茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的:研究茶多酚对精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响,分析茶多酚对精索静脉曲张大鼠生精功能是否具有保护作用。方法:清洁级青春期Wistar大鼠32只随机分为4组,每组8只:假手术组(仅模拟手术过程,不结扎血管)、模型组(建立左精索静脉曲张模型)、茶多酚低剂量组[建立精索静脉曲张模型并给予10 mg/(kg·d)茶多酚干预]、茶多酚高剂量组[建立精索静脉曲张模型并给予40 mg/(kg·d)茶多酚干预]。建立左侧精索静脉曲张模型4周后,假手术组及模型组均给予生理盐水1 ml/100 g,茶多酚低剂量组及茶多酚高剂量组分别给予茶多酚10 mg/kg(用生理盐水配置成浓度为1 mg/ml)和40 mg/kg(用生理盐水配置成浓度为4 mg/ml),灌胃,1次/日,持续4周。4周后4组大鼠均处死并分别取左侧睾丸组织,检测低氧诱导因子-1(HIF-1)、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt C)和caspase-3在睾丸组织中的表达及生精细胞的凋亡并计算凋亡指数(AI)。结果:茶多酚干预组大鼠Bcl-2表达高于模型组(110.03±3.07),低于假手术组(154.18±2.96);茶多酚低剂量组大鼠Bcl-2(127.67±1.28)表达低于茶多酚高剂量组(136.41±1.95),差异有统计学意义(P0.05)。茶多酚干预组大鼠HIF-1、Bax、Cyt C和caspase-3的表达低于模型组,高于假手术组;茶多酚低剂量组大鼠HIF-1、Bax、Cyt C和caspase-3的表达高于茶多酚高剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。假手术组AI最低,茶多酚干预组AI低于模型组,茶多酚高剂量组AI低于茶多酚低剂量组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:茶多酚能显著降低精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞的凋亡。     

生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡状况的影响

目的:探讨实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡状况以及生精冲剂对其凋亡的影响。方法:将60只成年雄性W istar大鼠随机抽出20只为对照组,其余按石津和彦改良法制成左精索静脉曲张大鼠模型,再随机分为模型组20只,治疗组20只。用末端脱氧核苷酸转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测睾丸生精细胞凋亡。结果:模型组大鼠睾丸生精细胞凋亡指数明显高于对照组(P<0.01)和治疗组(P<0.01),治疗组与对照组比较有明显差异(P<0.01)。结论:实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡增加,这可能是影响生育力的机制之一;生精冲剂能够减少精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡,对睾丸生精功能具有保护作用,进而可提高睾丸的生殖能力。     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 :探讨大鼠精索静脉曲张对睾丸生精细胞凋亡的影响 ,阐明精索静脉曲张引起不育的病理机制。　方法 :选用雄性SD大鼠 32只 ,随机分为假手术组、4 5d模型组、6 0d模型组及 90d模型组。采用肾静脉缩窄法建立精索静脉曲张动物模型 ,流式细胞术分别检测各组大鼠睾丸凋亡细胞数及各级生精细胞数。　结果 :假手术组未出现明显的凋亡峰 ,各模型组均出现明显的凋亡峰 ,且随着造模时间的延长凋亡峰增高。　结论 :精索静脉曲张可引起睾丸生精细胞大量凋亡 ,各级生精细胞数减少 ,这可能是精索静脉曲张引起睾丸生精功能障碍从而导致不育的根本机制     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能的作用

目的:探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的作用.方法:观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响.测定各组实验大鼠睾丸SOD、CAT、ACE活性和LPO、NO含量.结果:治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组;SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.05).结论:生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精液质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关.     

