肌酸激酶MB同工酶快速放射免疫测定诊断急性心肌梗塞

采用碘标记肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)、CK-MB标准品和肌酸激酶BB同工酶(CK-BB)抗血清建立CK-MB快速放射免疫测定。灵敏度为0.7ng/ml,测定范围为0.7～50ng/ml。正常值为2.5±0.8ng/ml(83例)。以CK-MB>5.0ng/ml为阳性,心肌梗塞后8小时阳性率为86.4％(男性)和83.3％(女性),24小时阳性率均100％。特异性100％。     

人醛缩酶A单克隆抗体的ELISA用于肝癌的初步探讨诊断

建立人醛缩酶A单抗及其竞争性ELISA法测定血清ALD-A、最小检出量为5ng/m1,对ALD—B和C无交叉反应。测定60例正常人血清ALD—A为131±24ng/ml,上限176ng/ml,肝癌为554±163ng/ml,超过上限179ng/ml者95.5％(44/45),胃癌为482±241ng/ml,增高者75％(9/12)。本法灵敏度高、特异性强、方法简便、所用单抗可大量制备,能使ALD—A检测标准化,可用于临床肝癌诊断测定。     

β-葫萝卜素血浓度测定方法的研究

建立了用高效液相色谱法(HPLC)及可见紫外分光光度(VIS-UV)单波长法、双波长法,测定血浆中β-胡萝卜素(β-C)的浓度。在氯仿或乙醇溶液中检测限为5ng,人血浆中最低检测浓度为25ng/ml,平均回收率为98.8％,CV ％为3.2％。HPLC法的线性范围为25～2000 ng/ml血浆,UV单波长法线性范围为50～4000 ng/ml血浆,双波长法线性范围为100～4000ng/ml血浆。HPLC法与UV法的相关系数>0.99,斜率接近1。     

血浆异常凝血酶原对原发性肝癌诊断的评价

应用RIA法测定血浆异常凝血酶原(DOP)531例,其中肝癌(HOG)285例、肝硬化88例、慢迁肝20例,健康成人138例。结果:(1)从累计分布可见91.4％的非癌者DGP含量在200ng/ml以下,61.75％HCC在此值以上。HGO的DOP水平显著高于其它各组(P均<0.01),(2)以DCP的四种界值计算出拟诊HCC较合理的标准,即DCP≥200ng/ml为阳性,<163ng/ml为阴性,163-199ng/ml为可疑;(3)DCP≥200ng/ml的诊断指数、敏感性、特异性、假阳性率、阳性结果价值分别为0.5389±0.0336、62.11％,91.87％、8.13％,89.85％。说明DCP≥200ng/ml是一可靠而有诊断意义的界值;(4)HOC≤5cm的DOP阳性率为57.41％,≥10cm为84％,DCP含量为瘤体大小、病变进展有一致关系;(5)DOP与αFP互相补充可使总阳性率提高达80.35％。     

肌酸激酶B同工酶快速放射免疫测定及其临床应用

本文建立了血清肌酸激酶BB同工酶(CK-BB)快速放射免疫测定(RIA)方法,灵敏度0.5ng/ml,测定范围0.5～100ng/ml,方法学鉴定符合RIA要求。本实验中正常组其值为1.3±1.8ng/ml。以CK-BB大于3.0ng/ml为阳性,急性心肌梗塞(AMI)组在心肌梗塞后8h男(n=22)、女(n=12)阳性率分别为86％和83％,24h均为100％。急性脑血管意外(CVA)组在脑血管意外后第1天男(n=24)、女(n=6)阳性率分别为8％和17％,第3天分别为79％和83％。方法特异性均为100％。     

