黄龙止咳口服液对咳嗽变异性哮喘模型小鼠的作用机制研究

[目的]探讨黄龙止咳口服液治疗咳嗽变异性哮喘的可能作用机制。[方法]将50只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组、黄龙止咳口服液低、高剂量组,每组10只。采用卵蛋白、氢氧化铝腹腔注射致敏并吸入卵蛋白激发法建立咳嗽变异性哮喘小鼠模型,黄龙止咳口服液组分别以0.75 g/kg和1.5 g/kg进行灌胃,每日1次,持续14 d后处死小鼠。采集血清,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清总免疫球蛋白E(IgE)及白细胞介素(IL)-4、IL-5、IL-13的含量;分离小鼠肺组织,苏木精-伊红(HE)染色后观察肺组织形态;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测肺组织中Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子(My D88)及核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白表达量。[结果]与正常组比较,模型组血清中各炎症细胞及IgE、IL-4、IL-5、IL-13含量均明显增高,肺组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达增高,差异有统计学意义(P0.01)。与模型组比较,地塞米松组、黄龙止咳口服液低剂量组和高剂量组病理切片表现均有所改善,血清中各炎症细胞及炎症因子含量、肺组织中TLR4、MyD88和NF-κB蛋白表达均降低(P0.01)。[结论]黄龙止咳口服液能改善咳嗽变异性哮喘模型小鼠气道炎症及气道高反应性,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。     

γ-干扰素对哮喘小鼠血清白细胞介素-4和免疫球蛋白E水平的影响

目的研究γ-干扰素治疗对哮喘小鼠血清IL-4及IgE水平的影响。方法30只小鼠随机分为三组,即以10只健康小鼠为对照组,制备20只小鼠哮喘模型,分为治疗组和哮喘组。治疗组使用γ-干扰素治疗,哮喘组未予治疗。用ELISA双抗体夹心法测定三组小鼠血清IL-4、IgE水平,并行相关分析。结果与对照组相比,哮喘组血清IL-4、IgE水平高,其差异均有统计学意义（P〈0.05）;经γ-干扰素治疗后,治疗组血清IL-4、IgE检测值明显低于哮喘组水平,差异均有统计学意义（P〈0.05）;治疗组治疗后IL-4和IgE水平与对照组水平差异无统计学意义（P〈0.05）。结论γ-干扰素能有效降低哮喘小鼠血清IL-4和IgE水平。     

哮喘与白细胞介素-4和γ-干扰素的关系

支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞在气道内浸润,伴有气道上皮细胞脱落以及气道高反应为特征的慢性炎症疾病。细胞因子在慢性炎症的发展以及迟发型超敏反应过程中起重要作用。细胞因子（CK）网络失衡可能是哮喘发病的分子生物学基础之一。最近资料表明,哮喘发病时IL－4、IL－5、IL－8、IFN－α、IL－10、与可溶性粘分子均升高,而γ干扰素（IFN－γ）,IL－2等均有降低,IL－4,IFN－γ和IgE的水平升高有直接关系。而哮喘发病的一个重要特征是血清中IgE增高,而IL－4、IFN－γ是哮喘患者血清中IgE浓度的一对重要调节因子,对B细胞合成IgE有上调与下调两方面的作用,并且IL－4、IFN－γ与TH1与TH2的分化及其细胞因子网络中居重要地位。     

肺炎支原体感染对小鼠干扰素γ和白细胞介素-4的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对小鼠干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的影响,研究MP感染Th1/Th2免疫应答状况。方法 60只小鼠随机分为实验组与对照组,每组30只。实验组建立MP感染小鼠模型,对照组小鼠滴鼻吸入等量磷酸盐缓冲液,分别在3、5、7、14、21 d取小鼠肺组织,测量肺指数及肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-4水平。结果 2组小鼠不同时间点肺指数比较差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组小鼠3 d时肺泡灌洗液中IFN-γ水平较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠3、5、7 d肺泡灌洗液中IL-4水平与对照组比较均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2组小鼠3、5、7 d时IFN-γ/IL-4比值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MP感染后以Th2介导的免疫反应为主,IFN-γ/IL-4失衡是MP感染发病的危险因素之一。     

