大蒜新素对巨细胞病毒感染小鼠脾细胞TGF-β1和IL-10的抑制作用

目的:研究大蒜新素对巨细胞病毒(CMV)感染鼠的免疫抑制性细胞因子TGF-β1和IL-10的影响,探讨大蒜新素的抗CMV机制。方法:建立非免疫抑制性鼠巨细胞病毒(MCMV)全身播散性感染小鼠模型;双抗体夹心ELISA法检测感染后1,3,7,14,28,45,60,75,90,120d正常对照组、病毒感染组和药物治疗组小鼠脾细胞培养上清中TGF-β1和IL-10水平的时序性变化。结果:MCMV感染后,TGF-β1和IL-10分泌均显著升高,并呈现出急慢性期两次高峰的特点。大蒜新素治疗对MCMV感染鼠各时间点TGF-β1水平均有下调作用,且对其急性期分泌高峰的抑制更明显。大蒜新素治疗对IL-10的急性期分泌高峰影响不明显,却显著下调慢性期IL-10的分泌高峰。结论:大蒜新素能显著抑制MCMV感染后TGF-β1和IL-10分泌,进而增强机体细胞免疫功能而有利于机体清除MCMV病毒,这可能是大蒜新素抗CMV的另一作用机制。     

啮齿类动物的巨细胞病毒感染模型

巨细胞病毒(Cytomegalovirus,CMV)属于疱疹病毒的一个亚科,包括人和其它哺乳动物的CMV,具有严格的种特异性。在人类,人巨细胞病毒(HCMV)感染相当普遍,其感染率在发展中国家可达90％以上,而发达国家也有40～45％。绝大多数表现为隐性感染,当某些条件促使潜伏感染病毒激活时,则可引起全身严重发病,甚至死亡。尤其是妊娠期妇女,病毒被激活可引起胎儿先天性感染,导致早产、死产、存活儿童遗留下永久性智力障碍和先天性畸形。这是优生优育工作中值得重视的问题。CMV的潜伏感染和激活、引起宿主免疫抑制等特点,是病毒学家和免疫学家极感兴趣的课题,正在积极从实验动物中寻找合适的CMV感染模型,以进一步阐明人CMV感染的发病机理、免疫和防治等问题。在啮齿类实验动物中,大鼠、小鼠、豚鼠和仓鼠等均有CMV的感染。作为HCMV感染模型,目前报     

小鼠巨细胞病毒

小鼠臣细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV)是最早分离并在细胞培养中增殖的一种巨细胞病毒(Smith,1954)。小鼠群中的 MCMV 感染,在急性感染时的发病过程、潜伏期,以及在免疫抑制、输血或组织移植后的激化过程等很多方面,都与人类的相应感染很相似(Hudson,1979;Jordan,1983;     

固相放射免疫法检测血清中抗CMV的IgG抗体

<正> 人巨细胞病毒(HCMV)是引起先天性缺陷如智力迟钝、听力障碍、眼睛失明、精神发育迟缓等的主要病因。据统计,巨细胞病毒(CMV)引起的先天畸形已远远超过风疹病毒。在正常人群中,CMV感染常为潜伏感染和亚临床感染,但CMV感染儿童时,可引起巨细胞病毒单核细胞增多症、肝炎和肺炎等;同时,在肾移植、白血病或癌症等忠者,经过长期免疫抑制治疗后,潜伏     

婴儿巨细胞病毒感染诊治进展

自1956年从组织培养中成功分离巨细胞病毒(CMV)以来，世界各地对巨细胞病毒感染进行了广泛而全面的研究。巨细胞病毒属疱疹病毒科，为DNA病毒。巨细胞病毒感染是人巨细胞病毒(HCMV)引起的人类感染性疾病。人巨细胞病毒在自然人群中感染非常普遍，大多为不显性和潜伏感染。在我国妇女，人巨细胞病毒感染率极高，潜伏在孕妇体内的人巨细胞病毒在妊娠期被激活，     

