胃癌患者腹腔冲洗液中脱落癌细胞免疫细胞化学检测的价值

目的探讨一组正反互补单克隆抗体对胃癌患者腹腔冲洗液中脱落癌细胞检测的应用价值。方法应用低分子量细胞角蛋白(CKLMW)、癌胚抗原(CEA)、间皮细胞(MC)及波形蛋白(Vim)4种标志物,对67例胃癌患者腹腔冲洗液中的癌细胞成分进行免疫细胞化学(ICC)检测,并与常规细胞病理学(CP)检测结果比较。结果ICC阳性检出率(86.2%)明显优于CP阳性诊断率(58.6%)(P<0.05);ICC阳性检出率随侵袭深度及病期进展而增加;CKLMW、CEA、MC及Vim4种抗体的可用度分别为64.6%、71.6%、77.9%、41.8%。结论联合应用CKLMW、CEA及MC对于检测胃癌腹腔冲洗液中脱落癌细胞具有重要的临床价值,而Vim缺乏诊断意义。     

胃癌术中腹腔游离癌细胞检测临界值的确定及其临床意义

目的 探讨胃癌术中腹腔游离癌细胞(FCC)检测的最佳阳性判定值,以及腹腔FCC的存在对预后的影响.方法 用实时荧光RT-PCR方法检测术中腹腔FCC,并进行5年的随访.用MedCalc软件分析FCC最佳阳性判定值;[大于此值表示FCC存在,标记为FCC(+)],并前瞻性地分析FCC(+)组及(-)组与预后的关系.最后用多因素Cox回归模型分析影响预后的独立因素.结果 (1)最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL时约登指数最高;(2)FCC(+)与(-)组的平均存活期分别为17.2个月和48.7个月,中位存活期分别为8.1个月和60.0个月;5年累积存活率分别为9.1%和67.4%.Kaplan-Meier生存分析显示,FCC(-)组生存时间明显长于FCC(+)组(P=0.000).Cox模型分析发现FCC,浆膜及远处转移是影响生存预后的独立因素(P＜0.05).结论 (1)FCC最佳阳性判定值为31.21拷贝/mL;(2)腹腔FCC是影响预后的独立危险因素之一,FCC(+)反映手术时肿瘤存在扩散状态.预示患者预后较差.     

测定腹腔冲洗液中CEA值早期预测胃癌根治术后腹腔扩散

测定腹腔冲洗液中ＣＥＡ值早期预测胃癌根治术后腹腔扩散严轶群，张建生胃癌根治术后发生腹腔转移，在临床上依然常见，本文检测８０例良、恶性胃病患者手术时腹腔冲洗液中ＣＥＡ水平，探讨其与胃癌根治术后腹腔内扩散之间的关系。一、临床资料一般资料：本组８０例，其中...     

胃癌患者腹腔冲洗液癌胚抗原mRNA检测的临床意义

本研究采用RT PCR法检测胃癌患者腹腔冲洗液中癌胚抗原 (CEA)mRNA的表达情况 ,探讨该方法在预测胃癌腹腔内转移的临床价值。资料与方法1 一般资料 :本组胃癌患者共 110例 ,其中男 72例 ,女38例 ,中位年龄 5 8 6岁。行胃癌根治术 78例 ,姑息性手术32例 ,2 1例腹膜转移。所有病例均经病理证实。取良性疾病开腹手术者腹腔冲洗液 10例作为阴性对照组 ,10例胃癌组织作为阳性对照。2 标本采集及脱落细胞学检查 :开腹后 ,在Douglas窝置14号腹腔引流管 ,注入生理盐水 5 0～ 10 0ml,局部轻轻搅动后回抽 ,如已有腹水则直接抽取。操作时不触及原…     

MACS检测胃癌腹腔冲洗液游离癌细胞的研究

目的 探讨胃癌腹腔微转移情况的检测方法及意义。方法 手术中切除肿瘤前收集腹腔冲洗液，采用磁激活细胞分离术（MACS）对不同病理分期胃癌患者腹腔冲洗液中癌细胞进行富集并检测。分别标记带磁珠的细胞角蛋白（CK）抗体，经磁柱富集CK^＋上皮细胞，用流式细胞仪检测其含量，并比较胃癌组与胃平滑肌瘤组（对照组）以及胃癌不同分期之间、磁富集前后CK^＋上皮细胞含量的差异。结果 在未经MACS富集的标本中较少发现CK^＋ CD45^-细胞；在富集后的标本中其含量在胃癌组与对照组有显著差异（41／50，1／10，P〈0．001）；pTNMⅠ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期之间（0．67％，3．42％，P〈0．001）差异有非常显著性。结论 MACS能有效地富集上皮来源细胞，提高上皮源细胞的检出率，并能反映腹腔游离癌细胞数量；上皮细胞数量与胃癌的存在及临床病理分期有关，其有利于判断肿瘤转移和预后并指导治疗。     

