慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA含量和IL-12对其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子影响的相关性研究

目的：研究慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA含量对IL－12诱导其PBMC产生Th1/Th2类细胞因子协同效应的影响。方法：分离50例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞，分别与PHA（100μg/ml）、HBcAg（1μg/ml）、HBeAg（1μg/ml）单独或联合IL－12（10ng/ml）体外培养48h，ELISA法检测培养上清液细胞因子IL－2、IFN－γ、IL－10。荧光定量PCR检测患者血清DNA含量，并分成HBVBDNA小于10^3拷贝／ml、1063-10^5拷贝／ml、1065-10^7拷贝／ml、大于10^7拷贝/ml4组。结果：以HBVDAN小于10^3拷贝／ml组做对照组，比较发现无论抗原（PHA、HBcAg、HBeAg）单独诱导还是联合IL－12共同诱导，随着血清HBVDNA含量的增高，PBMC产生IL－2和IFN-γ水平逐渐降低，产生IL－5和IL－10水平逐渐升高，并且IL－12对PBMC产生IFN－γ的增殖效应逐渐减弱，特别是血清HBVDNA大于10^7拷贝／ml患者几乎无明显增殖效应。结论：高水平血清HBVDNA含量对IL－12诱导慢性乙型肝炎PBMC产生IFN－γ协同效应有抑制作用。     

IL-12对慢性乙型肝炎患者T_(H1)/T_(H2)分化的影响

目的观察 IL- 12对慢性乙肝患者 TH1 / TH2 类细胞分化的影响。方法分离 5 0例慢性乙型肝炎患者 PBMC,分别与植物血凝素 (PHA ,10 0μg/ m L )、HBc Ag(1μg/ m L )、HBe Ag(1μg/ m L )单独或联合 IL - 12 (10 ng/ m L )体外培养 48h,EL ISA法检测培养上清液中 IL - 2、IFN -γ、IL - 4、IL - 10水平。 2 0例健康人群做对照。结果 IL - 12对健康人群 PBMC产生 TH1 /TH2 类细胞因子无显著影响 ,但对慢性乙型肝炎患者则显著增强 PBMC产生 IFN-γ,且慢性中度患者最为突出。 IL - 12与HBe Ag联合诱导 ,不但显著增强慢性乙型肝炎患者 PBMC产生 IL- 2和 IFN- γ,还抑制 IL- 4和 IL- 10的产生。结论 IL- 12可增强慢性乙型肝炎患者 IFN-γ优势表达 ,可促进 HBe Ag诱导的 TH2 型优势表达向 TH1 型优势表达转换     

慢性乙型肝炎患者PBMC的IFN-γ和IL-10生成量及其与若干临床指标的关系

本文通过检测慢性乙型肝炎 (CHB )患者外周血单个核细胞 (PBMC )培养上清中IFN γ、IL 10含量 ,以探讨病毒定量、肝脏炎症病变程度及是否存在HBeAg等因素与细胞因子生成量之间的关系。取CHB患者和健康对照者PBMC ,分别加入特异性刺激剂rHBcAg和非特异刺激剂PHA ,培养 72h后收集上清 ,采用双抗体夹心法检测IL 10和IFN γ。结果表明rHBcAg刺激CHB患者生成的IFN γ与正常对照组无明显差异 ,IL 10较正常对照组高 (P <0 0 1)。病毒量明显影响IFN γ和IL 10的产生 ,IL 10的生成在高病毒量组较高 ,而IFN γ与此相反。按肝脏炎症活动程度分组发现 ,G4、G3组IL 10明显低于G1、G2组 ,但rHBcAg刺激产生的IFN γ在各组间无明显差异。HBeAg ( + )组较HBeAg ( )组生成的IL 10高 ,而IFN γ低。高病毒量、HBeAg抑制CHB患者IFN γ生成 ,而IL 10的生成相对增加 ,肝功能损害程度与IL 10明显负相关。     