缺铁性贫血孕妇补充铁剂后血清铁蛋白的变化

应用放射免疫分析法测定缺铁性贫血孕妇服用“含铁桔粉”补充铁剂前、后血清铁蛋白的变化。31名健康女性血清铁蛋白正常值为40.65±20.99ng/ml((?)±SD)。正常值下限为20ng/ml。87例缺铁性贫血孕妇(孕26～32周)的血清铁蛋白为12.76±4.47ng/ml<20ng/ml的占86.49％,≌20ng/ml的占13.51％。经补铁治疗后,血清铁蛋白由12.76±4.47ng/ml上升为30.14±11.80ng/ml(P<0.001)。妊娠后期的孕妇,对铁的需要量明显增加,可产生缺铁性贫血,用“含铁桔粉”补充铁剂可治疗妊娠期缺铁性贫血。     

降钙素原在血流感染中的临床价值

目的 探讨降钙素原(procalcitonin,PCT)在血流感染中的临床价值.方法 回顾性分析2015年1月至2016年9月血流感染患者的临床资料、血培养和PCT结果,参照血培养结果评估PCT的临床意义.结果 收集8 710例疑似血流感染患者资料,与阴性血培养结果相比,PCT在革兰阴性细菌血流感染中明显升高(7.36 ng/ml,95％CI4.69～8.82 ng/ml,P＜0.01),在革兰阳性细菌(4.77 ng/ml,95％CI 3.35～6.04 ng/ml,JP＜0.01)和真菌血流感染(1.30 ng/ml,95％CI 0.79～2.98 ng/ml,P＜0.01)的患者中稍高,但污染菌的则不变.PCT对血流感染的诊断临界值为1.1 ng/ml,特异性、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值分别为81.0％,79.0％,25.8％和93.1％.结论 PCT能快速区分血流感染与非血流感染,具有很好的临床诊断价值.     

血浆儿茶酚胺荧光测定法氧化铝吸附葡聚糖凝胶G-10分离纯化

本文建立了用氧化铝-葡聚糖凝胶G-10分离纯化,然后氧化为三羟吲哚的血浆儿茶酚胺测定法。操作为:将血浆与氧化铝混合,震荡吸附,水洗后用过氯酸洗脱直接加于葡聚糖凝胶柱上,再用甲酸洗脱,用高铁氰化钾氧化为三羟吲哚,在岛津RF-520型分光光度计上以两组波长(395/495,410/510nm)分别读取读数。最后根据标准溶液的荧光读数计算出含量。 从标准、样品及空白的扫描图谱看来,分离效果满意。 标准曲线:从0～2000ng皆呈线性。 标准回收率,NA20ng时为84±2.20％(M±S.E.),C.V.=5.23％,n=4;A20ng时为82±2.41％,C.V.=5.87％,n=4。 添加回收率:血浆4ml加入NA10ng时为82±2.68％,C.V.=6.53％,n=4;加入A10ng时为80±2.28％,C.V.=5.7％,n=4。 血浆儿茶酚胺含量参考值:重庆地区30例(平均30岁)健康男女清晨空腹静卧时采血,含量为:NA:0.43±0.08ng/ml,A:0.16±0.029ng/ml,(M±S.E.)。 本文对分析中的有关条件进行了讨论,并结合临床及实验研究作了一些测定。 本法特点:简单,快速,分离满意,费用低。     

他巴唑致急性粒细胞缺乏症一例

患者女性,30岁,农民。于4~+月前始心悸、急躁、乏力、多食消瘦。查:Ⅱ。弥漫性甲肿并闻及血管杂音,双手抖动。测甲状腺吸~(131)Ⅰ率:2小时25.7％,6小时53％,24小时48.1％。血总T_35ng/ml,总T_419ng/dl(我院正常值总T_3为1—2.28ng/ml,总T_44—12mg/dl),WBC_5,600/mm~3,N54％,诊为弥漫性甲肿性甲亢。予他巴唑30ng/天共12天,上述症状减轻。复查WBC2,300/mm~3,N40％。停他巴唑,予维生素B_460mg/天,鲨肝醇600mg/天共20天,复查WBC6,700/     

