正交设计法优选土茯苓中落新妇苷及总黄酮的提取工艺

目的:研究超声法提取土茯苓中落新妇苷及总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用正交试验法研究落新妇苷和总黄酮的提取工艺,其中落新妇苷含量用HPLC法测定,总黄酮含量用紫外分光光度法测定。结果:土茯苓中落新妇苷最佳提取工艺为加入甲醇30mL,超声提取15min,超声3次。总黄酮的最佳提取工艺为料液比1∶50,加入50%乙醇,超声提取60min。结论:所建立的方法简便、准确、重复性好,可用于土茯苓药材中落新妇苷及总黄酮的含量测定及其质量控制。     

正交试验优选复方广金钱草颗粒的提取工艺

目的:优选复方广金钱草颗粒的提取工艺。方法:以夏佛塔苷、总黄酮提取量和干膏得率的综合评分为指标,通过正交试验考察加水量、提取时间及温度对复方广金钱草颗粒水提工艺的影响;以总多糖、总黄酮含量及除杂量的综合评分为指标,通过正交试验优选水提液的醇沉工艺;以干膏得率、总黄酮及23-乙酰泽泻醇B含量的综合得分为指标,通过正交试验优选复方广金钱草颗粒的醇提工艺。采用UPLC测定夏佛塔苷及23-乙酰泽泻醇B含量,流动相分别为甲醇-0.4%磷酸溶液(32∶68)和乙腈-水(73∶27);采用UV测定总黄酮和总多糖含量。结果:最佳水提工艺条件为加8倍量水回流提取3次,每次1.5 h;最佳醇沉工艺为醇沉浓度60%,初始密度1.0 g·mL-1,醇沉时间8 h;最佳醇提工艺为加8,6倍量60%乙醇提取2次,提取时间分别为1,0.5 h。结论:优选的提取工艺稳定可行,适用于复方广金钱草颗粒的工业生产。     

痛风泰颗粒水提工艺的优化

目的优化痛风泰颗粒水提工艺。方法以加水量、煎煮次数、煎煮时间为影响因素,落新妇苷、芍药苷含有量及干膏得率的综合评分为评价指标,层次分析(AHP)-客观权重赋权(CRITIC)混合加权法计算综合权重系数,正交试验优化提取工艺。结果最佳条件为加8倍量水提取3次,每次1 h,落新妇苷、芍药苷含有量分别为2.97、2.63 mg/g,干膏得率30.12%,综合评分90.10。结论该工艺稳定可行,可用于水提痛风泰颗粒。     

响应面法优选黄芪提取工艺

目的:响应面法优选黄芪的渗漉提取工艺.方法:采用三因素三水平Box-Behnken试验设计,以乙醇体积分数、流速、乙醇用量为自变量,黄芪甲苷提取率为因变量,HPLC-ELSD测定黄芪甲苷含量,通过对自变量各水平的多元回归及二项式拟合,用响应面法优选乙醇渗漉提取工艺,并进行预测分析.结果:最佳提取工艺条件为30％乙醇,流速1.9 mL·min-1.cm-2,乙醇用量为药材量6.5倍.在此条件下,黄芪甲苷提取率理论值1.50 mg·g-1,实测值1.487 mg·g-1,说明该优选工艺模型拟合度良好.结论:Box-Behnken试验设计可用于黄芪渗漉提取工艺的优选,该优选工艺简便、稳定.     

Box-Behnken效应面法优化白芍配方颗粒提取工艺

目的:优选白芍配方颗粒中白芍总苷提取的工艺条件。方法:采用单因素试验结合Box-Behnken效应面法,以白芍总苷提取量为指标进行试验,考察加水量、提取时间、提取温度、提取次数、浸泡时间等因素对提取工艺的影响。结果:优选出水提白芍总苷的最佳工艺为:浸泡98.4 min,加12倍量水,煎煮提取2次,每次69.8 min。白芍总苷的提取率为2.387 1%。结论:Box-Behnken试验设计法用于白芍配方颗粒提取工艺的优选是可行的,数学模型的预测值与试验观察值相符。     