巨细胞病毒脑内感染小鼠听觉诱发电位的变化

目的 探讨脑内感染小鼠巨细胞病毒（murine cytomegalovirus,MCMV）后脑干听觉诱发电位（auditory brainstem response,ABR）的变化,以明确经脑内感染MCMV后小鼠ABR是否出现异常改变,从而验证经脑内感染MCMV能否建立巨细胞病毒（CMV）感染致听力损伤的动物模型,并在此基础上观察更昔洛韦对CMV感染致听力损伤的干预效果.方法 将24只新生小鼠按窝随机分成正常对照组、模型组、干预组3组,对照组经脑内注射无菌生理盐水10 μl,模型组与干预组经脑内接种TCID50为1×105 U/ml的MCMV病毒悬液10 μl,同时干预组在接种MCMV后第2天开始腹腔注射更昔洛韦60 mg/（kg·d）,连用2周.2周后在小鼠麻醉状态下应用脑干听觉诱发电位仪在电屏蔽装置中检测小鼠的ABR,并记录ABR的波形以及Ⅰ波的潜伏期、波幅.结果 模型组与正常对照组相比潜伏期延长、波幅降低（F=9.151,P=0.011;F=5.095,P=0.043）,更昔洛韦干预组与模型组相比潜伏期缩短、波幅升高（F=13.797,P=0.003;F=14.587,P=0.002）,差异有统计学意义.结论 经脑内感染MCMV可以引起小鼠ABR的异常改变,脑内感染MCMV可建立CMV感染致听力损伤的动物模型,婴幼儿CMV感染后早期应用更昔洛韦对CMV感染致听力损伤的进行性发展有一定的抑制作用.     

巨细胞病毒感染加重载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化

目的本研究以载脂蛋白E基因敲除(apolipoprotein-E knockout,apoE-/-)小鼠为研究对象,给予低剂量的小鼠巨细胞病毒(murine cytomegalovirus,MCMV),以期了解在模拟人体内潜伏感染状态下病毒对动脉粥样硬化形态学方面的影响,以及凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(lectin-like ox-LDL receptor-1,LOX-1)基因的表达变化,以探讨MCMV在动脉粥样硬化形成及发展过程中所起的作用。方法采用随机数字表法将32只高脂饮食apoE-/-小鼠随机分为2组,其中1组经腹腔感染MCMV,分别在感染后14周、18周和24周截取主动脉;另1组不感染MCMV。通过HE染色观察2组动物主动脉粥样硬化病变的面积、数目、分级和内膜/中膜比值,实时定量PCR(real-time PCR)检测动脉壁和唾液腺中的MCMV含量以及LOX-1基因表达量的变化。结果研究显示在慢性潜伏感染阶段,MCMV感染明显加重apoE-/-小鼠动脉粥样硬化病变面积;但随感染时间的延长,该作用逐步减弱。小鼠动脉壁中没有MCMV mRNA的表达。血浆MCMV抗体含量、唾液腺MCMV DNA含量和动脉粥样硬化病变程度没有相关性。感染后14周,病毒组LOX-1mRNA含量较对照组明显增高。结论在慢性潜伏感染阶段,MCMV感染可以明显加重apoE-/-小鼠主动脉AS病变,并使重度AS病变提前出现,但在血管壁局部并无MCMV活动性感染的证据。MCMV感染后可增加动脉壁LOX-1基因表达,LOX-1的高表达可能是MCMV加重动脉粥样硬化形成的途径之一。     

巨细胞病毒感染的诊断与鉴别诊断

巨细胞病毒感染,又名巨细胞涵体病或臣细胞病毒病(Cytomeg'alic Viral Disease,简称CVD),亦曾命名为唾液腺病毒病,是由巨细胞病毒(CMV)所引起的一种传染病。本病一度曾被认为仅在幼婴引起发病,成人常呈潜伏感染状态。但近年来发现当妊娠或机体免疫力削弱(如患白血病、恶性肿瘤、肾移植及心脏手术)时,或经多次输血以及长期应用免疫抑制药物,或罹患严重细菌及真菌感染的患者,均可使此种潜伏感染再度激活,加     

先天性巨细胞病毒感染误诊2例报告

自1956年从组织培养中成功分离人巨细胞病毒(Cytomegalovirus，CMV)以来，世界各地已对人类CMV感染进行了广泛而全面的研究。巨细胞病毒感染，是由人巨细胞病毒(CMV)引起的人类感染性疾病。属疱疹病毒类，具有潜伏——活动的生物学特征。CMV侵入人体后长期存在，可在人体细胞内引起病变，现在知道CMV不仅能使不同年龄人     