SLE患者IFN-γ、IL-4及IL-12水平变化及意义

从Th1/Th2细胞代表性细胞因子IFN γ/IL 4和IL 12水平的变化分析SLE患者Th1/Th2细胞的偏移现象。本实验通过半定量PCR法和ELISA酶联免疫检测法检测上述三种细胞因子含量。实验结果显示 ,SLE患者IL 4/IFN γ基因水平比值为0 32 8,高于对照组 (0 0 7)。ELISA检测显示IL 12在SLE患者血清中为 (38 39± 15 1)pg/ml,低于对照组 (84 97± 13 7)pg/ml(P <0 0 5 )。结论 :SLE患者Th1/Th2细胞因子平衡失调 ,IL 4细胞因子基因水平增高 ,同时血清中IL 12水平降低。     

IL—12对慢性乙型肝炎患者TH2／TH2分化的影响

目的 观察IL-12对慢性乙肝患者TH1/TH2类细胞分化的影响。方法 分离50例慢性乙型肝炎患者PBMC,分别与植物血凝素（PHA,100ug/mL）、HBcAg(1ug/mL）、HBeAg(1ug/mL）单独或联合IL-12（10ng/mL）体外培养48h,ELISA法检测培养上清液 IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10水平。20例健康人群做对照。结果 IL-12对健康人群PBMC产生TH1/TH2类细胞因子无显著影响,但对慢性乙型肝炎患者则显著增强PBMC产生IFN-γ,且慢性中度患者最为突出。IL-12与HBeAg联合诱导,不但显著增强慢性乙型肝炎患者PBMC产生IL-12和IFN-γ,还抑制IL-4和IL-10的产生。结论 IL-12可增强慢性乙型肝炎患者IFN-γ优势表达,可促进HBeAg诱导的TH2型优势表达向TH1型优势表达转换。     

不明原因习惯性流产患者主动免疫治疗前后Th1/Th2型细胞因子水平的变化

为探讨主动免疫治疗对不明原因习惯性流产 (UHA )患者Th1/Th2型细胞因子水平的影响。采用酶联免疫吸附法检测15例正常非妊娠妇女、 35例UHA患者淋巴细胞主动免疫治疗前后经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC )培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果发现 :(1)在最佳诱导时间下 ,UHA组治疗前PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显低于正常对照组 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生IL 2、IFN γ的水平较治疗前明显降低 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平较治疗前明显升高 (P <0 0 5 )。UHA组治疗后PBMC产生各细胞因子的水平与正常对照组比较 ,差异均无显著性 (P >0 0 5 ) ;(2 )UHA组 35例患者主动免疫治疗后半年内 2 8例妊娠 ,其中 9例又出现自然流产。 9例自然流产者治疗后IL 2、IFN γ水平未明显下降 ,IL 10水平未明显上升。 19例妊娠成功者治疗后IL 2、IFN γ水平较治疗前明显下降 (P <0 0 5 ) ,IL 4、IL 10水平明显上升 (P <0 0 5 )。以上结果表明UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,主动免疫治疗有助于上调Th2型细胞因子及下调Th1型细胞因子 ,利于UHA患者妊娠成功。     

