检测外周血T淋巴细胞亚群四种方法的比较

用单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群的方法报道较多,各有特点。为了选择一种适于常规应用的简便、特异性及重复性较好的检测方法,本文以抗人T细胞单克隆抗体OKT_3(抗人全T)、OKT_4(抗人T辅助亚群)和OKT_8(抗人T抑制杀伤亚群)采用抗生物素-生物素-辣根过氧化酶(ABC)法、间接SPA菌(SACI-Ig) 花环法、间接免疫荧光法(IFA)和红细胞花环试验(RT)同时检测人T细胞总数和亚群,并进行比较。现将结果报道如下。     

用武系列单克隆抗体检测健康成人外周血淋巴细胞亚群

本文应用国产自制武系列抗人淋巴细胞单克隆抗体与进口OKT系列对比检测103例健康成人外周血T淋巴细胞的正常值。经免疫荧光法检查,Wu71(抗人金T)与外周血单个核细胞反应,Wu167(抗人辅助性T亚群)和Wu448(抗人抑制性T亚群)分别与43.8±9.0％(30％～61％)和31.3±7.0％(20％～48％)外周血单个核细胞反应。Wu167/Wu448之值为1.48±0.5(0.88～2.48)。本文结果还证实上述结果与相应抗人全T单抗(OKT_3),OKT_4,OKT_8的测定值相此无显著性差别。不同性别和不同年龄组的细胞及亚群测定值统计表明:T细胞总数随年龄增长有下降趋势,以男性中老年组与青年组之间差异较显著。T_4受年龄影响较小而性别之间差异较大,女性的T_4及T4/T8明显高于男性。T_8除男性老年组明显低于男性青年组外,其余均无明显差异。     

改良微量细胞毒试验检测外周血T、B细胞总数及T细胞亚群

本文介绍一种改良微量细胞毒试验。应用抗B细胞单克隆抗体和OKT单克隆抗体系统对86例健康成人外周血中T、B细胞总数及T细胞亚群进行了检测。本法具有简便,不需特殊仪器,在白细胞计数池内计数死活细胞,结果准确等特点,结果显示B细胞、OKT_3(总T细胞),OKT_4(辅助T细胞)和OKT_8(抑制/杀伤T细胞)占外周血淋巴细胞百分率分别为20.59±0.6％;66.42±0.8％;41.65±0.8％,27.19±0.7％。并且,观察到随年龄增加,OKT_3和OKT_4细胞降低。OKT_8细胞增加,T_4/T_8比值降低。文章还讨论了老年组OKT_4细胞显著降低的意义。     

T-淋巴细胞亚群比例异常的患者体外检查细胞免疫降低

可鉴定人T淋巴细胞辅助/诱导(OKT_4)和细胞毒性/抑制(OKT_3)亚群的单克隆抗体,近年来不仅被用于研究人类疾病的免疫调节,而且被用于研究细胞群的免疫调节。但对免疫缺陷病患者的血液中OKT_4和OKT_3阳性淋巴细胞二者的比例和体外细胞免疫功能的研究尚少。作者检查了60名不同程度免疫缺陷病患者和20名健康人周围血液中单个核细胞对同种异体细胞(MLC)和PHA的增殖反应。同时应用间接免疫荧光法检查OKT_4和OKT_3淋巴细胞亚群。检查结果:正常对照组OKT_4阳性淋巴细胞范围为42—65%,百分率为56.0±5.3%(平均±1SD);OKT_3阳性淋巴细胞范围为15—42%,百分率为28.6±5.9%;     

