微生物比浊法测定妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液的效价

目的：建立妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液效价的微生物比浊法。方法：分别采用微生物比浊法和管碟法对妥布霉素、硫酸妥布霉素注射液及妥布霉素滴眼液的含量进行测定和比较研究。结果：妥布霉素效价测定的线性范围为0.4~1.0 U/ml;R2=0.991 3,硫酸妥布霉素注射液平均回收率为100.2%,RSD为2.6%（n=9）;妥布霉素滴眼液平均回收率为99.6%,RSD为1.5%（n=9）。结论：微生物比浊法具有简便、精确、快速的特点,可应用于产品的控制。     

HPLC-ELSD法测定硫酸妥布霉素氯化钠注射液的含量

目的建立硫酸妥布霉素氯化钠注射液含量测定的HPLC-ELSD法。方法采用HPLC-ELSD法测定了硫酸妥布霉素氯化钠注射液的含量。色谱条件：Waters Sunfire C18色谱柱,1.5%三氟醋酸-甲醇（97∶3）为流动相,流速0.5mL·min^-1。柱温30℃。ELSD检测器：漂移管温度为60℃,雾化气体压力为25psi。结果妥布霉素在2.4～38.4μg的范围内,线性关系良好,r=0.9998。平均回收率为99.2%（n=9）,RSD为0.97%;氯化钠在20～200μg的范围内,线性关系良好,r=0.9999。平均回收率为99.0%（n=9）,RSD为0.89%。结论该方法操作简便、准确、重复性好,可用于该制剂的含量测定。     

旋光法快速测定硫酸妥布霉素注射液半成品的含量

目的 快速测定硫酸妥布霉素注射液半成品含量。方法 根据妥布霉素具有旋光性的特性，采用旋光法，样品不需任何处理，直接测定。结果 硫酸妥布霉素注射液浓度在1－5uml^-1范围内，与旋光度呈线性关系，回归方程：y=0.620x-0.263 r=0.9999,平均回收率99．90％，RSD0．42％（n=5)，与微生物法基本一致。结论 该方法简单快速，尤其适用于药厂医院对该品种的质量控制与半成品含量的快速测定。     

硫酸妥布霉素注射液工艺研究

目的:保证硫酸妥布霉素注射液成品质量符合2010版中国药典。方法:通过对硫酸妥布霉素注射液pH值的稳定性考察,确定硫酸妥布霉素注射液半成品pH范围。结果:硫酸妥布霉素注射液半成品pH应控制在5.5-6.0之间,方可保证硫酸妥布霉素注射液的质量符合药典标准。     

HPLC-柱前衍生化-双波长法同时测定妥布霉素地塞米松滴眼液中2种主成分的含量

目的:建立同时测定妥布霉素地塞米松滴眼液中妥布霉素和地塞米松含量的方法。方法:采用高效液相色谱-柱前衍生化-双波长法。色谱柱为Agilent C18,流动相为0.25%三羟甲基氨基甲烷-乙腈-0.5 mol/L硫酸(40∶59∶1,V/V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为365、220 nm,柱温为30℃,进样量为20μl。结果:妥布霉素、地塞米松检测质量浓度线性范围分别为18.01~180.09、6.02~60.24μg/ml(r=0.999 5、0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<1%;加样回收率分别为98.65%~100.01%、98.92%~100.20%,RSD分别为0.47%、0.50%(n=9)。结论:该方法简便省时、专属性强、重复性好、结果准确可靠,可用于妥布霉素地塞米松滴眼液的质量控制。     

HPLC-ELSD法测定妥布霉素滴眼液的含量

目的建立HPLC-ELSD法测定妥布霉素滴眼液含量的方法。方法选用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,以体积分数1%三氟醋酸-甲醇(90∶10)为流动相,流速为0.5 mL·min-1。ELSD检测器:漂移管温度为60℃,雾化气体压力为50 psi。结果妥布霉素质量浓度在11.92~119.24μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 5。平均回收率为99.5%(n=9),RSD为0.6%。结论该方法操作简便、准确、重复性好,可用于妥布霉素滴眼液的含量测定。     

快速比色法测定硫酸妥布霉素注射液中间体的含量

以碱性酒石酸铜（ACT）比色法测定了硫酸妥布霉素注射液的含量。硫酸妥布霉素的平均回收率为100．07％，变异系数0.96％.结果表明本法快速、简便、准确，适用于制药厂对中间体的质量控制及医院药房的快速分析。     

