甲醛致小鼠肺DNA蛋白质交联和DNA断裂效应的研究

目的 研究甲醛致小鼠肺DNA-蛋白质的交联（DNA-protein crosslinks．DPC）和致DNA的断裂作用。方法以小鼠肺为材料,经体外染毒后．采用KCl-SDS沉淀法和单细胞凝胶电泳法检测液态甲醛染毒后肺部提取细胞中DNA-蛋白质交联物的含量及DNA的断裂效应。结果KCl-SDS沉淀法,低浓度的液态甲醛（5μM,25μM）不能引起DNA-蛋白质的交联（P〉0．05）,较高浓度（125μM．625μM）可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用（125μM,p〈0．05;625μM．P〈0．01）。而单细胞凝胶电泳法显示甲醛在低浓度（5μM,25μM）时可以引起DNA链的断裂（P〈0．01）．在较高浓度（125μM,625μM）时可以引起交联作用（P〈0．01）。结论甲醛在较高浓度时可以导致明显的DNA-蛋白质交联作用．而在〈25μM时以DNA断裂为主。     

微囊藻毒素-LR致小鼠肝、肾和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨微囊藻毒素-LR所致小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联(DPC)作用。方法以昆明种雄性小鼠为实验对象,腹腔注射染毒,采用KCl-SDS沉淀法检测小鼠肝、肾、睾丸细胞中交联DNA和游离DNA的量,计算其DPC系数,DPC系数=交联DNA/(交联DNA+游离DNA),判断DNA与蛋白质的交联程度。结果在小鼠肝细胞中,微囊藻毒素-LR各染毒组DPC数量均有显著增加,其DPC系数与对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。在小鼠肾细胞中,微囊藻毒素-LR染毒剂量为3μg/kgbw和6μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05);染毒剂量为12μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。在小鼠睾丸细胞中,染毒剂量为3μg/kgbw时,DPC数量未增加,其DPC系数与对照组相比差异无显著性(P>0.05)。染毒剂量为6μg/kgbw和12μg/kgbw时,DPC数量显著增加,其DPC系数与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。结论在一定的染毒剂量下,微囊藻毒素-LR可以引起小鼠肝、肾、睾丸细胞DNA-蛋白质交联。     

邻苯二甲酸丁基苄酯诱发HeLa细胞株DNA-蛋白质交联影响的初步研究

目的研究邻苯二甲酸丁基苄酯（BBP）的遗传毒性。方法采用不同浓度BBP（0、5、25、125、625μmol·L^-1）对HeLa细胞进行体外染毒2h,利用KCl-SDS沉淀法检测DNA-蛋白质交联DPC效应。结果不同浓度的BBP均能引起HeLa细胞DPC系数的上升,但这种效应在低浓度（5μmol·L^-1）时不显著（P〉0.05）;而在高浓度（25、125、625μmol·L^-1）时,BBP能够显著地或非常显著地（P〈0.01,P〈0.05）诱导HeLa细胞产生DNA-蛋白质交联效应。结论邻苯二甲酸丁基苄酯可诱发HeLa细胞株DNA-蛋白质交联。     

甲醛致雄性大鼠脑和睾丸细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的探讨气态甲醛致雄性大鼠脑细胞和睾丸细胞DNA-蛋白质交联（DNA-protein crosslinks,DPC）作用。方法将24只SPF级Wistar雄性大鼠随机分为4组,每组6只,分别为0.5、1.0、3.0mg／m。气态甲醛染毒组和阴性对照组。连续动态吸入染毒72h后,应用KCl-SDS沉淀法检测大鼠脑和睾丸组织DNA-蛋白质交联的含量。结果与阴性对照组比较,0.5mg／m^2气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织的DPC系数差异无统计学意义（P〉0.05）,随着甲醛浓度的增加,DPC系数逐渐升高。与阴性对照组比较,1.0、3.0mg／m^3气态甲醛染毒组大鼠脑和睾丸组织DPC系数升高,差异有统计学意义（P〈0.01）结论低浓度（0.5mg／m^3）的气态甲醛不能引起大鼠脑和睾丸组织产生DPC效应,而较高浓度（1.0、3.0mg／m^3）的气态甲醛可明显诱导其产生DPC效应,造成严重的DNA损伤。     