以OKT单克隆抗体研究胃癌及系统性红斑狼疮(SLE)患者的外周血 T 淋巴细胞亚群

以鼠抗人 OKT_3、OKT_4、OKT _8三种单克隆抗体检测37例进展型胃癌及23例SLE 患者的外周血中 T 细胞及其亚群细胞的百分值,并计算 OKT_4/OKT_8细胞的百分比值。结果发现胃癌组表现为 OKT_4细胞的降低,OKT_8细胞的增高,OKT_4/OKT_8比值降低,仅为1.2±0.4。其中晚期胃癌组30例中此改变尤为突出,OKT_4/OKT_8比值仅为1.12±0.3(与正常对照2.1±0.5相比,P<0.001)。活动型 SLE 患者正与胃癌组相反,表现为 OKT_8细胞的降低,仅为18.5±4.1%,因而 OKT_4/OKT_8比值增高为3.0±0.5。随着治疗后病情好转,OKT_8细胞恢复正常,而 OKT_4细胞降低(可能与肾上腺皮质激素有关),因而 OKT_4/OKT_8比值反有降低。     

T_3分子复合物的结构与功能

<正> T_3分子复合物是由Kung等于1979年用抗T_3单克隆抗体(OKT_3)确定的。它存在于所有成熟的T细胞及5～10％的胸腺细胞膜上,是人类T细胞的重要分化抗原之一;并与T细胞抗原受体(TCR)紧密相联,参与T细胞的免疫应答。 一、TCR-T_3复合物: TCR是T细胞表面的一个90Kd的二聚体,由 α(49Kd)、β(43Kd) 二个亚单位组     

免疫酶法检测人外周血T淋巴细胞亚群的初步探讨

用抗人淋巴细胞单克隆抗体检测外周血淋巴细胞亚群的主要方法很多。本文采用免疫酶法检测了人外周血T淋巴细胞亚群,并与间接免疫荧光法进行了对比,现将结果报道如下。 材 料 和 方 法 一、免疫酶法检测人外周血T淋巴细胞亚群(0KT_3ODT_OKT_3)试剂盒由中国科学院武汉病毒研究所供给。荧光法单克隆抗体(OKT_3OKT_4OKT_3)由卫生部武汉生物制品研究所提供。 二、外周血淋巴细胞的分离:取正常人外周血3ml,加肝素抗凝。按常规方法分     

肺心病人外周血T细胞亚群测定的临床意义

免疫缺陷可引起呼吸道反复感染,而肺心病人易发生呼吸道感染。为研究肺心病人的免疫功能,我们对28例肺心病患者外周血T细胞亚群进行了检测。 检查对象(1)肺心病人28例,男21例,女7例,年龄60～72岁,平均64.1岁。均为肺部感染的急性发作性住院患者。(2)对照组分为老年组和青年组:老年组18例,男13例,女5例,年龄60～71岁,均为健康者。青年组22例,为献血员,男18例,女4例,年龄25～35岁,平均30岁。 试剂抗人淋巴细胞单克隆抗体OKT_3 (总T细胞)、0KT_4(辅助/诱导T细胞)、OKT_8(抑制/细胞毒T细胞)均为武汉生物制品研究所产品;兔抗鼠IgG、辣根过氧化酶标羊抗人IgM为北京生物制品研究所产品。     

自身免疫病与淋巴细胞、单核细胞亚型

用单克隆抗体可将正常人末梢血中T细胞分为二个亚型:一是有辅助功能的亚群,称OKT_4或Leu3a,二是有杀伤和抑制活性的,称OKT_8或Leu2aT细胞.OKT_4细胞可对破伤风外毒素和链球菌O溶血毒素、簇抗原Ⅱ(ClassⅡ抗原)以及PHA刺激发生反应.OKT_8T细胞对PHA刺激无反应,能识别簇抗原Ⅰ(Class Ⅰ抗原),但OKT_4、OKT_8T细胞对同种抗原的混合淋巴细胞     

食管癌间质反应及T淋巴细胞亚群分布规律的研究

用单克隆抗体作碱性磷酸酶—抗碱性磷酸酶(简称APAAP)复合物免疫酶染色,定量分析食管鳞癌组织中浸润的T淋巴细胞及其亚群,同时观察炎细胞反应程度。结果发现,OKT_1(简称T_1)细胞的浸润密度随癌分化程度的降低而减少,分化差的癌组织内OKT_4(简称T_4)细胞减少,OKT_8(简称T_8)细胞相对增多,致T_4/T_8比值下降。间质淋巴样细胞多者,T_1和T_4细胞也相对较多,但T_8细胞及T_4/T_8比值与炎细胞反应程度无明显关系。提示不能以局部淋巴样细胞或T淋巴细胞的单纯计数和计量来代替检测T_4/T_8比值。     