蒸发光散射-HPLC法测定硫酸妥布霉素注射液中的有关物质

目的:建立硫酸妥布霉素注射液有关物质的测定方法。方法:采用高效液相色谱法,蒸发光散射检测器。色谱柱为C18柱,流动相为0.2mol.L-1三氟乙酸溶液,流速为0.4mL.min-1,飘移管温度为110℃,载气流量为3.0L.min-1。结果:妥布霉素检测浓度在0.14～1.01μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9954),妥布霉素与有关杂质能有效分离,检测限为0.1072μg。结论:本方法可有效地控制硫酸妥布霉素注射液中的有关物质。     

酸性染料比色法测定妥布霉素滴眼液的含量

目的：建立酸性染料比色法测定妥布霉素滴眼液的含量。方法：根据妥布霉素与酸性染料甲基橙在pH为5.8的介质中反应可生成有色离子对化合物的性质,在妥布霉素水溶液中加入0.1%甲基橙溶液、磷酸盐缓冲液（pH 5.8）、氯仿,混合振摇1分钟后静置分层,于435 nm波长处测定氯仿层吸光度并计算妥布霉素含量。结果：妥布霉素质量浓度在20.08～80.32 mg.L-1的范围内与离子对化合物的吸光度呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率为100.9%（RSD=0.68%）。结论：该法快速、简便,结果准确可靠,可用于妥布霉素滴眼液的质量控制。     

柱后衍生化高效液相色谱法测定妥布霉素滴眼液的含量

目的 建立高效液相色谱-柱后衍生法测定硫酸妥布霉素含量的方法.方法 色谱柱为Waters SunFire C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相为含戊烷磺酸钠和冰醋酸的硫酸钠溶液;柱温30℃,流速1.2mL/min.柱后衍生化试液为邻苯二甲醛溶液,流速0.5mL/min,衍生化反应温度60℃,荧光激发波长360nm,发射波长440nm.结果 硫酸妥布霉素在4.15～62.28mg/L浓度范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率(n=9)为99.5%.结论 该方法简便快速,结果准确可靠,重复性好,可用于硫酸妥布霉素的定量分析.     

HPLC柱前衍生化测定组织液中妥布霉素的含量

目的:建立HPLC柱前衍生化法测定组织液中妥布霉素的含量。方法:使用含异硫氰酸-1-奈酯(NITC)的吡啶溶液在70℃衍生化,然后使用甲胺/乙腈溶液消除过度衍生化。HPLC使用AgilentHypersilODS色谱柱,流动相为乙腈:水(60:40),流速0.9mL/min,检测波长:230nm。结果:较好的检测出了组织液中妥布霉素的含量,检测范围为0.9μg/mL～20.0μg/mL,检测限为0.75μg/mL(信:噪=3,注射10μL),日内变异率小于2.0%(n=6),日间变异率小于5.3%,相对回收率大于99%。结论:NITC柱前衍生化HPLC分离测定注射用硫酸妥布霉素的含量方法简单,衍生化稳定可靠,使用高效液相可进行大规模样本测试。     

卡那霉素B的酶—化学修饰

用酶—化学修饰的方法,对卡那霉素B的C_3~′位进行化学结构改造。利用耐药菌E.coliK.12 ML1629产生的钝化酶选择性地使卡那霉素B的C_3~′位羟基磷酸化,再用化学方法,将卡那霉素B-3~′—磷酸酯转化为3′—氯代—3′—去氧卡那霉素B,进而合成3′去氧卡那霉素B,即妥布拉霉素。     

妥布霉素滴眼液的安全性研究

目的考察妥布霉素滴眼液的安全性。方法对比观察妥布霉素滴眼剂、5%辣椒酊、生理盐水局部应用、单次给药和连续给药1周对家兔眼的刺激性。结果妥布霉素滴眼液单次及多次给药对兔眼均无明显影响,双眼角膜透明,无混浊,虹膜纹理清晰,结膜无充血、水肿、分泌物。结论妥布霉素滴眼液临床应用是安全的。     

黑暗链霉菌原生质体融合

报道了黑暗链霉菌原生质体制备和融合的方法。将一原养型亲株原生质体经紫外线灭活2分钟,与另一苯丙氨酸缺陷型突变株原生质体等量混合,40％PEG处理,32℃保温3分钟,获得了重组后代,经分析,融合子的代谢产物中次组分的含量有所降低。     