急性哮喘患者血浆白细胞介素-18、白细胞介素-16、白细胞介素-4及γ干扰素水平的相关性研究及临床意义

目的探讨急性哮喘患者血浆白细胞介素18(IL18)、IL16、IL4及γ干扰素(IFNγ)水平的相关性及临床意义。方法急性发作期哮喘患者共60例(重度30例,中度30例),正常对照30例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(SELISA),检测血浆IL18、IL16、IL4及IFNγ水平。结果哮喘患者血浆IL16水平显著降低,正常对照组血浆IL16较中、重度哮喘组高3倍以上(P<005);IL18水平降低,但仅中度哮喘组与正常对照组相比有显著性差异(P=0015);IL4水平降低(P=0006),中、重度哮喘组与正常对照组相比,P值分别为0045和0043;IFNγ水平与正常对照组比较无显著性差异(P>005)。相关性分析表明IL18与IL16之间存在显著相关性(r=065,P<005),IFNγ与IL16之间也存在显著相关性(r=066,P<005),IFNγ与单核细胞计数存在相关性(r=039,P<005)。结论IL18、IL16、IL4和IFNγ均可能参与了哮喘病理生理过程,多年反复发作的中、重度发作期哮喘患者可无明显的Th1与Th2细胞因子失衡现象。     

孟鲁司特联合糖皮质激素对咳嗽变异性哮喘患儿血清白细胞介素-12、白细胞介素-13的影响

目的探讨孟鲁司特联合糖皮质激素对咳嗽变异性哮喘患儿血清白细胞介素12（IL-12）、白细胞介素13（IL-13）的影响。方法将90例咳嗽变异性哮喘患儿随机分为两组,对照组40例,治疗组50例;对照组采用糖皮质激素治疗,治疗组在糖皮质激素治疗的基础上加用孟鲁司特,1次／晚。比较咳嗽缓解时间、咳嗽消失时间、血清IL-12和IL-13。结果90例患儿完成研究资料,治疗组的咳嗽缓解时间和咳嗽消失时间明显少于对照组（P〈0．05）。两组治疗后血清IL-12、IL-13及IL-12／IL-13均有明显改善,治疗组优于对照组。结论孟鲁司特联合糖皮质激素可以改善咳嗽变异性哮喘患儿的病情,改善IL—12／IL-13的平衡。     

平喘方对哮喘模型小鼠肺组织炎症及γ干扰素和白细胞介素4的影响

目的：研究1型辅助性T细胞（T helper1）/Th2（Th1/Th2）相关因子γ干扰素（interferon-γ,IFN-γ）和白细胞介素4（interleukin-4,IL-4）在哮喘模型小鼠气道炎症进展过程中的改变以及中药平喘方对其的影响,探讨平喘方对支气管哮喘防治作用的机制。方法：80只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松组及平喘方组,20只/组。除空白对照组外,其余大鼠采用卵清白蛋白致敏、激发诱导支气管哮喘,并均于致敏2周后开始灌胃,1次/d,共4周。于激发7d后和激发后2周分批处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液（bronchoalveo larlavage fluid,BALF）和肺组织。经苏木精和伊红染色、胶原染色检测肺组织病理学改变,并进行胶原染色图像分析;酶联免疫吸附测定法检测BALF中IFN-γ及IL-4水平。结果：激发7d后：与空白对照组比较,模型组BALF中IFN-γ水平明显降低,IL-4水平明显升高;与模型组比较,两治疗组IL-4水平均明显降低,IFN-γ/IL-4比值均明显升高;两治疗组间IFN-γ、IL-4水平和IFN-γ/IL-4比值比较,差异均无统计学意义。激发后2周：与空白对照组比较,模型组IFN-γ水平明显降低,而IL-4水平明显升高,IFN-γ/IL-4比值明显降低;与模型组比较,两治疗组的IL-4水平明显降低,IFN-γ/IL-4比值明显升高,且平喘方组IFN-γ水平明显升高;两治疗组间IFN-γ、IL-4水平及IFN-γ/IL-4比值比较,差异均无统计学意义。哮喘激发7d后及激发后2周,模型组肺组织胶原染色面积、面积与光密度乘积均较空白对照组明显增加;两治疗组细支气管壁上胶原纤维沉积较模型组明显减少,胶原染色面积与光密度乘积亦较模型组明显降低;两治疗组间胶原染色面积、面积与光密度乘积比较,差异均无统计学意义。结论：平喘方可调节哮喘模型小鼠IFN-γ、IL-4水平,改善气道炎症,抑制气道重建,疗效与地塞米松相近。     