肺癌患者Th1/Th2状态及川芎嗪的调节作用

本研究采用RT PCR方法 ,以IFN γ和IL 2代表Th1型细胞因子 ,IL 4、IL 6、IL 10代表Th2型细胞因子 ,分别检测 3种肺癌细胞株 (鳞、腺、小细胞肺癌 )以及荷瘤机体外周血单个核细胞 (PBMC )Th1/Th2状态 ,并观察中药川芎嗪 (Tetram ethlpyrazine ,TTMP )的作用。结果显示 3种肺癌细胞株IFN γ和IL 2均无表达 ,而IL 4、IL 6、IL 10均表达 ;经川芎嗪培育后 ,3种肺癌细胞株均出现IFN γ的表达 ,而IL 4、IL 6的表达被抑制 ,小细胞肺癌株同时表达IL 2。肺癌患者PBMC中IL 4、IL 6和IL 10表达阳性率明显高于正常人 ,而IL 2无 1例表达 (0 / 2 3) ,IFN γ仅 1例表达 (1/ 2 3) ;与川芎嗪培养后 (两种浓度 ) ,肺癌患者IL 2 ,IFN γ的表达率明显提高 ;Th2型因子表达的优势状态较未加药组出现明显逆转。表明川芎嗪可促进肺癌细胞株和肺癌患者PBMC的Th2优势状态向Th1方向逆转     

呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿IL4/IFNγ水平变化及意义

为研究Th1/Th2类细胞因子 (CK )在呼吸道合胞病毒毛细支气管炎 (RSV毛支 )发病中的作用 ,本文采用酶联免疫吸附试验 ,对 2 0例RSV毛支患儿和 15例健康婴幼儿外周血单个核细胞 (PBMC )经植物血凝素 (PHA )刺激培养后 ,测定上清液中某些细胞因子 ,并同时检测患儿血浆总IgE水平。实验结果表明 :(1)经PHA刺激培养后 ,RSV毛支组上清液中IL 4,IFN γ水平及IL 4/IFN γ比值与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1、 0 0 5、 0 0 1)。RSV毛支组血浆总IgE水平较对照组明显升高 (P <0 0 1) ;(2 )相关分析 :培养上清液中IL 4水平 ,IL 4/IFN γ比值与血浆总IgE水平间呈显著正相关 ,IFN γ与IgE间呈显著负相关。此外IL 4与IFN γ间呈显著负相关。结果提示 ,RSV毛支患儿存在Th1/Th2功能紊乱 ,主要表现为Th2细胞功能亢进 ;IL 4、IFN γ参与了RSV感染时的免疫病理机制。     

不明原因习惯性流产患者Th1/Th2型细胞因子的检测

目的 :了解不明原因习惯性流产 (UHA)患者对滋养细胞抗原刺激产生Th1、Th2型细胞因子的水平 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取 5 4例UHA患者 ,35例为未妊娠者 ,为UHA未孕组 ,19例为有UHA病史 ,现在确定妊娠并难免流产者 ,为UHA难免流产组。分别选取 15例正常未孕妇女及正常妊娠者作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测未孕各组经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC)及妊娠各组PBMC与蜕膜单个核细胞 (DMC)培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果 :①在最佳诱导时间下 ,UHA未孕组PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常未孕组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平明显低于正常未孕组 (P均 <0 0 5 )。②UHA难免流产组PBMC及DMC产生的IL 2、IFN γ水平均明显高于正常妊娠组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平则明显低于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。两组PBMC产生的各细胞因子水平均低于同组DMC ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,导致妊娠丢失。     

克鼻敏汤对变应性鼻炎患者血清Th1、Th2细胞因子的影响

目的 :观察克鼻敏汤对变应性鼻炎 (AR)患者血清Th1、Th2细胞因子的影响 ,以探讨其治疗机制。方法 :6 0例AR患者随机分为克鼻敏汤治疗组 (TG)和辛芳鼻炎胶囊对照组 (CG)进行治疗 ;收集治疗前后空腹血清标本 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)对血清中Th1细胞因子IFN γ、IL 2、IL 12、和Th2细胞因子IL 4、IL 5、IL 10进行检测 ;并与健康对照组进行比较。结果 :AR患者血清IL 4、IL 5、IL 10等Th2细胞因子水平明显高于正常 ;而IFN γ、IL 2、IL 12等Th1细胞因子水平明显低于正常(P <0 0 1)。经克鼻敏汤治疗后血清IL 4、IL 5、IL 10等Th2细胞因子水平较治疗前明显下降 (P <0 0 1) ;IFN γ、IL 2、IL 12等Th1细胞因子水平较治疗前有明显增高 (P <0 0 5 )。而对照组无明显变化 (P >0 0 5 )。结论 :克鼻敏汤通过调节Th1和Th2细胞因子的表达 ,纠正失衡的Th1 Th2的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用     