正交试验法优选复方白芍肠康颗粒提取工艺

目的:优选复方白芍肠康颗粒提取工艺。方法:以芍药苷含量及干膏率为评价指标,通过正交试验考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对水提工艺的影响;以厚朴酚含量及干膏率为评价指标,通过正交试验考察乙醇提取分数、乙醇用量、提取时间和提取次数对醇提工艺的影响。采用HPLC测定芍药苷、厚朴酚的含量。结果:最佳水提工艺为10倍量水,提取2次,每次1.5 h;芍药苷提取量为24.28 mg·g~(-1),干膏率为34.05%;最佳醇提工艺为8倍量60%乙醇,提取2次,每次1.5 h;厚朴酚提取量为13.07 mg·g~(-1),干膏率为19.71%。结论:优选的提取工艺稳定可行,为复方白芍肠康颗粒的合理开发提供参考。     

金母颗粒提取工艺的优化

目的优化壮药金母颗粒提取工艺。方法对颗粒水提物、乙醇提取物进行抗炎(棉球肉芽肿)、抑菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌)实验以筛选提取溶剂,再以抑菌活性为指标确定其浓度。以乙醇体积分数、提取时间、乙醇用量为影响因素,落新妇苷、虎杖苷含有量及干膏率的总评"归一值"(OD)为评价指标,星点设计-效应面法优化提取工艺。结果乙醇提取物抗炎、抑菌活性均优于水提物(P0.01),其体积分数在50%～90%范围内均有抑菌活性,以60%作用最强。最佳条件为加热回流提取2次,第1次加10倍量60%乙醇,第2次加8倍量60%乙醇,每次45 min,OD值为0.769 1。结论以抗炎、抑菌活性为主要考核指标并结合星点设计-效应面法时,可用于提取金母颗粒,并能为其临床有效性提供保障。     

响应面法优化鹿衔草总黄酮的酶联半仿生法提取工艺

目的:优选鹿衔草中总黄酮的酶联半仿生法提取工艺.方法:以总黄酮提取率为指标,在单因素试验基础上,选取加酶量、料液比、酶解时间、提取时间、提取温度5个因素进行Box-Behnken中心组合设计,利用响应面法优选提取工艺.结果:优选的提取工艺为加酶量1.25 mg·g-1,料液比1∶65,酶解时间1.0h,提取时间1.75 h,提取温度85℃,总黄酮提取率达5.54％,与预测值5.68％较为接近.结论:采用响应面法优选的提取工艺合理可行,具有良好预测性.     

高效液相色谱法测定土茯苓药材中7种活性成分的含量

建立同时测定土茯苓中(-)-表儿茶素、5-O-咖啡酰基莽草酸、新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷含量的高效液相色谱法。采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温35℃,流动相为乙腈(B)-0.05%磷酸(A)梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长230 nm,对土茯苓、短柱肖菝葜、华肖菝葜药材进行分析。测定的84份土茯苓药材中(-)-表儿茶素、5-O-咖啡酰基莽草酸、新落新妇苷、落新妇苷、新异落新妇苷、异落新妇苷和黄杞苷的含量范围分别为trace~1.381,trace~9.913,trace~3.673,0.670 6~27.08,trace~1.181,trace~4.833,trace~2.754 mg·g-1。用建立的方法对土茯苓常见混淆品短柱肖菝葜、华肖菝葜进行分析,结果显示短柱肖菝葜、华肖菝葜药材中(-)-表儿茶素的含量范围分别为0.011 63~0.060 07 mg·g-1和0.015 83~0.085 85 mg·g-1;而其他6种成分均未检测到。该方法简便、准确,可作为土茯苓药材的质量控制方法。短柱肖菝葜和华肖菝葜的成分显著不同于土茯苓,不宜与土茯苓混用。     

Box-Behnken响应面法优选地芍苣冬颗粒提取工艺

目的:采用Box-Behnken响应面法优选地芍苣冬颗粒的提取工艺。方法:通过单因素试验考查浸泡时间、提取时间、加水倍数和提取次数对地芍苣冬颗粒中天麻素、芍药苷含量的影响。基于单因素的结果,应用BoxBehnken响应面法考察浸泡时间、提取时间、加水倍数3个因素对地芍苣冬颗粒中天麻素、芍药苷含量以及离体血管舒张率的影响,对结果进行二项式方程拟合,用响应面法预测最佳水提工艺。结果:二项式拟合方程预测性良好,理论预测值与实际值偏差较小。在最佳提取工艺条件(浸泡时间为1. 5 h,加10倍量水提取1 h,共提取2次)下,天麻素平均质量分数为0. 59 mg·g-1,芍药苷平均质量分数为6. 35 mg·g-1,平均离体血管舒张率为71. 03%。结论:此工艺稳定、方便,准确快速地优化地芍苣冬颗粒的提取工艺。     