胃癌、大肠癌腹腔游离癌细胞检测及其临床意义

我们采用Ｂｅｒ Ｅｐ4和抗 ＣＥＡ 2种单克隆抗体的免疫细胞化学方法 ,并结合常规细胞学方法对 6 4例进展期胃癌、大肠癌患者腹腔灌洗液进行了游离癌细胞(ＦＣＣ)的检测。1.资料与方法 :本组 6 4例 ,经病理证实为进展期胃癌、大肠癌 ,年龄 32～ 72岁 ,平均 5 4岁 ;男 41例 ,女 2 3例 ;行根治性切除 42例 ,姑息性切除 2 0例 ,未切除2例。另外 ,选择 10例腹部良性病变 (肝硬化 3例、大肠腺瘤 3例及胃溃疡 4例 )患者的腹腔灌洗液或腹水作为检测的阴性对照。患者开腹后 ,立即用 4层无菌纱布覆盖病灶 ,并向腹腔倒入温生理盐水 (37℃ ) 2 0 0～ 4…     

术中实时 RT-PCR检测胃癌患者腹腔冲洗液癌胚抗原 mRNA的初步研究

目的探讨术中实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)定量检测胃癌腹腔冲洗液癌胚抗原信使核糖核酸(CEAmRNA)诊断腹腔游离癌细胞的可行性、可靠性及其临床意义。方法采用实时RT-PCR技术检测98例胃癌患者手术前后腹腔冲洗液CEAmRNA水平,并与常规RT-PCR、细胞学检查结果进行比较分析。结果全组腹腔冲洗液细胞学检查(PLC)阳性率为38.8%(38/98),常规RT-PCRCEAmRNA检测阳性率为52.0%(51/98),两者差异有显著性意义(P<0.01)。腹腔冲洗液CEAmRNA浓度术前为犤172.11±63.07(范围0～5.623×106)犦拷贝(copies)/ml,术后为犤606.32±76.21(范围2.564×102～4.677×107)犦copies/ml,术后显著高于术前(P<0.01)。肿瘤侵犯浆膜,病期Ⅲ、Ⅳ期,细胞学检查及RT-PCRCEAmRNA阳性者腹腔冲洗液CEAmRNA水平显著升高(均P<0.01),而淋巴结转移与否及肿瘤细胞分化程度不同组之间的腹腔冲洗液CEAmRNA水平比较,差异无显著性意义(均P>0.05)。PLC(-)PCR(-)组、PLC(-)PCR( )组和PLC( )PCR( )组3组间腹腔冲洗液CEAmRNA浓度比较,差异有显著性意义(均P<0.05)。本研究将判断腹腔游离癌细胞的CEAmRNA界值初步定为21.73copies/ml。结论实时RT-PCR定量检测胃癌患者腹腔冲洗液CEAmRNA,是诊断腹腔游离癌细胞快速、敏感、可行的方法,有望成为术中腹腔化疗个     

直肠癌术中腹腔冲洗液脱落细胞学临床研究进展

直肠癌术后局部复发、盆腔种植转移成为直肠癌术后主要的致死原因。国内外报道直肠癌根治术后复发率为10％～30％，为预防直肠癌术后复发、转移，国内外学者提出了许多有效的方法如全直肠系膜切除（TME），新辅助化疗，术中腹腔冲洗等。其中术中腹腔冲洗作为手术无瘤技术的重要措施已在临床广泛应用并取得明显的成效。在进行腹腔冲洗达到减瘤的目的的同时，术中腹腔冲洗液脱落细胞学的研究渐成热点，现将国内外有关直肠癌术中腹腔冲洗液脱落细胞学的研究综述如下。     