IL-12和IL-18与Ⅰ型辅助T细胞应答

IL 12和IL 18具有许多类似的生物学活性 ,在诱导IFN γ和Th1反应的产生上两者相互协同。本文就IL 12和IL 18在诱生IFN γ和Th1反应中的作用作一综述。     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+T细胞细胞因子的检测

本文通过检测系统性红斑狼疮 (SLE )患者外周血中Th1和Th2分泌IFN γ、IL 2、IL 4细胞因子的表达情况 ,探讨Th1/Th2细胞因子水平与SLE的发病关系。采用流式细胞分析法对 4 1例SLE患者和 15例健康志愿者外周血中细胞因子(IFN γ、IL 2、IL 4 )在辅助性T细胞 (CD4 )内的表达进行检测。结果活动期SLE患者Th1细胞因子的表达率较正常人明显下降 (P <0 0 1)。SLE患者Th1细胞因子 (IFN γ、IL 2 )的表达与SLEDAI之间具有明显的负相关性 (P <0 0 5 )。活动期SLE患者Th1细胞因子的表达明显下降 ,SLE患者Th1细胞因子水平与SLEDAI之间呈负相关性     

Anti-CD86 mAb干预哮喘患儿PBMC后对其产生Th源细胞因子影响的研究

目的 :探讨Th源细胞因子和CD86在哮喘发病中的作用及CD86mAb治疗哮喘的临床潜在价值。方法 :随机选择哮喘急性发作期患儿 2 8例 ,男 18例 ,女 10例 ,年龄 1岁～ 8 0 8岁 ,平均年龄 (4 83± 1 99)岁 ;对照组 15例 ,男 7例 ,女 8例 ,年龄 3 2 5岁～ 10岁 ,平均年龄 (6 6 3± 1 91)岁。ELISA检测PHA刺激并用小鼠抗人CD86mAb干预PBMC(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)后其培养上清IL 4、IL 13、IFN γ水平。结果 :小鼠抗人CD86mAb(5× 10 - 3μg ml)干预PBMC后 ,正常组和哮喘组IL 4、IL 13和IFN γ水平均降低 ,与相应小鼠IgG对照组相比差异有显著性 ,而哮喘组IL 4和IL 13降低更明显。结论 :CD86mAb的阻断是非特异性的 ,即对Th1和Th2细胞均有一定的抑制作用 ,但对Th2细胞的抑制作用尤甚 ,说明CD86信号传导在哮喘的发生和发展过程中起重要作用。     

卡介菌多糖核酸和特异性免疫治疗对哮喘儿童免疫功能的影响

目的　研究卡介菌多糖核酸 (BCG PNA)和特异性免疫治疗 (SIT)对哮喘儿童IgE和细胞因子IL 4、IFN γ、IL 13、IL 12水平的影响。方法　用BCG PNA、SIT和两者联合治疗 36例哮喘儿童 ,治疗前后用酶联免疫吸附试验检测血清IgE和外周血单个核细胞产生细胞因子IL 4、IFN γ、IL 13、IL 12水平并分析其相互关系。结果　BCG PNA和SIT能明显改善哮喘儿童失衡的细胞因子网络 ,抑制IL 4、IL 13分泌 ,促进IFN γ、IL 12产生 ,降低血清IgE水平。 2种联合治疗对于降低IL 13、增高IFN γ有协同作用。结论　BCG PNA和SIT能增强Th1反应 ,降低Th2应答 ,调节Th1 Th2平衡     