甲醛致大鼠离体骨髓细胞DNA-蛋白质交联的研究

目的检测经不同浓度甲醛染毒后所致大鼠骨髓细胞的DNA-蛋白质交联程度。方法采用KCl-SDS沉淀法检测液态甲醛所致DNA-蛋白质交联（DPC）效应。结果低浓度的甲醛（10μmol／L和50μmol／L）能引起DNA-蛋白质的交联;较高浓度的甲醛（250μmol／L和1250μmol／L）可以产生明显的DNA-蛋白质交联作用（P〈0．01）。结论甲醛可造成骨髓细胞DNA-蛋白质交联,而DPC可以对细胞产生严重的遗传毒性,这可能是甲醛导致白血病的分子机制之一。     

邻苯二甲酸二丁酯对体外大鼠肝脏细胞的氧化损伤作用

目的探讨邻苯二甲酸二丁酯（DBP）对大鼠肝脏细胞的急性氧化损伤作用。方法用0、5、20、80μmo·lL^-1的DBP溶液对大鼠肝脏细胞进行体外染毒1h,然后分别用硫代巴比妥酸（TBA）法和KCl-SDS沉淀法来检测丙二醛（MDA）含量和DNA-蛋白质交联（DPC）系数的变化。结果随着DBP染毒浓度的升高,大鼠肝脏细胞的MDA含量和DPC系数逐渐上升,且在5μmo·lL^-1浓度时就与对照组具有良好的统计学意义（P〈0.01）。结论DBP能够对体外大鼠肝脏细胞造成氧化损伤。     

甲醛致肥大细胞DNA损伤与诱发哮喘作用关系的初步研究

目的研究甲醛致P815细胞DNA的断裂作用和致DNA-蛋白质的交联作用(DNA-protein cross-links,DPC)。方法以P815细胞为材料,温箱孵育染毒1h后,采用单细胞凝胶电泳法和KCl-SDS沉淀法检测液态甲醛染毒后细胞中DNA的断裂效应及DNA-蛋白质交联物的含量。结果单细胞凝胶电泳法的结果显示甲醛在低浓度(5μM,25μM)时可以引起DNA链的断裂(P<0.001),在较高浓度(125μM,625μM)时可以引起明显的交联作用(P<0.01),而KCl-SDS沉淀法的结果则表明,低浓度的液态甲醛(5μM,25μM)不能引起DNA-蛋白质的交联(P>0.05),较高浓度(125μM,625μM)可以引起明显的DNA-蛋白质的交联作用(125μM,P<0.01;625μM,P<0.01)。结论高浓度甲醛可以导致肥大细胞DPC,也可诱导哮喘;肥大细胞的DPC是否与诱导哮喘作用有关,值得深入研究。     