抗人T细胞单克隆抗体的应用及应注意的几个问题

<正> 1979年,龚忠恕(P.C.Kung)和Golds-tein等首次报道抗人T细胞单克隆抗体(Mc~-Ab)OKT系列制备成功。其中,OKT3与大约70％正常人外周血单个核细胞(PBM)反应,识别全部T细胞;OKT4与40％～50％正常人PBM反应,识别诱导和辅助T细胞亚群(Ti/h);OKT8与20％～30％正常人PBM反应,识别杀伤和抑制性T细胞亚群(T_(C/S)。此后,又有许多其它抗人T细胞     

茶碱敏感和茶碱抵抗T细胞及自身花T细胞的单克隆抗体鉴定

茶碱敏感T细胞(Ts)和茶碱抵抗T细胞(T_R)已被许多实验证明分别具有抑制和增强免疫反应的作用。自身玫瑰花形成T细胞(Tarf)的功能因实验条件不同而不同。它们是外周血液中互不相同的T细胞亚群。以T细胞形成玫瑰花的功能而划分的T细胞亚群,其表面标志如何,是一个非常有意义的问题。本文用几种白细胞单克隆抗体对上述三种T细胞进行了检查,发现T_(44)(相当于OKT_4),阳性细胞在Ts,T_R及Tarf中分別为17.74％,51.87％和37.9％;Leu2b(相当于OKT_8)阳性细胞在Ts、T_R、Tarf中分别为34.83％,     

抗人T细胞单克隆抗体的应用及应注意的几个问题

1979年,龚忠恕(P.C.kung)和Golds-tein等首次报道抗人T细胞单克隆抗体(McAb)OKT系列制备成功。其中,OKT3与大约70％正常人外周血单个核细胞(PBM)反应,识别全部T细胞;OKT4与40％～50％正常人PBM反应,识别诱导和辅助T细胞亚群(Ti/h);OKT8与20％～30％正常人PBM反应,识别杀伤抑制性T细胞亚群(Tc,s)。     

自体外周血造血干细胞移植后淋巴细胞亚群的恢复

目的探讨自体外周血造血干细胞移植(auto-PBSCT)后免疫重建的规律。方法测定血液肿瘤患者auto-PBSCT前后淋巴细胞各亚群的绝对值。结果部分亚群在移植前低于正常。移植后各细胞亚群恢复时间不同,其中NK细胞在6个月恢复;B细胞在9个月恢复正常。T细胞总数在9个月恢复正常,其中主要为CD3 CD8 细胞。CD3 CD4 细胞在18个月恢复,而CD4 CD28 细胞在2年内仍未恢复。CD3 CD8 细胞在移植后早期有所下降,在3个月时恢复并高于正常,至9个月时逐渐下降至正常。CD3 CD8 细胞的主要部分是免疫表型呈活化的T细胞,即CD8 HLA-DR 细胞和CD8 CD38 细胞。两者分别在1个月和3个月时高于正常,在9个月时恢复正常。结论血液肿瘤患者移植前即存在淋巴细胞亚群异常的前提下,移植后NK细胞最先恢复,其次为B细胞,T细胞各亚群中CD3 CD8 细胞恢复较早,其中主要为活化T细胞。     

应用T细胞亚群单抗对SLE和PSS患者免疫功能的初步探讨

系统性红斑狼疮(SLE)和系统性硬皮病(PSS)是二种病因不明的结缔组织病。现普遍认为其发病机理皆与免疫调节功能失调有关。本文应用T淋巴细胞亚群单克隆抗体(美国ORTHO药剂公司提供)检测19例SLE和19例PSS病人及20例正常对照的T_(11)细胞、Ts细胞、总T细胞及T_(11)/Ts(OKT_4/OKT_8)比值,以观察结缔组织病患者的免疫调节功能。     