IL-4、IL-12、IL-6/STAT/SOCS途径对Th细胞分化调节机制的研究进展

Th细胞分化为Th1和Th2细胞是受多种细胞因子调控的。已有研究资料表明 :IL 4、IL - 12和IL 6通过STAT/SOCS信号途径经对Th细胞的分化进行调节。IL 12 /STAT4 /SOCS3使CD4 + 和Th2向Th1分化和极化 ,IL 4 /STAT6 /SOCS1使Th0B向Th2分化。IL 6则通过STAT3可以上调CD4 + T细胞SOCS 1的表达 ,这是由于IL 6干扰IFN γ受体的信号转导 ,阻断了IFN γ对IFN γ基因的自我调节 ,因此实现了IL 6对Th1细胞的负性调控。据此认为IL 6启动CD4 + T细胞分化与抑制CD4 + T分化为Th1细胞是两种独立的分子机制 ,它在平衡Th1/Th2的免疫反应中起着重要的调节作用。     

消化道肿瘤患者Th1/Th2细胞的监测和分析

为观察肿瘤患者外周血Th1/Th2细胞数及其与肿瘤的相关性。Th1/Th2细胞的检测采用酶联免疫斑点法 (ELISPOT ) ,细胞因子的检测采用双抗体夹心ELISA法。结果胃癌患者Th1/Th2细胞比值降低 (P <0 0 5 )。经IL 12 +抗IL 4单抗处理组 ,Th1/Th2细胞比值升高 ;经IL 4 +抗IFN γ单抗处理组 ,Th1/Th2细胞比值降低 (P <0 0 5 )。胃癌、结直肠癌患者外周血中Th2细胞均占优势 ,其Th1型细胞因子IL 2和IFN γ与正常人相比显著降低 ;Th2型细胞因子IL 4、IL 6和IL 10与正常人相比显著升高 (P <0 0 5 ) ;同时 ,TNF α显著升高 (P <0 0 5 ) ;IL 12降低 ,其中结直肠癌患者与正常人比没有显著差异 (P >0 0 5 ) ,胃癌患者与正常人比有显著差异 (P <0 0 5 )。此外还发现随着肿瘤分化程度的降低 ,Th1型细胞因子的降低和Th2型细胞因子的升高更加明显 (P <0 0 5 )。肿瘤患者Th1/Th2细胞比值降低 ,同时 ,Th1型细胞因子降低 ,Th2型细胞因子升高。但在肿瘤的免疫治疗过程中 ,通过诱导IL 12等Th1型细胞因子的分泌 ,可促进细胞免疫应答 ,有助于疾病的治疗。     

IL-12、IL-2、PHA协同诱导狼疮肾炎患者PBMC增殖和合成Ig的研究

应用细胞培养技术 ,采用MTT和ELISA等方法 ,观察IL 12、IL 2、PHA体外协同诱导狼疮肾炎 (LN )活动期、静止期外周血单个核淋巴细胞 (PBMC )增殖和产生Ig自身抗体。结果表明 :与正常对照相比 ,IL 12与IL 2、PHA可明显刺激活动期、静止期PBMC增殖和产生大量IgG、IgM ,IgA无明显变化 ,且活动期强于静止期。单独应用IL 12对活动期PBMC作用最明显。提示 :IL 12可通过促进PBMC增殖产生大量自身抗体参与狼疮肾炎的发病。     