结核性和恶性胸腹水铁蛋白测定的临床意义

本文报告用放射免疫分析法对45例胸水进行了铁蛋白浓度的测定。9例恶性胸腹水(其中一例是腹水)的铁蛋白浓度为1429±264ng/ml,36例结核性胸水的铁蛋白浓度为515±51ng/ml,两者差异非常显著(P<0.01)。本文研究结果表明;胸腹水铁蛋白浓度>1000ng/ml即可考虑为恶性胸腹水(特异性为91％,敏感性为78％)。因此,胸水铁蛋白的测定可作为鉴别良、恶性胸水的良好指标。     

赣南乌药中乌药醚内酯不同提取方法的比较研究

目的：比较赣南乌药中乌药醚内酯不同提取方法的优劣,确定从赣南乌药中提取乌药醚内酯的最佳提取方法.方法：分别采用浸渍提取法、渗漉提取法、回流提取法、超声波提取法及索氏提取法对赣南乌药进行提取,采用反向高效液相色谱法（RP-HPLC）测定提取液中乌药醚内酯的含量,以乌药醚内酯的含量为考察指标,优选出最佳提取方法.结果：不同提取方法所得赣南乌药提取液中乌药醚内酯含量不同,浸渍提取法为0.713 0 mg/g,渗漉提取法为0.923 0 mg/g,回流提取法为0.735 0 mg/g,超声波提取法为0.776 0 mg/g,索氏提取法为0.503 0 mg/g.结论：五种提取方法中,渗漉提取法效果最好,对设备和温度没有特殊要求,可低成本地进行工业化生产,是乌药中乌药醚内酯理想的提取方法.     

石墨烯量子点荧光猝灭-恢复法测定Cu2+与谷胱甘肽的含量

通过在温和条件下氧化石墨粉的方法合成高分散性、高荧光强度的石墨烯量子点(GQDs),并运用此GQDs对Cu²⁺和GSH具有荧光猝灭-恢复的效应,建立对这两种物质简便、快捷的检测方法。Cu²⁺与GSH的浓度分别在1.0~10.0 mmol/L、0.1~1.0 mmol/L范围内与GQDs的荧光强度呈良好线性关系,检测限分别为0.01和0.1 mmol/L。此外,在实际样品的检测中,加标法测得的回收率分别为93%~101%、96%~107%。该方法操作简便,测定准确,精密度高,且常见的金属离子及潜在共存物质对Cu²⁺与GSH的检测均没有干扰。     

对照法测定极弱二元碱的含量

目的 ]测定极弱二元碱的含量 .[方法 ]在二元碱的CbKb2 <10 - 9,Kb1/Kb2 为 10～ 2 0 0倍的情况下 ,通过推导分析结果的误差ΔVe2 /Ve2 与ΔpH之间的关系 .[结果 ]在CbKb2 ≥ 0 85× 10 - 12 的条件下 ,分析结果的误差ΔVe2 /Ve2 均小于 1 0 % .     

Analysis of docosanol using GC/MS: Method development,validation, and application to ex vivo human skin permeation studies

Docosanol is the only US Food and Drug Administration (FDA) approved over-the-counter topical product for treating recurrent oral-facial herpes simplex labialis. Validated analytical methods for docosanol are required to demonstrate the bioequivalence of docosanol topical products. A gas chromatography/selected ion monitoring mode mass spectrometry (GC/SIM-MS) method was developed and validated for docosanol determination in biological samples. Docosanol and isopropyl palmitate (internal standard) were separated on a high-polarity GC capillary column with (88% cyanopropy)aryl-polysiloxane employed as the stationary phase. The ions of m/z 83 and 256 were selected to monitor docosanol and isopropyl palmitate, respectively; the total run time was 20 min. The GC/SIM-MS method was validated in accordance with US FDA guidelines, and the results met the US FDA acceptance criteria. The docosanol calibration standards were linear in the 100–10000 ng/mL concentration range (R²>0.994). The recoveries for docosanol from the receptor fluid and skin homogenates were >93.2% and >95.8%, respectively. The validated method was successfully applied to analyze ex vivo human cadaver skin permeation samples. On applying Abreva® cream tube and Abreva® cream pump, the amount of docosanol that penetrated human cadaver skin at 48 h was 21.5 ± 7.01 and 24.0 ± 6.95 ng/mg, respectively. Accordingly, we concluded that the validated GC/SIM-MS was sensitive, specific, and suitable for quantifying docosanol as a quality control tool. This method can be used for routine analysis as a cost-effective alternative to other techniques.     