离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素

目的 开发利用离子交换树脂混用技术分离纯化妥布霉素的工艺。方法 建立2,4-二硝基氟苯(DNFB)HPLC柱前衍生化检测妥布霉素及相关物质,以树脂吸附量和解吸量以及妥布霉素纯度为指标,通过静态吸附和动态吸附实验,对妥布霉素在树脂上吸附和解吸条件进行优化。结果 从10种不同类型的树脂筛选出HZ-3C和JK110分离纯化妥布霉素,确定最优工艺条件如下：确定两种树脂最佳比例为3:1,上样pH值为9,上样流速为3BV/h,使用浓度0.20%和0.35%氨水溶液进行梯度洗脱。采用优化后的条件,妥布霉素纯度从32.85%提高到94.82%,回收率为88.26%。结论 建立了一种新的妥布霉素分离纯化方法,优化后的工艺妥布霉素得率高、工艺简单易行,适合工业化生产。     

Continuous versus intermittent administration of ceftazidime in intensive care unit patients with nosocomial pneumonia

A prospective, randomized pilot study was undertaken to compare the efficacy of continuous versus intermittent ceftazidime in ICU patients with nosocomial pneumonia. Ceftazidime was administered either as a 3 g/day continuous infusion (CI) or an intermittent infusion (II) of 2 g every 8 h. In addition, all patients received concomitant once-daily tobramycin. The demographics of the evaluable patients (n=35) were similar between the groups: age (years), CI 46±16, II 56±20; Apache score, CI 14±4, II 16±6; time (days) from admission to diagnosis, CI 9±6, II 9±6. Clinical efficacy, defined as cure/improvement was similar between groups [n (%), CI 16/17 (94), II 15/18 (83)], while microbiological response was also comparable [n (%), CI 10/13 (76), II 12/15 (80)]. Minimal inhibitory concentrations (MICs) for all isolates were measured throughout the treatment course; there was no development of resistance during therapy for either regimen. While limited clinical data exist, our results suggest that the use of ceftazidime by CI administration maintains clinical efficacy, optimizes the pharmacodynamic profile and uses less antibiotic compared with the standard 2 g every 8 h intermittent dosing regimen.     

Pseudomonas aeruginosa biofilms are more susceptible to ciprofloxacin than to tobramycin

The objective of this study was to determine and compare the biofilm elimination concentrations (BEC: the concentration which reduced the viability of biofilm organisms by at least 99.9%) of ciprofloxacin and tobramycin for Pseudomonas aeruginosa, a common cause of nosocomial biomaterial-related infections. Bacterial biofilms were produced in the modified. Robbins device using continuous culture flow at 60 ml/h for 40–44 h, and the sessile organisms were then exposed to either ciprofloxacin or tobramycin at a range of concentrations for 12 or 36h. The BEC of ciprofloxacin was 5 μg/ml for the 12 and 36 h treatments, a value 10 × greater than the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). In contrast, the BEC of tobramycin was > 100 μ/ml after 12h and 75 ug/ml following 36 h of drug exposure, that is 75–100 × the MIC and MBC. The results demonstrated that the BEC is a more suitable indicator of the antibiotic susceptibility of P. aeruginosa biofilms than the MIC and MBC. Ciprofloxacin was significantly more effective than tobramycin in the treatment of P. aeruginosa adherent to biomaterials. With respect to clinical application, if the intention of antibiotic use is to eradicate bacteria adherent to devices, only biofilm-active agents should be used.     

HPLC-ELSD法测定妥布霉素地塞米松滴眼液中妥布霉素的含量

目的:建立以高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定妥布霉素地塞米松滴眼液中妥布霉素含量的方法。方法:色谱柱为VP ODS C18,流动相为1.0%三氟乙酸-甲醇(95∶5),流速为1.0mL·min-1,载气漂移管温度为45℃,压力为3.5bar,检测波长为254nm。结果:妥布霉素检测浓度的线性范围为156.0~436.0μg·mL-1(r=0.999 7);检测限和定量限分别为0.523、1.744μg;平均回收率为99.57%(RSD=0.92%)。结论:本方法准确可靠、专属性强,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC柱前衍生法测定妥布霉素

方法 对妥布霉素HPLC测定方法进行了研究。目 的 选用2,4- 二硝基氟苯(DNFB)柱前衍生化,以Agilent Hypersil ODS为色谱柱,0.25%三羟甲基氨基甲烷溶液-乙腈-0.5mol·L-1硫酸溶液(40∶59∶1)为流动相,流速为1.2ml·min -1,检测波长365nm。结果 在10～100μg范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,r＝0.9999。平均回收率为100.9%,RSD为1.5%。结论 本方法简便准确,重 现性好,可用于妥布霉素的质量控制。