SLE患者外周血IFN-γ及IL-4细胞因子mRNA的表达研究

为利用实时监测定量PCR技术检测细胞因子mRNA的表达 ,从mRNA水平探讨IFN γ、IL 4mRNA的变化。对初诊SLE患者外周血IFN γ、IL 4的mRNA表达进行检测 ,并同时使用LPS及PHA作刺激剂研究其对SLE患者细胞因子mRNA表达的影响。结果是PHA刺激后 ,正常组IFN γmRNA的表达明显高于SLE组 (P =0 0 2 4 ) ;LPS对正常对照的IFN γ和IL 4的mRNA表达均能明显上调 ,但SLE患者仅表现为IFN γ升高 ,IL 4升高不明显 ;未刺激组SLE患者与正常对照的比较结果显示IFN γ的表达及IFN γ/IL 4有明显降低 (P =0 0 14 ,P =0 0 33)。故SLE患者与正常对照相比 ,IFN γmRNA的表达下降 ,同时SLE患者的IFN γ、IL 4mRNA表达对LPS及PHA的反应下降。由于不同的患者受累系统不同 ,临床表现不一 ,可能T细胞的异常并不相同 ,其免疫系统紊乱的机制也不一致     

HLA-DRB1*07与慢性乙肝患者Th1/Th2因子表达水平的相关性

目的 :探讨广东地区汉族慢性乙型肝炎患者HLA DRB1 0 7与Th1 Th2因子表达水平的相关性。方法 :收集 12 0例广东地区汉族慢性乙肝患者新鲜抗凝血各 8ml,通过序列特异性引物套式PCR(PCR SSP)方法进行HLA DRB1 0 7检测 ,并同时用双抗体夹心法检测患者治疗前后外周血CD4 +T细胞分泌IFN γ、IL 2、IL 10和IL 4的水平。结果 :12 0例慢性乙肝患者HLA DRB1 0 7携带者 31例 ,携带率为 2 5 8% ,明显高于广东地区汉族人群的平均携带率 7 84 % ;HLA DRB1 0 7阳性患者IFN γ平均表达水平为 (1132 0 4± 75 36 )pg ml,IL 2平均表达水平为 (1184 0 6± 81 4 2 )pg ml,IL 4平均表达水平为 (876 79± 4 7 5 3)pg ml,IL 10平均表达水平为 (817 4 8± 2 4 4 0 )pg ml ;HLA DRB1 0 7阴性患者IFN γ平均表达水平为 (12 32 10± 198 13)pg ml,IL 2平均表达水平为 (12 0 8 17± 116 12 )pg ml,IL 4平均表达水平为 (6 81 99± 6 1 5 9)pg ml,IL 10平均表达水平为 (6 38 84± 76 17)pg ml。HLA DRB1 0 7阳性患者IL 4、IL 10表达水平高于阴性患者 (P <0 0 5 ) ,而IFN γ、IL 2表达水平与阴性患者差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 :HLA DRB1 0 7(+)慢性乙肝患者Th2因子表达水平高于HLA DRB1 0 7(- )慢性乙肝患者。     

IFN-γ/IL-4对早孕期蜕膜细胞和绒毛滋养层细胞的体外影响

探讨Th1/Th2型细胞因子对人孕早期绒毛滋养层细胞和蜕膜细胞活性及其内分泌功能的影响。绒毛滋养层细胞和蜕膜细胞活性采用MTT法进行检测 ,绒毛组织分泌的人绒毛膜促性腺激素 (hCG )和蜕膜组织分泌的催乳素 (PRL )均采用放免法 (RIA )进行分析测定。结果 :(1)一定浓度范围的Th1型细胞因子IFN γ (10～ 10 0 0ng/ml)和Th2型细胞因子IL 4 (1～ 10ng/ml)对绒毛滋养层细胞活性及其hCG分泌分别有不同程度的抑制作用 (P <0 0 1)和促进作用 (P <0 0 1) ;(2 )Th1型细胞因子IFN γ低浓度时 (1～ 10ng/ml)对蜕膜细胞活性及PRL分泌有刺激作用 (P <0 0 5 ) ,高浓度时 (10 0～ 10 0 0ng/ml)则有抑制作用 (P <0 0 1) ,Th2型细胞因子IL 4对蜕膜上述功能的调节作用与对绒毛滋养层的调节作用相似。Th1/Th2型细胞因子可能是通过影响绒毛滋养层细胞和蜕膜细胞活性及其内分泌功能而在早期妊娠中起重要的免疫调节作用