大蒜新素体内外抑制小鼠巨细胞病毒感染诱导的调节性T细胞扩增实验研究

目的 在体内外水平研究大蒜新素对小鼠巨细胞病毒 (murine cytomegalovirus, MCMV) 感染导致调节性 T 细胞 (regulatory T cells, Treg) 异常扩增的抑制作用。方法 72 只 MCMV 感染小鼠随机分为安慰剂组和大蒜新素治疗组;并设 72 只同期模拟感染小鼠为对照,随机分为模拟感染对照组和大蒜新素对照组。分别于大蒜新素处理后 1、7、14、28、60、120 d 处死小鼠,获得脾细胞待测。采用 Western blotting 法检测脾细胞中 Foxp3 的蛋白表达强度;流式细胞术分析 CD4+CD25+Foxp3+Treg 细胞在脾细胞中所占比率的变化。采用小鼠胚胎成纤维细胞对大蒜新素的最大耐受浓度处理 MCMV 感染的胚胎成纤维细胞 3 d 后,采用 Realtime PCR 法和 Western blotting 法分别检测 T 细胞中 Foxp3 mRNA 和蛋白的表达水平。结果 整体研究发现,大蒜新素对正常小鼠脾细胞中 Foxp3 蛋白表达和 Treg 细胞比率均无显著影响;但是在 MCMV 感染小鼠,大蒜新素可在感染慢性期显著减少 Foxp3 蛋白表达强度、降低调节性 T 细胞比率。体外细胞模型发现,最大耐受浓度的大蒜新素加入共培养体系后可部分拮抗 MCMV 诱导的 Foxp3 基因和蛋白表达上调。结论 大蒜新素在体内外均可显著纠正 MCMV 感染导致的 Treg 异常扩增。大蒜新素通过影响 Treg 增殖进而增强抗病毒免疫而有利于机体清除 CMV 病毒,可能是大蒜新素诱导抗 CMV 免疫的另一重要机制。     

灵长类巨细胞病毒慢性潜伏再激活诱导免疫衰老的研究进展

巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)免疫潜伏再激活可以诱导T细胞进而发生免疫衰老已成为衰老的公认机制之一。在免疫活性宿主体内,CMV一旦感染可在骨髓中静默潜伏,通过分化依赖性活化刺激进入循环传播,保持终生持续感染的能力。本文针对人类和非人灵长类CMV感染后免疫状况、免疫逃避机制以及与免疫衰老相关性等方面进行比较和综述,以期为今后免疫衰老模型构筑、疫苗研制和药物开发提供基础。     

大蒜新素对MCMV感染小鼠脾细胞Th1/Th2类细胞因子水平的影响

目的:探讨大蒜新素对鼠巨细胞病毒(MCMV)感染小鼠脾细胞Th1/Th2类细胞因子水平的影响及其抗MCMV作用机制.方法:复制小鼠巨细胞病毒感染模型,将模型小鼠随机分成大蒜新素治疗组和安慰剂组,于MCMV感染后48 h开始分别给予大蒜新素一般剂量(25 mg·kg-1/d)和等量9.0 g/L氯化钠注射液腹腔注射;另设大蒜新素处理组和空白对照组,不接种病毒,分别给予大蒜新素一般剂量(25 mg·kg-1/d)和等量9.0 g/L氯化钠注射液腹腔注射.用ELISA法检测小鼠脾细胞Th1类细胞因子IL-2、IFNγ和Th2类细胞因子IL-4,IL-10水平.结果:MCMV感染可导致BALB/c小鼠Th1类细胞因子IL-2表达明显下降(P《0.01),Th2类细胞因子IL-10表达显著增高(P《0.01).大蒜新素能诱导正常BALB/c小鼠和MCMV感染模型鼠脾细胞Th1类细胞因子IL-2和IFNγ的表达显著增加(P《0.01),Th2类细胞因子IL-10表达明显下降(P《0.01).结论:大蒜新素能显著上调正常和MCMV感染模型小鼠脾细胞 Th1类细胞因子IL-2和IFNγ的表达,并抑制Th2类细胞因子IL-10的表达,通过诱导和促进特异性Th1优势应答反应来发挥抗CMV效应.     