二氧化硫吸入对小鼠肺和心组织DNA-蛋白质交联作用的影响

[目的]研究二氧化硫（SO2）吸入致小鼠肺、心组织蛋白质氧化损伤和对DNA-蛋白质交联（DPC）率的影响.[方法]分别用浓度为14、28、56mg／m^3的SO2气体对小鼠动态染毒7d（每天6h）,对照组小鼠在同样饲养条件下吸入新鲜空气。用2,4．二硝基苯肼（DNPH）比色法测定蛋白质羰基（PCO）含量,用KCl-SDS法测定DPC率。[结果]SO2各染毒浓度组与对照组相比,均可致小鼠肺、心PCO含量和DPC率升高。雌性小鼠SO2染毒浓度与肺、心PCO含量的回归方程分别为：y=0．1744x＋4．192（R^2=0．9998）,y=0．0420x＋3．896（R^2=0．9763）;雄性小鼠分别为：y=0．0441x＋4．204（R^2=0．9945）,y=0．1553x＋4．488（R^2=0．9883）,均呈现明显的剂量．效应关系。雌性小鼠SO2染毒浓度与肺、心DPC率回归方程分别为：y=0．0395x＋1．404（R^2=0．9913）,y=0．0121x＋1．614（R^2=0．9902）;雄性小鼠分别为：y=0．0132x＋1．616（R^2=0．9821）,y=0．0329x＋1．45（R^2=0．9922）,同样呈现明显的剂量-效应关系。[结论]SO2吸入可致小鼠肺、心PCO含量和DPC率呈剂量依赖性升高。随着SO2浓度的增加,对肺、心蛋白质的氧化损伤加剧,DPC率升高。吸入同浓度SO2小鼠的肺、心PCO含量和DPC率结果表明,对肺的损伤远大于心。     

甲醛致人血淋巴细胞DNA-蛋白质交联作用的定量研究

目的　探讨甲醛致 DNA-蛋白质的交联作用以及交联的检测方法。方法　以人血淋巴细胞为材料 ,设定 0、0 .0 0 5、0 .0 2 5、0 .1 2 5、0 .6 2 5 mmol/ L 五个甲醛浓度梯度 ,采用 KCl- SDS沉淀法来检测染毒后细胞中 DNA-蛋白质交联的含量。结果　甲醛浓度在 0、0 .0 0 5、0 .0 2 5 mm ol/ L 时 ,交联现象不明显或不能诱导DPC(P>0 .0 5 ) ;在 0 .1 2 5、0 .6 2 5 mm ol/ L 时交联程度显著增加 (P<0 .0 1 ) ,并有较好的剂量 -效应关系。结论　在低浓度时 ,甲醛诱导 DNA-蛋白质交联现象不明显或不诱导该现象 ,在高浓度时可显著诱导交联现象。KCl- SDS沉淀法检测 DNA-蛋白质交联的含量是有效的     

甲苯二异氰酸酯致中国仓鼠肺细胞DNA交联作用

目的 研究甲苯二异氰酸酯(TDI)诱导中国仓鼠肺细胞(CHL)DNA的交联作用,探讨TDI的遗传毒性.方法 在培养的CHL细胞中分别加入浓度为0.64,1.28,2.56 μmol/ml的TDI进行染毒,用荧光分光光度法检测细胞内的DNA-DNA交联水平,用氯化钾-十二烷基硫酸钠(KCI-SDS)沉淀法检测细胞内的DNA-蛋白质交联水平.结果 低浓度的TDI不能致DNA-DNA交联(DDC)和DNA-蛋白质交联(DPC)(P>0.05);随着染毒浓度的增加,其DDC率和DPC率也随之升高,高剂量组的DDC为54.97%(P<0.01),DPC为29.06%(P<0.0).结论 一定剂量的TDI能诱导细胞内DNA交联作用.     

螺旋藻对缺铁性贫血的恢复实验

选纯种Ｗｉｓｔａｒ大鼠，用低铁饮食法复制缺铁性贫血（ＩＤＡ）模型，之后，用螺旋藻（ＳＰ）进行恢复试验。以硫酸亚铁为阳性对照组，以低铁饲料为阴性对照组，按ＳＰ含量由小到大分为３个实验组即实验１组（含ＳＰ１％）、实验２组（含ＳＰ８％）及实验３组（含ＳＰ１５％）。经过４周的恢复试验，结果：实验２组和实验３组贫血恢复速度最快，其次是实验１组。实验２组和实验３组体重高于阳性对照组，实验１组体重与阳性对照组接近，阳性对照组体重高于阴性对照组。提示：（１）单纯性缺铁可影响大鼠生长，致大鼠体重增长缓慢；（２）螺旋藻似具有加速大鼠体重增长的作用；（３）螺旋藻用于恢复大鼠ＩＤＡ效果显著，而且用量有一个最适宜的范围．     