土茯苓解重金属铅毒性物质基础的初步研究

目的 探究土茯苓解重金属铅毒性的活性物质.方法 以"总提取物-有效萃取部位-有效部位及有效成分"顺序逐一追踪解毒活性成分的研究思路,以急/慢性铅致小鼠毒性为动物模型,以铅含量、生化指标及组织形态学检测结果为指标,确认土茯苓解铅毒的活性部位.依据文献及前期化学研究基础,采用高效液相色谱(HPLC)法对活性部位进行主要成分...     

一测多评法测定贵州产切面红色土茯苓中3种活性成分的含量

目的:建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷及落新妇苷的一测多评分析方法,并验证该方法的可靠性和准确性。方法:以落新妇苷为内参物,通过方法学考察,建立贵州产切面红色土茯苓中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷对落新妇苷的相对校正因子,根据建立的相对校正因子计算22批药材中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷的含量,并比较外标工作曲线法、外标一点法与一测多评法的结果,验证一测多评法的准确性和科学性。结果:建立的5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷相对于落新妇苷的相对校正因子重复性和耐用性良好;一测多评法计算的22批贵州产切面红色土茯苓药材样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷含量与外标工作曲线法、外标一点法的含量测定结果无明显差异(RSD4.0%);样品含量分析结果表明样品中5-O-咖啡酰基莽草酸、黄杞苷和落新妇苷的含量差异较大,分别为0.106 3%~2.692%,0.031 29%~0.677 1%,0.581 2%~4.897%。结论:建立的一测多评法准确可靠,可用于贵州产切面红色土茯苓的多成分质量评价。     

银屑灵与土茯苓中落新妇苷大鼠体内的 药代动力学比较

目的:建立大鼠体内落新妇苷的SPE-HPLC分析方法,通过复方银屑灵与单味土茯苓中落新妇苷药代动力学参数的比较,探讨配伍对落新妇苷大鼠体内药代动力学行为的影响。方法:雄性SD大鼠分别灌胃银屑灵、土茯苓提取物后,于不同时间眼眶静脉丛采血,固相萃取(SPE)法处理。采用反相高效液相色谱法,以甲醇-乙腈-0.05%甲酸为流动相梯度洗脱;Phenomenex C18色谱柱,柱温24℃,流速0.8 mL.min-1。结果:落新妇苷在0.266～53.1 mg.L-1线性关系良好(r=0.996);提取回收率为79.0%～89.1%;用非隔室模型估算药物动力学参数t1/2,Cmax,AUC0-t,AUC0-∞,MRT,各参数具有统计学意义。结论:该法可用于落新妇苷的药代动力学研究;配伍可提高落新妇苷在大鼠体内的生物利用度。     

基于ITS2一级序列和二级结构对土茯苓及混伪品的鉴别研究

目的：使中药材土茯苓与其混伪品得到有效区分,确保土茯苓药材临床用药安全。方法：采用内转录间隔区2 (ITS2)一级序列联合二级结构信息鉴别土茯苓及其混伪品,收集土茯苓正品及混伪品30条ITS2序列,使用基于隐马尔可夫模型（hidden Markov model,HMM）的方法注释,采用MEGA 7.0比对序列,基于Kimura-2-Parameter模型计算种内、种间的遗传距离,并构建邻接法（neighbor-joining,NJ）系统发育树;通过ITS2 Database预测各品种的ITS2二级结构,利用4Sale软件进行二级结构的比对,运用ProfDistS软件基于距离法构建联合一级序列及其二级结构的剖面邻接（profile neighbor joining,PNJ）系统发育树。结果：土茯苓的平均ITS2序列长度为245 bp,平均碱基G+C占比为82.8%,各物种种间遗传距离均显著大于种内遗传距离,NJ系统发育树和PNJ系统发育树的物种分支关系基本一致,土茯苓与其各种混伪品均分别各自聚为一支,可以有效鉴别土茯苓正品与混伪品。结论：ITS2可以作为鉴定土茯苓及其混伪品的DNA条形码...     