精索静脉曲张大鼠睾丸自噬对生精细胞的影响

目的:研究精索静脉曲张(VC)大鼠模型中睾丸不同水平自噬对生精细胞凋亡的影响。方法:雄性SD大鼠54只随机分为6组:空白对照组、雷帕霉素对照组、氯喹对照组各6只,VC组、VC+雷帕霉素组、VC+氯喹组各12只。采用HE染色观察睾丸、附睾组织形态学变化,并对睾丸及附睾中精子形成情况进行评分,TUNEL染色检测生精细胞凋亡指数(AI),Western印迹检测LC3、p62、Bax、Bcl-2的表达。结果:空白对照组、雷帕霉素对照组、氯喹对照组大鼠睾丸及附睾组织均未发生明显形态学变化,精子形成情况评分及AI亦无显著差异(P>0.05);VC组大鼠睾丸及附睾组织发生明显病理损伤,精子形成情况评分显著降低(P<0.01),AI显著升高(P<0.01),但VC+雷帕霉素组较VC组明显改善,而VC+氯喹组较VC组轻度加重。此外,与空白对照组比较,VC组自噬相关蛋白LC3(包括LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值)和促凋亡蛋白Bax表达显著增加(P<0.01),抑凋亡蛋白Bcl-2表达则显著降低(P<0.01);且VC+雷帕霉素组LC3与Bcl-2表达显著高于VC组(P<0.01),p62和Bax表达则显著低于VC组(P<0.01);而VC+氯喹组LC3与Bcl-2表达显著低于VC组(P<0.01),p62和Bax的表达则显著高于VC组(P<0.01)。结论:VC可诱导大鼠睾丸自噬和生精细胞凋亡,上调自噬可抑制生精细胞凋亡,阻滞自噬则可促进生精细胞凋亡。     

精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡与caspase-3蛋白的表达

目的:探讨caspase-3在精索静脉曲张大鼠生精细胞中的表达及其与生精细胞凋亡的关系。方法:雄性SD大鼠24只,随机分为假手术组(SOG)、30 d术后组(PG1)、60 d术后组(PG2),每组8只。建立左精索静脉曲张模型,TUNEL法检测生精细胞凋亡,免疫组化SABC法检测caspase-3表达。结果:SOG、PG1、PG2大鼠左、右侧睾丸每生精小管截面caspase-3阳性细胞数分别为0.117 5±0.012 9、0.246 3±0.042 1、0.293 8±0.051 1及0.165 0±0.019 2、0.253 8±0.021 9、0.277 5±0.034 3。与SOG相比,PG1和PG2组大鼠双侧睾丸生精细胞caspase-3表达均增加,差异有显著性(P=0.011 5及P=0.014 4)。结论:精索静脉曲张可能是大鼠生精细胞caspase-3表达增加且生精细胞凋亡增多的机制之一。     

中药生精冲剂对精索静脉曲张大鼠的治疗

目的：研究中药生精冲剂对大鼠精索静脉曲张的影响及疗效。方法：从80只SD雄性大鼠中随机抽出20只作为假手术组，余60只均建立精索静脉曲张病理模型后随机均分为模型组、生精冲剂组和克罗米芬组。造模后15d生精冲剂组和克罗米酚组分别给予生精冲剂4g/（kg·d）和克罗米芬20mg/（kg·d）灌胃，模型组和假手术组正常喂食。造模后45d放免法测定血清性激素（FSH、LH和T）及观察各组大鼠睾丸组织结构。结果：生精冲剂组大鼠光镜下睾丸组织结构优于模型组和克罗米芬组；血清FSH、LH生精冲剂组显著低于模型组和克罗米芬组（P〈0.05），而克罗米芬组显著高于其他3组。T在生精冲剂组、克罗米芬组和假手术组之间无显著差异，但均显著高于模型组（P〈0.05）。结论：中药生精冲剂对精索静脉曲张引起的睾丸损害有保护及修复作用，且可能优于克罗米芬。     