18甲基炔诺酮放射免疫分析试剂盒的研制

目的 :采用高灵敏度直接分析血清样品的放射免疫分析技术 ,组装成 18甲基炔诺酮 (NG)放免分析试剂盒。方法 :将NG与牛血清白蛋白 (BSA)进行化学联结 ,合成NG完全抗原 (NG - 3-CMO -BSA) ;制备高亲和力多克隆抗NG抗体 ;采用放射性碘标记人血清 (HSA)与NG化学结合 ,对结合与游离放射性标记配基的分离用交联葡聚糖(Sephadex -G2 0 0 )微柱技术。结果 :本试剂盒不用对被检血清进行预处理 ,可在 3h内检测出NG的血清浓度 ,在 4～8℃存放 6 0天以上活性降低不超过 10 %。结论 :本试剂盒适用于临床常规检验、人群普查及科研和药代动力学研究与应用     

职业性接触苯并(a)芘对焦炉工人胆碱能系统的影响

[目的]探讨职业性接触苯并(a)芘[B(a)P]对焦炉作业工人胆碱能系统的影响.[方法]根据183名男性焦炉工人的工作性质分为炉底组、炉侧组和炉顶组3个组:分别有28、57、57人.41名对照组从该企业的原材料处选择.用高效液相色谱法测定各组工作场所空气中B(a)P的浓度,并对工人尿中1-羟基芘(1-OH-Py)的水平进行检测;分别用碱性羟胺比色法和二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)法测定全血滤液中乙酰胆碱(ACh)的含量和红细胞乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性.[结果]焦化厂空气中B(a)P的浓度明显高于原材料处(10.2±7.6)ng/m3,并且呈现炉顶(1623.5±435.8)ng/m3高于炉侧(185.9±38.6)ng/m3;炉侧高于炉底(19.5±13.2)ng/m3的趋势;焦炉工1-OH-Py水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);与对照组相比,接触组红细胞AChE的活力明显降低,全血ACh的含量升高,差异有统计学意义(P＜0.01).相关分析结果显示尿1-OH-Py与ACh之间呈正相关(r=0.184,P=0.012);1-OH-Py与AChE之间呈负相关(r=-0.163,P=0.027).[结论]职业接触B(a)P能够抑制外周血红细胞AChE的活力,使外周血ACh的水平升高,从而造成胆碱能系统的功能紊乱.     

吸烟和缺碘对育龄妇女血硒、血铅和血镉含量的联合作用

采用2×2析因分析和石墨炉原子吸收仪测定,发现 缺碘(ID)育龄女性吸烟者(SI)全血硒和铅镉有毒元素含量有 明显的交互影响(P均＜0.01),血液Se含量26.5±8.09μg/L, 明显低于对照(34.2±7.64μg/LPb143.7±2.34μg/L和Cd 10.5±4.83μg/L明显高于对照(97.6±21.7μg/L和3.8± 2.34μg/L。SI单因素亦见有使Se含量减低和Pb、Cd含量增 高的现象ID单因素仅见有Pb含量增高(P＜0.01)。提示SI 和ID共存时对人体内微量元素的吸收和贮存有抑制作用,同 时二者共存时可促进有毒元素Pb和Cd的吸收。该ID流行 区人群的Pb含量增高,与地处交通线,受汽车尾气排放铅尘污 染,造成Pb高本底的可能亦不能排除。     