白细胞介素4和干扰素γ及转化生长因子β_1在支气管哮喘发病机制中的研究进展

支气管哮喘是由多种细胞和细胞因子参与的肺部慢性炎症性疾病,其发病机制尚未完全清楚。现在认为Th1/Th2比例和功能失衡是支气管哮喘的主要免疫学发病机制之一,其中白细胞介素4和干扰素γ在支气管哮喘的发病过程中起着重要作用,并与哮喘的严重程度相关。呼吸道重构是支气管哮喘的重要病理特征之一,是呼吸道炎症反复损伤和修复的结果,转化生长因子β1通过多种途径参与支气管哮喘呼吸道炎症和呼吸道重构。     

γ干扰素后期干预对大鼠肺纤维化影响

目的：观察γ干扰素（IFN-γ）对博莱霉素（BLM）诱导的肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、IFN-γ和白细胞介素10（IL—10）的变化，探讨IFN-γ可能的调节作用。方法：将大鼠随机分为正常对照组、BLM组和IFN-γ组。一次性气管内注入BLM造模后，于第15d开始给药，分别于第17、21和28d处死，对苏木精-伊红染色（H-E）病理结果行半定量分析；用酶联免疫吸附实验（ELISA）测定BALF中TNF-α、IFN-γ和IL-10的含量；用消化法测定肺组织中羟脯氨酸含量。结果：①IFN-γ组和BLM组于造模后第17d起肺泡炎症和肺纤维化的程度及羟脯氨酸含量显著重于正常对照组（P〈0．01）；②IFN-γ组BALF中TNF-α含量于造模后第17d起显著高于正常对照组和BLM组（P〈0．01）；IFN-γ于造模后第21和28d显著高于其余两组（P〈0．05）；IL-10于造模后第17d显著高于对照组（P〈0．01）。结论：IFN-γ在BLM致大鼠肺纤维化的形成阶段增加BALF中的TNF-α、IFN-γ和IL-10含量，对肺纤维化无明显改善作用。     

哮喘小鼠肺泡灌洗液中白细胞介素-17含量变化

目的 探讨哮喘小鼠肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF）中白细胞介素-17（IL-17）含量的变化.方法 将64只BALB/c小鼠分为正常组32只,哮喘组32只,两组分别于造模后第3、7、14、21天取小鼠肺泡灌洗液,每次8只.应用HE染色法观察哮喘组及正常组各时间点小鼠肺组织情况.应用ELISA法检测小鼠BALF中IL-17的含量.结果 哮喘组的肺组织炎症反应较同期正常小鼠明显,哮喘组较正常组BALF中IL-17含量有显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）.哮喘组第7天小鼠BALF中IL-17含量达到高峰,同期小鼠肺组织HE染色炎症亦最明显.结论 哮喘组小鼠BALF中IL-17含量升高,且在造模后第7天达到高峰.IL-17可能是参与支气管哮喘急性发作的主要细胞因子之一.     

螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素-4和干扰素-γ水平的影响

目的 :观察螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素 - 4 (IL- γ)和干扰素 - γ(IFN- γ)的影响 ,以探讨其治疗机制。方法 :用卵清蛋白致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型 ,口服螺旋藻治疗 ,观察其行为学差异 ;用组织病理学方法观察鼻黏膜改变 ;用酶联免疫吸附法 (EL ISA)对血清中 IL - 4和 IFN-γ进行检测。结果 :行为学得分 ,阳性对照组 (7.8± 1.0 3)明显高于实验组 (1.6± 1.35 )和正常对照组 (0 ) ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;实验组鼻黏膜炎性反应明显轻于阳性对照组 ,实验组 IFN-γ水平明显高于阳性对照组 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,实验组 IL - 4水平明显低于阳性对照组 ,差异有极显著性意义 (P<0 .0 1)。结论 :螺旋藻通过调节 IFN-γ和 IL - 4的表达 ,纠正失衡的 Th1 / Th2 的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用。     

螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素-4和干扰素-γ水平的影响

目的:观察螺旋藻对实验性变应性鼻炎大鼠血清白细胞介素-4(IL-γ)和干扰素-γ(IFN-γ)的影响,以探讨其治疗机制.方法:用卵清蛋白致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型,口服螺旋藻治疗,观察其行为学差异;用组织病理学方法观察鼻黏膜改变;用酶联免疫吸附法(ELISA)对血清中IL-4和IFN-γ进行检测.结果:行为学得分,阳性对照组(7.8±1.03)明显高于实验组(1.6±1.35)和正常对照组(0),差异有显著性(P<0.01);实验组鼻黏膜炎性反应明显轻于阳性对照组,实验组IFN-γ水平明显高于阳性对照组,差异有显著性(P<0.01),实验组IL-4水平明显低于阳性对照组,差异有极显著性意义(P<0.01).结论:螺旋藻通过调节IFN-γ和IL-4的表达,纠正失衡的Th1/Th2的细胞因子网络而对变应性鼻炎产生治疗作用.     

阿托伐他汀对心力衰竭患者干扰素γ和白细胞介素4的影响

目的:探讨阿托伐他汀在心力衰竭治疗中对心衰患者干扰素γ和白细胞介素4的影响。方法:39例慢性心力衰竭患者随机分为常规治疗组和常规治疗组加阿托伐他汀治疗组。测定治疗前后患者外周血CD4+细胞内细胞因子及血清中干扰素γ和白细胞介素4水平。结果:治疗8周后常规治疗组IFNγ明显高于阿托伐他汀治疗组,而IL-4则相反。常规治疗组治疗前后IFNγ/IL-4比值降低幅度明显低于阿托伐他汀治疗组。结论:阿托伐他汀能够升高心衰患者IL-4水平和降低IFNγ水平。     

支气管哮喘患者白细胞介素4和白细胞介素13测定的临床意义

目的:探讨血清中白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素13(IL-13)在支气管哮喘发病中的作用.方法:本研究对临床确诊的支气管哮喘46例,与正常对照组46例,分别抽取血清采用 ELISA 法测定其 IL-4、IL-13的含量.结果:支气管哮喘急性发作期病人和对照组正常人血清中的 IL-4水平分别为(460.84±27.11)和(132.97±24.66) ng/L,二组经 t 检验后 P＜0.001.两组 IL-13 的水平分别为(23.76±5.44)和(12.61±2.49) ng/L,二组经 t 检验后 P＜0.001.结论:哮喘病人 IL-4、IL-13 明显高于对照组,提示 IL-4、IL-13 对哮喘发病有一定的调控作用,对支气管哮喘气道非特异性炎症和局部免疫反应起重要作用.     

白细胞介素-10和γ-干扰素在支气管哮喘发病中作用的研究

目的探讨IL－10和IFN－γ在支气管哮喘发病中的作用。方法采用酶联免疫法测定50例急性发作期哮喘病人、50例缓解期哮喘病人以及48例正常受试者血清中IL－10和IFN－γ的含量,采用放射免疫法测定血清中IgE含量．结果急性发作期哮喘病人血清IL－10、IFN－γ水平（13．3±105pg／ml;0.32±0.13IU／ml）明显低于正常对照组（18.5±9.4pg／ml;0.51±0.12IU／ml;P＜0.01）。IgE水平在发作用哮喘病人（178.8±90.2IU／ml）明显高于正常对照组（87.8±30.3IU／ml;P＜0.01）,而缓解期组的IL-10、IFN-γ和IgE水平与正常对照组无差异;发作期病人血清IL-10和IFN-γ水平与正IgE水平呈负相关（IL-10：r＝－0.4816,P＜0.01;IFN－γ：r＝－0.5125,P＜0.01）。结论IL-10和IFN-γ在哮喘的发病中可能起重要作用,我们可以试图通过增加IL－10和IFN－γ含量来治疗哮喘。     