胃癌术中腹腔灌洗脱落癌细胞检测及临床意义

胃癌并腹腔游离癌细胞是一种特殊类型的晚期胃癌,是腹腔转移的早期表现形式。目前,腹腔游离癌细胞的检测主要通过腹腔镜探查联合腹腔灌洗细胞学检查进行。诸多分子生物学检测方法也开始出现,但是仍缺乏相关统一规范。腹腔游离癌细胞阳性病人预后较差,而通过全身系统治疗、腹腔局部治疗等使腹腔游离癌细胞转阴后可能为病人带来生存获益。目前,仍需要高质量的前瞻性随机对照研究对腹腔游离癌细胞的检测和治疗方法进行评估,以达到诊断、治疗的规范化、个体化和专业化。     

Detection of Free Peritoneal Cancer Cells in Gastric Cancer Using Cancer-Specific Newcastle Disease Virus

Introduction  

Cytologic detection of peritoneal gastric cancer cells by Papanicolaou staining offers important prognostic information but has low sensitivity. We evaluated a novel detection technique using Newcastle disease virus expressing the enhanced green fluorescent protein (NDV-GFP) gene.     

Influence of Laparoscopic Gastrectomy on the Detection Rate of Free Gastric Cancer Cells in the Peritoneal Cavity

Background  

Whether laparoscopic gastrectomy affects the number of gastric cancer cells exfoliated from the cancer-invaded serosa remains unclear. This study aimed to compare the detection rate of free gastric cancer cells in the peritoneal cavity during laparoscopic and open gastrectomy.     

胃癌患者腹腔游离癌细胞的监测与腹腔灌注化疗

目的：探讨腹腔游离癌细胞的测定对术后温热灌注化疗的意义。方法：对我院102例胃癌患者在术中于探查前，关腹前和灌洗化疗后的腹腔液作游离癌细胞检查。结果：探查前游离癌细胞检出率为36．3％（37／102），关腹前游离癌细胞检出率为52．9％（54／102），腹腔热灌注化疗后有31例找到变性坏死的游离癌细胞，其有效率达57．4％（31／54），游离癌细胞检出阳性率与肿浸润深度，浆膜受侵面积及病理组织学类型有关。结论：胃癌患者腹腔内有游离癌细胞存在，且具有较高活性，手术过程中的创伤刺激可增加癌细胞的脱落，因此术中采取无瘤技术和大量生理盐水冲洗腹腔是必要的，腹腔热灌注化疗可有效杀伤癌细胞，所以对游离癌细胞阳性者术后应进行腹腔内温热灌注化疗。     

CEA RT-PCR检测胃癌腹腔灌洗液游离癌细胞临床价值的初步观察

目的：初步观察癌胚抗原(CEA)逆转录．聚合酶链反应(RT-PCR)检测胃癌腹腔洗液中游离癌细胞的临床价值。方法：收集36例进展期胃癌和6例慢性胆囊结石病人腹腔灌洗液100ml，其中50ml行CEA RT-PCR，扩增CEA特异性片断；50ml行细胞学检查。胃癌细胞株MKN-45为阳性对照。结果：36例胃癌病人腹腔灌洗液中14例于131 bp处见CEA的特异性条带，阳性率为38．9％(14／36)；6例慢性胆囊结石病人腹腔灌洗液RT-PCR结果均为阴性；MKN-45在131bp处发现CEA的特异性条带。细胞病理学检查，36例胃癌病人中有6例腹腔灌洗液中发现有肿瘤细胞或核异形细胞，阳性率为16．6％(6／36)，且此6例RT-PCR结果均为阳性；8例RT-PCR结果阳性病人的细胞学检查为阴性。CEA RT-PCR的阳性率与肿瘤胃壁浸润深度、淋巴结转移数和胃癌分化程度明显相关。随访至今，36例进展期胃癌病人中CEA RT-PCR检查阴性的病人尚无一例腹腔内肿瘤复发，1例细胞学检查阴性而CEA RT-PCR阳性的病人术后4个月时出现腹腔内肿瘤复发。结论：腹腔灌洗液中胃癌细胞CEA mRNA的RT-PCR检测法敏感性较高．初步临床观察及随访显示该法有望作为诊断腹腔内游离癌细胞的有效辅助手段。     

Prognostic Significance of the Cytologic Features of Free Cancer Cells in the Peritoneal Cavity of Patients with Gastric Cancer