MCMV感染同种异型皮肤移植小鼠间质性肺炎模型的建立

目的 建立小鼠巨细胞病毒(MCMV)经鼻腔急性感染同种异型皮肤移植BALB/c小鼠间质性肺炎模型.方法 ① 25只供体C57BL/6雌鼠与100只受体BALB/c雌鼠背部皮肤移植后,每只小鼠腹腔注射环孢素A(CsA,12 mg/kg),连续14 d.② 移植受体小鼠随机分为5组,其中4组每只鼻腔接种30 μl不同剂量MCMV悬液(102、103、104、105 PFU/只),另一组为正常对照组,小鼠鼻腔接种原代小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)悬液30 μl/只.在接种后第5、9、14、21天处死小鼠,无菌取肺组织分别做HE染色、透射电镜、PCR、RT-PCR检测MCMV Smith毒株的即刻早期(IE)和晚期基因糖蛋白B(gB)基因转录产物,并进行原位杂交和免疫组织化学实验.结果 104、105 PFU实验组小鼠肺组织有局灶性的病理损害,并发现感染后第14天肺组织病理改变最明显;透射电镜检测到疱疹样病毒颗粒;PCR、RT-PCR检测实验组MCMV IE和gB基因及其转录产物均为阳性;两组原位杂交和免疫组织化学检测均可见肺间质上皮细胞中存在病毒核酸和蛋白;并在感染后的21 d内,105 PFU组小鼠相比对照组有明显的临床表现.结论 成功建立同种异型皮肤移植后MCMV急性感染所致的小鼠间质性肺炎模型.     

MCMV感染对小鼠脾细胞调节性T细胞比率和Th1/Th2转录因子T-bet/GATA-3表达的影响

目的 在整体水平研究小鼠巨细胞病毒(MCMV)急慢性感染对小鼠脾细胞中调节性T细胞(Treg)比率和Th1/Th2特异性转录因子T-bet/GATA-3蛋白表达的影响.方法 建立MCMV播散型感染模型,60只模型鼠分别于接种病毒后第1、3、7、14、28.45、60、75、90和120天各处死6只,分离脾细胞;另设60只正常小鼠作为模拟感染对照.流式细胞术检测Treg比率,Western印迹法检测T-bet/GATA-3蛋白表达水平.结果 Treg比率在急性感染末期(28 d)明显低于模拟感染对照组[(1.46±0.27)%vs(2.78±0.29)%,P<0.05];在感染慢性期持续表达上调,60 d时显著高于模拟感染对照组[(4.51±0.24)%vs (2.69±0.12)%,P<0.05].T-bet和GATA-3蛋白表达在感染后3 d分别增至(0.618±0.053)和(0.836±0.061),均显著高于模拟感染对照组水平[(0.205±0.026)和(0.398±0.022)];但是进入感染慢性期后均持续表达下调,在75、90和120 d时均明显低于模拟感染对照组水平.结论 感染急性期McMV上调T-bet和GATA-3的蛋白表达;感染慢性期McMV诱导Treg增殖活化,抑制Th1和Th2分化扩增,CMV诱导Treg扩增可能是其抑制宿主抗病毒免疫,导致慢性持续性感染的重要原因.     

小鼠睾丸巨细胞病毒感染对精子顶体反应与膜功能的影响

目的探讨小鼠睾丸巨细胞病毒(MCMV)感染对附睾尾部精子顶体反应与膜功能的影响。方法随机选择无MCMV感染史的BALB/c雄性小鼠48只作为实验组,睾丸直接接种MCMV,分别于感染后第1、2、4、6、9、14天处死小鼠,用地高辛标记的MCMVM83mRNA寡核苷酸探针对睾丸组织进行原位杂交,检测睾丸MCMV感染情况,同时取附睾尾部成熟精子进行精子顶体反应与精子膜低渗肿胀功能检测。另设平行对照组雄性小鼠30只(同法随机选择),睾丸接种不含MCMV的细胞培养液,其他处理方法同实验组。结果实验组48只雄性小鼠睾丸组织间质及(或)生精细胞中均出现原位杂交阳性信号。实验组精子顶体反应与膜功能在接种病毒后的第2天、第4天,精子顶体反应率(58%±9%、56%±9%)低于平行对照组(71%±6%、70%±7%)(P均<0.05),精子膜尾部低渗肿胀率(48%±9%、38%±8%)低于平行对照组(60%±7%、50%±4%)(P均<0.05)。结论小鼠睾丸MCMV感染模型成功建立。小鼠睾丸MCMV急性感染可导致精子顶体反应与膜功能的显著下降。     