微量、宏量元素与高血压——我国四个地区、六个人群、三个民族的对比分析

以等离子发射光谱仪测血清Fe、Mo、Ni、Pb、Si、Sn、Sr、V、Ca、Mg、Cd、Co、Cr、Cu、Mn、Zn,以F-78型脉冲极谱仪测Se,观察我国四个地区、六个人群(三个民族)共325名男性(40～59岁)的元素—血压(BP)关系,发现元素水平有地区、民族差别;血清Pb、Ni、Si、Sn、V、Cd、Cr间相关系数大,而Sr则具相对独立性;从多因子逐步回归和判别分析,Sr无论在正常血压、高血压和总合并组,恒定与血压正性联系;在部分组Ca(Ca/Mg)、Fe、Co与血压正性联系,血Cr、Sn与血压负性联系;有害元素Cd在血压水平较高的人群水平反低,与血压反而呈负性联系,可能系元素在体内组织和血中分布不一致的缘故。研究并提示,在高血压组必需元素Ni、V、Co、Cr水平较低;血Ca与尿Ca水平不并行,前者不能完全反映Ca摄入量。     

碳水化合物热卡摄入比例变化对重症慢性阻塞性肺病患者通气和代谢的影响

目的：比较10例重症COPD患者在机械通气时，进行等热量不同碳水化合物热卡比例的全胃肠外营养，观察COPD患者通气及代谢的变化。方法：应用间接热卡仪测定能量需要量，给予三种等热量不同碳水化合物热卡的营养液，即40％糖、40％脂肪、20％蛋白质，60％糖、20％脂肪、20％蛋白质和75％糖、5％脂肪、20％蛋白质，并用间接热卡仪测定二氧化碳产生量（VCO2）、氧耗量（VO2）、呼吸商（RQ）、每分通气量（VE）、肺泡通气量（VA）、死腔通气量（Vd），并测定二氧化碳分压（PaCO2）等通气及代谢参数。结果：随着碳水化合物热卡摄入比例的增加，COPD患者的VCO2、VO2、RQ、VE、VA、Vd、PaCO2等通气及代谢指标均无显著变化，碳水化合物热卡摄入量与VCO2、VE、VA、PaCO2无显著相关关系，而RQ与VA呈显著正相关（r＝0．439，P＜0．05）。结论：在COPD患者的营养支持中，合理能量的摄入对减少营养支持并发症的发生更为重要。     

三氯乙烯急性染毒对大鼠肝脂质过氧化的影响

用抗氧化剂维生素Ｅ预处理后,观察三氯乙烯（３０００ｍｇ／ｋｇＢ．Ｗ．）一次性经口染毒２４小时肝脏的超氧化物歧化酶,谷胱甘肽过氧化物酶等抗氧化酶活力及丙二醛含量的变化。结果表明,三氯乙烯染毒组肝脏中丙二醛含量、超氧化物歧化酶活力及血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶活力均高于对照组,同时,肝细胞出现脂肪变与坏死;而维生素Ｅ干预组的丙二醛含量,超氧化物歧化酶活力及血清谷丙转氨酶,谷草转氨酶活力均分别低于三氯乙烯     

血镉含量与SOD,GSH—PX及MDA的关系

镉污灌区的大米镉含量及健康人群血中的镉、过氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及丙二醛(MDA)等生化指标与非污灌区的差异有非常显著意义(P<0.01)。说明镉污灌区人群生活环境质量下降势必影响体内生化指标的异常。     

大骨节病区粮和腐植酸的过氧化损伤效应及微量元素硒、锌的作用的实验观察

应用大骨节病区粮和腐植酸喂养大鼠6周:动物血液和各组织的GSH-Px活力显著降低,但对SOD活力没有大的影响;腓肠肌的GSH-Px活力明显低于心肌和肝脏,其活力降低也最为显著;饮水中加0.2ppm硒能显著升高血液和各组织GSH-Px活力,而2.5ppm锌对SOD、GSH-Px活力和LPO量都无大的影响。说明病区粮,腐植酸引起的动物过氧化损伤效应中,主要是GSH-Px活力降低所致,与SOD的关系不大。