骨髓增生异常综合征细胞及亚群的变化

应用单克隆抗体及绵羊红细胞E玫瑰花环形成实验对22例骨髓增生异常综合征(MDS)病人的外周血T细胞总数及亚群变化进行了测定,结果表明MDS病人总T细胞减低,辅助T细胞亦减低,OKT_4/OKT_8比例失调,提示MDS发病病因中存在由T细胞数量之间平衡失调而导致的造血异常。同时,我们测定了病人的免疫球蛋白定量,结果表明MDS病人组IgG和IgA均较正常人组低,可能与T细胞亚群变化有关。本文将对22例MDS病人用表面受体和单克隆抗体来确定的T淋巴细胞亚群及所测得的免疫球蛋白的结果分析讨论。     

头颈部恶性肿瘤患者外周血IL-2和T淋巴细胞亚群的分析

IL—2通过增强NK细胞和LAK细胞的活性,在肿瘤免疫中起着十分重要的作用;而机体免疫应答是十分复杂的。其中T_H细胞(OKT_4~ )和Ts细胞(OKT_(?)~ )及其比值(T_4/T_8)的动态平衡是决定机体免疫状态的重要环节。目前,对同一头颈部恶性肿瘤患者的外周血IL-2活性水平和T细胞亚群平行测定的研究尚未见报道,故本实验对此进行探讨。     

再生障碍性贫血和免疫关系的研究(文献综述)

<正> 近几年国内外学者对再生障碍性贫血(再障)患者机体免疫状态及免疫异常与发病的关系,以及免疫治疗等,进行了大量研究,取得了较大进展,现综述如下。 一、T淋巴细胞与再障:多数研究发现,再障患者外周血T淋巴细胞亚群异常,OKT_4及OKT_4/OKT_8比值降低,OKT_8升高,OKT_3的报道结果不一致。Gascon等认为再障患者多能干细胞受损,使淋巴祖细胞增殖分化障碍,淋巴细胞绝对值及OKT_4下     

T_H细胞亚类研究新进展

1968年人们认识了淋巴细胞的两个主要亚类—T淋巴细胞和B淋巴细胞。以后的研究进一步证明,可以根据表面标志的不同,将T细胞分成两个功能不同的亚群,即带Lyt-1和L3T4表面抗原的TH细胞和带Lyt-2表面抗原的Ts/TC细胞。然而T_H和Ts细胞仍然是不均一的细胞群,Ts细胞可以再分为Ts1、Ts2和Ts3亚群,而T_H细胞由于辅助B细胞的方式不同,以及对尼龙毛柱的粘附性不同等,也可以再分为T_(H1)和T_(H2)两个亚类。这方面的进展情况我们以前曾作过介绍。近些年来,由于T细胞克隆技术的发展,各种新淋巴因子(如IL-2,     

两个抗人胸腺细胞单克隆抗体的制备与鉴定

为了研究具有不同功能的淋巴细胞亚群在调节免疫和造血功能中的作用,并深入地对淋巴细胞白血病进行分类,我们用胸腺细胞免疫小鼠,制备抗人T淋巴细胞亚群单克隆抗体(McAb)。BALB/C小鼠免疫后的脾脏细胞,与P_3x63-Ag8.653骨髓瘤细胞系,在35%聚乙二醇存在下,用离心法融合,10天后用人胸腺细胞和扁桃体细胞,作间接免疫荧光试验进行鉴定。阳性孔细胞进行亚克隆至99%克隆生长孔呈阳性抗体反应为止。制备的腹水效价均在1:10,000以上。复苏后的杂交瘤细胞保持稳定产生抗体的能力。在一次融合实验中,获得17个有意义的McAb。按其反应特异性,可归为四组。其中一组中有2个McAb命名为HIT_(6-1)、HIT_(6-2),表现类似于OKT_6,具有抗胸腺