大;另外EEG异常、首次发作出现在睡眠状态中、首次发作持续时间较长等亦是复发的危险因素,而3～12岁间出现的首次痫性发作复发率较低.结论 首次痫性发作的某些临床特点可以帮助判断其复发危险性.