白细胞介素18、白细胞介素12在小儿肺炎及支气管哮喘中的作用

[目的]探讨白细胞介素-18(IL-18)、白细胞介素-12(IL-12)在小儿肺炎及支气管哮喘急性发作的发病机制中的作用.[方法]研究病例来自我院2002年12月-2003年3月期住院或门诊治疗的小儿肺炎和哮喘急性发作患儿各30例,分为肺炎组和哮喘急性发作组,以及同期入托、入学体检的健康小儿30例为正常对照组,分别检测肺炎及哮喘急性发作患儿血清的IL-18、IL-12、白细胞介素-4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)等细胞因子的水平,分析其相互关系.[结果]肺炎患儿血清IL-18为(489±93)pg/L,较对照组升高;IL-12为(385±256)pg/L,较对照组升高;IL-4为(5.1±2.4)pg/L,较对照组降低;IFN-γ为(8.1±5.4)pg/L,较对照组升高.而哮喘急性发作患儿IL-18为(390±99)pg/L,较对照组升高;IL-12为(206±80)pg/L,较对照组降低;IL-4为(17.8±6.9)pg/L,较对照组升高;IFN-γ为(2.0±0.8)pg/L,较对照组下降.[结论]IL-18、IL-12参与了小儿肺炎及支气管哮喘急性发作的发病机制,IL-18可能在Th0细胞向T1、Th2细胞分化中起双向调节作用,在Th1/Th2细胞因子网络失衡的发病机制中起重要的调节作用.     

白细胞介素4和γ-干扰素在慢性荨麻疹发病中的作用

目的 研究T辅助细胞不同功能亚群在慢性荨麻疹发病机制中的作用.方法 采用Ficoil-hypaque密度梯度离心法,分离30例慢性荨麻疹患者外周血单一核细胞（PBMC）,检测PBMC体外培养在植物血清素（PHA）诱导后Th1类细胞因子,γ干扰素（Interferon-gamma,IFN-γ）和Th2类细胞因子,白细胞介素4（Interleukin-4,IL-4）的变化,并设立20例正常对照.结果 慢性荨麻疹患者组的PBMC在PHA诱导下产生IL-4水平明显高于正常对照组（P＜0.01）,而IFN-γ的诱导水平则低于正常对照组（P＜0.01）.结论 慢性荨麻疹患者外周血存在着Th细胞亚群分化失衡,这可能为慢性荨麻疹发病的重要机制之一.     

哮喘患者白细胞介素-10、γ-干扰素水平与IgE关系的研究

目的了解哮喘患者白细胞介素-10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)水平与IgE生成的关系.方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例哮喘患者和20例健康人外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中IL-10和IFN-γ的含量以及血浆中IL-10、IFN-γ和IgE的水平,并进行相关性研究.结果哮喘组PBMC培养上清液中IL-10与IFN-γ含量显著低于对照组(P<0.001,P<0.01).哮喘组血浆中IL-10、IFN-γ含量显著低于对照组(P<0.001,P<0.05),血浆IgE含量显著高于对照组(P<0.001).哮喘组患者血浆中IL-10、IFN-γ含量和IgE浓度呈负相关(r1=-0.31,r2=-0.50).结论IL-10、IFN-γ在哮喘患者IgE的产生过程中起抑制作用.     

布地奈德雾化吸入治疗老年哮喘的疗效及其对血清白细胞介素-2、白细胞介素-5和γ-干扰素水平的影响

目的探讨布地奈德雾化吸入治疗老年哮喘患者的疗效及其对血清白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-5(IL-5)和γ-干扰素(IFN-γ)的影响。方法老年哮喘患者166例分为观察组和对照组,每组83例。对照组患者给予吸氧、化痰、抗感染及静脉注射氨茶碱等对症治疗;观察组患者在此基础上给予布地奈德雾化吸入(布地奈德0.5 mg+2 m L生理盐水);比较2组患者治疗前后肺功能、血清IL-2、IL-5、IFN-γ水平及生活质量评分,并观察2组患者的不良反应。结果治疗后2组患者峰值呼气流速(PEF)、第1秒用力呼气量(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FEV1/FVC)及血清IL-2、IFN-γ水平均较治疗前升高(P<0.05),IL-5水平较治疗前降低(P<0.05);观察组患者治疗后PEF、FEV1、FEV1/FVC及血清IL-2、IFN-γ水平显著高于对照组(P<0.05),且IL-5水平显著低于对照组(P<0.05)。治疗后2组患者临床症状和生活质量评分较治疗前均显著降低(P<0.05),且观察组患者临床症状和生活质量评分显著低于对照组(P<0.05)。2组患者不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论雾化吸入布地奈德能够显著提高老年哮喘患者的肺功能,改善生活质量,这可能与布地奈德能调节Th1/Th2的平衡有关。