Automatic analytical approach for the determination of 12 illicit drugs and nicotine metabolites in wastewater using on-line SPE-UHPLC-MS/MS

In this study, we developed a novel on-line solid phase extraction (SPE)-ultra-high-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (UHPLC-MS/MS)-based analytical method for simultaneously quantifying 12 illicit drugs and metabolites (methamphetamine, amphetamine, morphine, codeine, 6-monoacetylmorphine, benzoylecgonine, 3,4-methylenedioxymethamphetamine, 3,4-methylenedioxyamphetamine, cocaine, ketamine, norketamine, and methcathinone) and cotinine (COT) in wastewater samples. The analysis was performed by loading 2 mL of the sample onto an Oasis hydrophilic-lipophilic balance cartridge and using a cleanup step (5% methanol) to eliminate interference with a total run time of 13 min. The isotope-labeled internal standard method was used to quantify the target substances and correct for unavoidable losses and matrix effects during the on-line SPE process. Typical analytical characteristics used for method validation were sensitivity, linearity, precision, repeatability, recovery, and matrix effects. The limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) of each target were set at 0.20 ng/L and 0.50 ng/L, respectively. The linearity was between 0.5 ng/L and 250 ng/L, except for that of COT. The intra- and inter-day precisions were <10.45% and 25.64%, respectively, and the relative recovery ranged from 83.74% to 162.26%. The method was used to analyze various wastewater samples from 33 cities in China, and the results were compared with the experimental results of identical samples analyzed using off-line SPE. The difference rate was between 19.91% and −20.44%, and the error range could be considered acceptable. These findings showed that on-line SPE is a suitable alternative to off-line SPE for the analysis of illicit drugs in samples.     

RP-HPLC法测定大鼠血浆中姜黄素含量

目的 采用RP-HPLC法测定大鼠血浆中姜黄素的含量。方法血浆样品经处理后,按以下色谱条件测定姜黄素的含量：DiamonsilC18柱（4．6mm×250mm,5μm）,柱温：室温;流动相：乙腈-2％醋酸溶液（58：42）;流速：1．0ml／min;检测波长：426nm．结果在本色谱条件下血浆中的杂质峰较少,姜黄素和内标物及其他内源性干扰成分可成功分离。采用乙酸乙酯液液萃取法处理血浆样品,萃取回收率最高。在0．1～0．5mg／L浓度范围内,线性关系良好,回归方程y=0．0026x-0．0756,r=0．9984;日内、日间精密度RSD符合生物样品的分析要求;加样回收率和萃取回收率均在90％以上。结论所建立的测定大鼠血浆中姜黄素含量的方法简单可行、准确可靠,适用于姜黄素的血药浓度监测。     

抗敏胶囊主要成分的HPLC法分析

目的 采用高效液相色谱法分析抗敏胶囊中主要成分（黄芩苷和淫羊霍苷）。方法 测定黄芩苷,以Diamosil　C18柱（250mm×4.6mm）为色谱柱;0.05mol/L磷酸水溶液-乙腈（70:30）为流动相;流速1ml/min;检测波长277nm;测定淫羊霍苷,以Spherisorb　C18（250mm×4.6mm）为色谱柱;乙腈-水-冰醋酸（22:78:0.1）为流动相;流速1ml/min;检测波长270nm。结果 黄芩苷的平均回收率为99.2％,淫羊霍苷的平均回收率为100.4％,符合分析要求,重复性试验的RSD分别为:黄芩苷0.84％,淫羊霍苷1.6％。结论 重复性试验结果良好。另外还对样品的提取条件和测定条件进行了优选,为评价含黄芩苷和淫羊霍苷类药材及其制剂的质量提供了一个灵敏、准确和快速的测定方法。     