五羟色胺对精索静脉曲张患者睾丸生精功能的影响

５０只雄性Ｓ－Ｄ大鼠被分成五羟色胺（５－ＨＴ）组，精索精脉曲张模型给和对照组，观察睾丸生殖病理变化，进行组织学定量评价，并与人精索静脉曲张相比较。同时测定不同静脉血中５－ＨＴ含量。结果表明：精索静脉曲张者精索内静脉血中５－ＨＴ浓度明显增高，并与精子计数，精子活之间呈负相关。５－ＨＴ对模型鼠睾生精功能有毒性作用，其组织学改变和人精索静脉曲张相似。提示：５－ＨＴ对睾丸的毒性作用是精索静脉曲张不育的得要     

精索静脉曲张大鼠睾丸低氧与生精细胞凋亡的研究

目的 观察实验精静索静咏曲张(varicocele,VC)大鼠睾丸低氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达与睾丸生精细胞凋亡的关系,探讨VC导致不育的病理生理机制.方法 40只大鼠,随机分为3组.建立模型49d后,取其左侧睾丸组织,检测睾丸组织的HIF-1α的表达和生精细胞的凋亡率.结果 westernblot和免疫组化检测的实验组睾丸HIF-1α的表达(2.529±1847,78.57%)显著高于对照组(0.308±0.165,14.29%)和假手术组(0.309±0.164,0.00%)(P<0.05),差异均具统计学意义;实验组睾丸细胞凋亡指数(20.79±5.70)显著低于对照组(0.6±1.4)和假手术组(0.36±0.71)(P<0.001),差异均具统计学意义;实验组睾丸HIF-1α的表达与其细胞凋亡指数呈正相关(r=0.844,P=0.017).结论 VC可引起睾丸低氧,而低氧可以通过诱导生精细胞凋亡来引起睾丸功能的改变.同时,HIF-1α是一种预测生精细胞凋亡程度的有用指标.     

实验性精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的周期时相性研究

精索静脉曲张(varicocele,VC)为泌尿外科常见疾病,其中约21%～41%系因不育而就诊,但截至目前精索静脉曲张导致不育的机制仍不十分清楚[1].由于生精细胞凋亡与不育关系密切,本研究应用流式细胞术(flow cytometry,FCM),分析实验性精索静脉曲张大鼠睾丸生精细胞凋亡的周期时相性,从细胞分子生物学角度探讨精索静脉曲张所致不育的病理机制.     

精子凋亡和生精细胞凋亡检测与精索静脉曲张的关系

精索静脉曲张(varicocele,VC)常人发病率在8%～20%,在男性不育症患者可达39%.协和医院统计1310例男性不育症中VC为466例,占35.57%[1].柯明辉(2010)统计中日友好医院不育症2599例,有VC者703例,占27.05%.VC是慢性渐进性对睾丸生殖功能有损伤的疾病,每增长1岁精液异常危险性提高0.023倍(2.3/100倍),是非VC精液异常危险率的1.2倍[2].发生于左侧睾丸者约为70%～90%,虽然发生在单侧,但它是一种双侧睾丸损伤性疾病,还具有累积性损害的特征,长时间的VC会引起睾丸功能下降,出现睾丸生殖功能障碍[3].青少年患者应该尽早治疗[4].本文就VC精子形态学、精子和生精细胞凋亡检出率与VC的关系综述如下.     

精索静脉曲张大鼠睾丸病理及前列腺素变化的研究

将大鼠左肾静脉部分结扎以建立精索静脉曲张动物模型，对双侧睾丸的形态学及睾丸内前列腺素Ｆ２α的变化进行研究。结果：睾丸组织学变化是生殖阻滞，阻滞在精子细胞和精母细胞为最常见，并有间质小血管的病变。精索静脉曲张可导致睾丸内ＰＧＦ２α逍度明显增高，高浓度的ＰＧＦ２α能引起曲细精管病变，最终导致不育。     