The aim of this study was to determine whether the cytologic features of cancer cells in the peritoneal lavage fluid from patients undergoing surgery for gastric cancer affect prognosis. A total of 141 patients with stage III–IV gastric cancer were enrolled in this study. Among 111 patients without peritoneal metastasis (P0), 43 were noted to have positive peritoneal cytology (P0/CY1). These patients were subclassified into two groups according to the cluster formation of cancer cells in the cytology specimen, namely, 17 with cluster formation and 26 without cluster formation. The clinicopathologic parameters and survival rates were compared between these two groups. Among the P0/CY1 patients, no significant difference in clinicopathologic features existed between patients with or without the cluster formation of cancer cells. However, the survival rate of patients without cluster formation was significantly higher than that of those with cluster formation. Furthermore, the survival curves of patients without cluster formation was similar to that of the P0/CY0 patients with stage IV cancer. Subclassification according to the presence or absence of the cluster formation of cancer cells may be useful for predicting the outcome of patients with positive cytology after surgery for advanced gastric cancer. Received: March 9, 2001 / Accepted: July 17, 2001     

Gene Expression Profile Prospectively Predicts Peritoneal Relapse After Curative Surgery of Gastric Cancer

Background

Peritoneal relapse is the most common pattern of tumor progression in advanced gastric cancer. Clinicopathological findings are sometimes inadequate for predicting peritoneal relapse. The aim of this study was to identify patients at high risk of peritoneal relapse in a prospective study based on molecular prediction.

Methods

RNA samples from 141 primary gastric cancer tissues after curative surgery were profiled using oligonucleotide microarrays covering 30,000 human probes. Firstly, we constructed a molecular prediction system and validated its robustness and prognostic validity by 500 times multiple validation by repeated random sampling in a retrospective set of 56 (38 relapse-free and 18 peritoneal-relapse) patients. Secondly, we applied this prediction to 85 patients of the prospective set to assess predictive accuracy and prognostic validity.

Results

In the retrospective phase, repeated random validation yielded ~68% predictive accuracy and a 22-gene expression profile associated with peritoneal relapse was identified. The prediction system identified patients with poor prognosis. In the prospective phase, the molecular prediction yielded 76.9% overall accuracy. Kaplan–Meier analysis of peritoneal-relapse-free survival showed a significant difference between the “good signature group” and “poor signature group” (log-rank p = 0.0017). Multivariate analysis by Cox regression hazards model identified the molecular prediction as the only independent prognostic factor for peritoneal relapse.

Conclusions

Gene expression profile inherent to primary gastric cancer tissues can be useful in prospective prediction of peritoneal relapse after curative surgery, potentially allowing individualized postoperative management to improve the prognosis of patients with advanced gastric cancer.     

Aberrant Gene Methylation Is a Biomarker for the Detection of Cancer Cells in Peritoneal Wash Samples from Advanced Gastric Cancer Patients

Purpose  

To assess whether gene methylation in peritoneal fluid (PF) is clinically feasible for determining micrometastasis to the peritoneum in gastric cancer.     

胃癌术中盆腹膜取材检测微转移及其临床意义评估

目的采用胃癌术中直肠子宫（膀胱）陷窝腹膜活检并应用CEA、CK-20免疫组织化学染色的方法确定胃癌腹膜远处的微转移。方法2004年6月至2006年3月期间，选择南京市鼓楼医院40例术前物理学检查和影像学检查未能发现，术中无肉眼及用手可触及的腹膜远处转移的胃癌病例，行术中直肠子宫（膀胱）陷窝腹膜活检并行HE常规染色和CEA、CK-20免疫组织化学染色检查有无腹膜远处微转移。结果本组40例胃癌患者中有10例发生直肠子宫（膀胱）陷窝腹膜的微转移，均发生在肿瘤侵及胃壁全层或浆膜外者[27．8％（10／36）]，其微转移发生率明显高于肿瘤未侵及胃壁全层或浆膜外者[0（0／4）]，P〈0．05。10例中8例淋巴结转移数目均超过6枚，另外2例淋巴结转移数目均为1枚；转移淋巴结数≥7枚时的腹膜微转移发生率[44．4％（8／18）]明显高于转移淋巴结数〈7枚者[16．7％（2／12）]，P〈0．05。10例中，有8例为低分化腺癌，2例为中分化腺癌。结论侵及浆膜或浆膜外的胃癌病例，即使在术前检查或术中探查时未发现远处腹膜转移，术中仍可行直肠子宫（膀胱）陷窝腹膜活检，以发现有无远处腹膜的微转移，为胃癌分期、腹腔内辅助化疗及预测预后提供证据。