紫珠止血作用的实验研究

用紫珠 5,10 ,2 0 g生药·kg- 1体重给小鼠连续灌胃 1周 ,分别测定小鼠的凝血时间和出血时间 ,并进行血小板计数。结果紫珠各剂量组和对照组比较 ,凝血时间和出血时间明显缩短 (P <0 0 5,P <0 0 1,P <0 0 0 1) ,血小板计数明显增高 (P <0 0 5,P <0 0 1)。结果表明 :紫珠有明显的止血作用和升高血小板作用 ,提示紫珠升高血小板作用是其止血机理之一 ,也是其治疗血小板减少性出血的药理基础。     

(大肠癌早期诊断专题）高分辩率熔解曲线分析在大肠癌筛查中的应用

目的 探讨高分辨率熔解曲线分析（high-resolution melting,HRM） 在利用粪便DNA筛查大肠癌中的作用。方法 收集住院治疗的31例大肠癌患者、28例大肠腺瘤患者及20例来医院体检的正常人新鲜粪便标本,应用HRM法检测粪便中APC、K-ras、P53基因的突变情况 。结果 31例大肠癌患者粪便中APC基因突变检出率为41.9%(13/31),K-ras基因突变检出率为35.5%(11/31),P53基因突变检出率为54.8%(17/31),三个基因联合检出率为67.7%(21/31);28例大肠腺瘤患者粪便中APC基因突变检出率为25%(7/28),K-ras基因突变检出率为14.3%(4/28),P53基因突变检出率为46.4%(13/28),三个基因联合检出率为64.3%(18/28);20例正常对照粪便中APC基因突变检出率为5%(1/20),K-ras基因突变率为0(0/20),P53基因突变率为0(0/20)。大肠癌组和大肠腺瘤组基因突变检出率均高于正常对照组(P<0.05) ,而大肠癌和大肠腺瘤组间差异无统计学意义( P>0.05)。结论 利用HRM法检测粪便中APC、K-ras和P53基因突变在大肠癌筛查中具有潜在的应用价值。     

HPLC-MS/MS法测定超声提取刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量

目的:建立一个高效液相-质谱联用(HPLC-MS/MS)测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶含量的方法。方法:建立HPLC-MS/MS方法,进行色谱和质谱方法的考察,得到最优的分析条件,即流动相为乙腈-0.05%的甲酸溶液(20∶80,V/V),流速为0.5 ml/min。采用电喷雾离子源(ESI)进行电离,多离子反应监测(MRM)模式进行信号采集,采用外标法进行定量;采用HPLC-MS/MS方法同时测定刺五加果实中刺五加苷B、E和异嗪皮啶的含量。结果:刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶分别在0.7~30 000 ng/ml、0.4~10 000 ng/ml和0.3~16 000 ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系(r0.999 7),检出限(LOD)分别为0.17 ng/ml、0.12 ng/ml和0.09 ng/ml,定量限(LOQ)分别为0.7 ng/ml、0.4 ng/ml和0.3 ng/ml,不同浓度下的平均加标回收率为98.10%、98.19%和98.21%;在最优提取条件下刺五加果实中刺五加苷B的含量为(1.935 0±0.001 5)mg/g,刺五加苷E的含量为(0.273 0±0.003 5)mg/g,异嗪皮啶的含量为(0.013 0±0.001 2)mg/g。结论:HPLC-MS/MS法灵敏度高、选择性好、分析时间短,可对刺五加果实中刺五加苷B、刺五加苷E和异嗪皮啶进行准确的定量分析。