精索静脉曲张大鼠生精小管生精上皮的超微结构研究

目的 通过精索静脉曲张大鼠睾丸的透射电镜观察,了解生精上皮更多的细胞病理现象.方法 雄性Sprayue-Dawley大鼠30只,随机分为(1)精索静脉曲张组(VG)20只,(2)假手术对照组(SOG)10只,按Saypol方法建立左精索静脉曲张模型,处死观察大鼠,取其左、右侧睾丸组织,作透射电镜观察.结果 VG组双侧睾丸均出现生精小管生精上皮的结构损害,左侧相对较重.与SoG组比较,VG的生精上皮变化表现为:支持细胞胞质内出现大量空泡,大量溶酶体出现(72%vs 28%);紧密连接破坏(69%vs31%),线粒体数量减少(160 vs 362), 两者均有显著性差异(P＜0.01);精子顶体形成异常(62%vs38%),尾部线粒体鞘部分缺失,嵴肿胀(71%vs 29%),尾部横切面线粒体数目减少(186 vs 401), 两者均有显著性差异(P＜0.01).结论 生精小管生精上皮的结构损害是由精索静脉曲张导致男性不育的重要原因.     

生精冲剂对精索静脉曲张大鼠睾丸生精功能保护作用的研究

目的探讨生精冲剂对精索静脉曲张睾丸损伤的保护作用。方法观察生精冲剂对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸组织结构、超微结构的影响。测定各组实验大鼠睾丸超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、乙酰胆碱脂酶(ACE)活性和脂质过氧化物(LPO)、一氧化氮(NO)含量。结果治疗组鼠睾丸组织结构与超微结构的损害程度明显低于模型组,SOD、CAT、ACE活性测定值明显高于模型组,LPO、NO含量明显低于模型组(P<0.01)。结论生精冲剂对精索静脉曲张造成的睾丸损害有保护作用,其提高精子质量和生育率的机制可能与抗脂质过氧化和增强抗氧化酶活性有关。     

不育症精液生精细胞凋亡率检测

目的了解精液中生精细胞的状况和生精细胞凋亡率与不育症的关系,并作为评估睾丸功能的指标。方法293例精液标本用瑞-姬染色,油镜下进行生精细胞形态学及凋亡率检出与分析。并采用DNA缺口原位末端标记技术(TUNEL)染色进行对照,确认瑞-姬染色对生精细胞凋亡鉴别的可行性。结果在293例精液中,有生精细胞者273例占93.1%;无生精细胞者20例占6.9%。生精细胞凋亡率随精子数量减少而增加,以无精子症者最高,比生育组高5.8倍(P<0.001)。显示瑞-姬染色的可行性与优越性。结论睾丸生精障碍与生精细胞过度凋亡密切相关,可在精液中检出脱落生精细胞,根据精液生精细胞凋亡率可作为评估睾丸功能的指标之一。     

精索静脉曲张致睾丸生精功能障碍的机制研究进展

精索静脉曲张(Varicocele,VC)是男性生殖系统常见病之一,随着男性不育发病率越来越高,对VC与男性生殖关系的研究成为生殖医学的热点问题之一。近年来,对VC影响睾丸生精功能障碍机制的研究,主要着眼于睾丸温度升高、缺氧、氧化应激、返流、细胞凋亡等诸多环节,但对其确切的机制尚未阐明。探讨VC致睾丸生精功能障碍的机制对临床应用具有重要意义,本文对国内外VC致睾丸生精功能障碍的相关文献进行综述,以期为临床应用提供参考。     

睾丸体积与睾丸生精状态的相关性分析

对103例男性不育患者的睾丸体积与睾丸活检进行对比分析。睾丸活检按光镜下曲细精管中精子发生状态分为轻、中、重度生精障碍,轻度25例,中度45例、重度33例。其睾丸体积分别为13.38±5.13ml,9.09±3.85ml,6.57±3.71ml。三组间睾丸体积有非常显著差异（P<0.01）。表明睾丸体积与睾丸生精状态密切相关。因此,在体检中测定睾丸体积可以迅速判断男性的生殖状态。