胎盘感染小鼠巨细胞病毒后的病理学改变

目的:观察小鼠巨细胞病毒(MCMV)胎盘感染后胎盘病理学改变。方法:酶联免疫法(ELISA)筛选无MCMV感染史性成熟期雌性小鼠,雌雄同笼受孕后随机分为模型组和对照组,模型组孕龄12.5 d时经胎盘显微注射MCMV悬液,18.5 d时处死,观察胎盘组织标本病理改变;对照组胎盘注射细胞维持液。结果:模型组较对照组胎盘感染率高(P<0.05)。其胎盘细胞滋养细胞增生、合体细胞结节增生、纤维素样坏死等病理学变化,与对照组差异均有显著意义(P<0.05)。结论:胎盘感染MCMV后出现的病理改变可能在MCMV宫内感染进展中发挥重要作用。     

肝移植受者术后巨细胞病毒抗原血症的发生及其影响因素分析

巨细胞病毒（cytomegalvirus，CMV）感染正常人群后通常呈潜伏状态，当机体处于免疫功能受损或受抑制状态时，潜伏的CMV可能被激活。肝移植受体术后免疫系统功能大大低于正常人群，CMV易被激活而导致严重的CMV病，并与移植后急慢性排斥反应有关。监测移植术后CMV活动性感染的主要方法是测定外周血白细胞中是否出现CMVpp65抗原——即CMV抗原血症。借鉴骨髓移植、肾移植经验，肝移植受者术后定期、定量检测CMVpp65，并常规给予抗病毒药物预防而控制CMV感染。     

巨细胞病毒感染综合征

<正> 巨细胞病毒(CMV)分别由Rowe、Smi-th、Weller 于1956年从动物和人体内分离出来,后经国际会议命名为巨细胞包涵体病和巨细胞单核细胞增多症。经过各国学者的广泛研究和临床观察,认为CMV 是人类最常见的寄生性病毒之一。可使新生儿致命致畸,长期潜伏于人体的CMV,伺机复燃,临床表现变化多端,主要有肺炎和肝炎,在免疫抑制的情况下,死亡率尤高。病理和发病机理     

巨细胞病毒感染的检测及临床应用(综述)

临床工作中巨细胞病毒(CMV)感染问题已日益受到重视。CMV 被认为是能引起婴儿及免疫受抑制者发生严重疾病或伤残的致病因子。有关 CMV 感染的传播、诊断及预防在国内外均已有大量报道。血清学调查表明 CMV 感染在世界各地均有发生,不同地区其流行情况有差异。在发展中国家本病毒感染率较高,可达90%以上。儿童及成人感染 CMV 后常无症状,病毒可在体内长期潜伏,通过尿、乳汁、唾液、宫颈分泌物、精液等向体外持续或间歇性排出,免疫抑制者则可能发生严重疾病。孕妇发生原发性 CMV 感染或已有 CMV免疫力的孕妇发生复发性感染(潜伏性感染活化或再感染)均可引起胎儿宫内感染 CMV,即先天性感染。先     

免疫缺陷患者的巨细胞病毒性视网膜炎

机会感染与巨细胞病毒(CMV)视网膜炎:先天性CMV感染性疾病,以往成人发病者极为少见,但近年来,CMV感染性疾病的报告急剧增多。此种倾向与后天性艾滋病(AIDS)易感性宿主的增加相符。也就是说,多数人在达到成年人之前感染过CMV,但几乎都是不显性感染,处于潜伏感染状态。机体细胞性免疫功能对病毒的潜伏感染的持续情况甚为重要,AIDS、使用免疫抑制剂和抗癌剂等均可使宿主的免疫能力下降,潜伏在体内的CMV再次复活,产生CMV的机会感染。故而,AIDS患者