效应面法优化枳术颗粒的提取工艺

目的: 优化枳术颗粒的提取工艺条件。 方法: 采用Box-Behnken效应面分析法,在单因素试验基础上,以辛弗林提取率为指标,考察加水量、提取时间、提取次数对枳术颗粒提取工艺的影响。 结果: 最佳提取条件为称取处方量药材,加490 mL水煎煮3次,每次115 min,辛弗林提取率达90.57%。 结论: Box-Behnken法适用于枳术颗粒提取工艺的优选,建立的数学模型预测值与实验观察值相符。     

星点设计-效应面法优化龙须藤提取工艺

目的：优选龙须藤的提取工艺。方法：以乙醇体积分数、液料比、提取时间为自变量,浸膏得率、3’,4’,5’,5,7-五甲氧基黄酮（黄酮1）和3’,4’-亚甲二氧基-5’,5,6,7-四甲氧基黄酮（黄酮2）含量的总评“归一值”为因变量,通过Design-Expert 7.0.0软件对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合,利用效应面法优选提取工艺并进行预测分析。采用HPLC测定黄酮1和黄酮2含量,色谱条件为流动相乙腈（A）-水（B）洗脱梯度（0~20 min,30%~40% A;20~36 min,40%~48% A）,检测波长324 nm。结果：二项式拟合的复合相关系数较高,总评“归一值”达0.995 6;最佳提取工艺为加14倍量45%乙醇提取2次,每次116 min;黄酮1和黄酮2的质量分数依次为0.046%,0.027%,浸膏得率21.21%。结论：利用星点设计-效应面法优化的龙须藤提取工艺稳定简便,具有良好的预测性。     

石榴叶总黄酮的提取工艺及抗氧化活性考察

目的:优化石榴叶总黄酮的提取工艺,并对其体外抗氧化活性进行评价,为该部位的开发提供参考。方法:在单因素试验基础上,选择乙醇体积分数、料液比、超声功率、超声时间为考察因素,石榴叶总黄酮提取率为评价指标,根据BoxBehnken设计原理,采用响应面法优化石榴叶总黄酮的提取工艺。通过DPPH和·OH的清除能力考察石榴叶总黄酮的体外抗氧化活性。结果:石榴叶总黄酮最佳超声提取工艺为乙醇体积分数59.8%,料液比1∶16.3,超声功率221 W,提取时间33.45 min;石榴叶总黄酮提取率0.433%,与理论值偏差很小。当样品质量浓度为0.6~1.0 g·L-1时,对DPPH和·OH清除率较高,与维生素C接近。结论:优选的提取工艺稳定可行、提取率高,石榴叶总黄酮抗氧化性能较强,为该部位的工业化生产提供参考。     

正交试验优选平唐复方的醇提工艺和水提工艺

目的:优选平唐复方醇提工艺和水提工艺。方法:选择提取时间、乙醇体积分数和乙醇用量为考察因素,以藁本内酯、桂皮醛、甲基丁香酚转移率及干膏得率的综合评分为指标,采用正交试验优选醇提工艺。选择浸泡时间、加水量和提取时间为考察因素,葛根素、阿魏酸转移率及干膏得率的综合评分为指标,通过正交试验优选水提工艺。结果:最佳醇提工艺为当归、桂枝和细辛药材加8,6倍量50%乙醇提取2次,每次0.5 h;藁本内酯、桂皮醛及甲基丁香酚转移率分别为72.8%,70.5%,82.3%,干膏得率27.8%。最佳水提工艺为醇提后的药渣与葛根药材浸泡30 min,加12倍量水提取3次,每次0.5 h;葛根素和阿魏酸转移率分别为60.28%和21.89%,干膏得率18.43%。结论:优选的提取工艺稳定可行,醇溶性和水溶性有效成分提取率高,为平唐复方的药效评价提供了实验依据。     

骨松健骨颗粒的提取工艺优选

目的: 优选骨松健骨颗粒的提取工艺。 方法: 采用正交试验法,以淫羊藿苷提取量和干膏得率为指标,考察加水量、煎煮时间、煎煮次数对提取工艺的影响。 结果: 最佳提取工艺为加10倍量水煎煮3次,每次1 h。 结论: 优选的工艺合理可行,提取效率高,适用于工业化生产。