一种灵敏的测定低浓度IgA的酶免疫分析法

IgA缺乏的患者体内会存有IgA抗体,在输血或应用免疫球蛋白后可引起免疫反应.必须使用低浓度IgA的血液成份才可避免。为此,血制品需经过洗涤并测定IgA浓度。本文作者介绍一种灵敏的测定低浓度IgA的酶免疫分析法(EIA)。检测样本为可疑IgA缺乏者血清、血浆制品,包括4％人白蛋白、20％人白蛋白、16％肌注免疫球蛋白和6％IgG溶液及洗涤红细胞和血小板上清液。     

胰岛素抗体对电化学发光免疫分析法测定血清胰岛素的影响

目的探讨胰岛素抗体（IA）对电化学发光免疫分析法（ECLIA）检测胰岛素的影响。方法放射免疫法检测糖尿病患者血清IA,IA结合率〈5%组10例,IA结合率≥5%组53例。聚乙二醇（PEG）沉淀法去除IA,Roche E lecsys 2010测定胰岛素浓度。结果IA结合率〈5%组和IA结合率5%-10%组PEG处理前后的胰岛素浓度、游离胰岛素/直接胰岛素比值、胰岛素浓度改变值差异均无统计学意义（P〉0.05）。IA结合率10%-20%、20%-30%、〉30%组PEG处理前后的胰岛素浓度、游离胰岛素/直接胰岛素比值、胰岛素浓度改变值差异有统计学意义（P〈0.05）。IA结合率〉10%时,IA结合率与游离胰岛素/直接胰岛素比值呈负相关（r=-0.729,P=0.000）,与胰岛素浓度的改变值呈正相关（r=0.821,P=0.000）。结论IA结合率≤10%时,IA对ECLIA测定血清胰岛素浓度没有影响。IA结合率〉10%时,IA使ECLIA测定胰岛素结果假性升高。     

胰岛素抗体对电化学发光免疫分析法测定血清胰岛素的影响

目的探讨胰岛素抗体(IA)对电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测胰岛素的影响。方法放射免疫法检测糖尿病患者血清IA,IA结合率<5%组10例,IA结合率≥5%组53例。聚乙二醇(PEG)沉淀法去除IA,Roche E lecsys 2010测定胰岛素浓度。结果IA结合率<5%组和IA结合率5%~10%组PEG处理前后的胰岛素浓度、游离胰岛素/直接胰岛素比值、胰岛素浓度改变值差异均无统计学意义(P>0.05)。IA结合率10%~20%、20%~30%、>30%组PEG处理前后的胰岛素浓度、游离胰岛素/直接胰岛素比值、胰岛素浓度改变值差异有统计学意义(P<0.05)。IA结合率>10%时,IA结合率与游离胰岛素/直接胰岛素比值呈负相关(r=-0.729,P=0.000),与胰岛素浓度的改变值呈正相关(r=0.821,P=0.000)。结论IA结合率≤10%时,IA对ECLIA测定血清胰岛素浓度没有影响。IA结合率>10%时,IA使ECLIA测定胰岛素结果假性升高。     

电化学发光免疫分析法与酶免疫分析法检测唾液皮质醇对比研究

唾液皮质醇（salivary cortisol,SC）已作为库欣综合征（Cushing’s syndrome,CS）的筛查指标之一^[1]。在国外Sc的检测方法主要是酶免疫分析法（enzyme immunoassay,EIA）、放射免疫分析法和串联质谱法,而电化学发光免疫分析法（ electrochemiluminescence immunoassay, ECLIA ）检测SC的研究报道还比较少见。     

增强化学发光酶免疫分析法建立及测定血清中的胃泌素

自1977年Halman第一次把化学发光与免疫测定结合起来后，化学发光免疫分析（CLIA）成为一种重要的检测手段。比传统的RIA和ELISA具有更多的优越性，如与RIA相比，没有放射性传染，不会对人体产生损害，操作方便等，与ELISA相比，具有灵敏度高，能较好定量及达到检测要求，然而由于不断研究结果表明，一般的化学发光体系（Luminol—H2O2-HRP）在应用于免疫分析中由于大分子空间位阻作用，灵敏度还是不够理想。     

电化学发光免疫分析法检测血清雌二醇的性能验证

目的 评估电化学发光免疫分析法(ECLIA)检测血清雌二醇(E2)的性能.方法 应用相关标准评价ECLIA检测E2的正确度、精密度、分析测量范围、临床可报告范围、功能灵敏度及生物参考区间.结果 5个批号质控品实测值与靶值的相对偏移均在可接受范围内(≤±25％),正确度验证通过.低水平质控品批内和批间变异系数(CV)分别...     

化学发光酶免疫分析法检测人血清中的铁蛋白

[目的]建立一种以辣根过氧化物酶标记铁蛋白单抗为标记物的化学发光免疫分析方法,用于检测血清样品中铁蛋白的水平。[方法]采用双抗体夹心法,将辣根过氧化物酶标记一株铁蛋白单克隆抗体,另一株铁蛋白单克隆抗体包被到不透明微孔板上,它们可以与血清样品中的铁蛋白抗原形成双抗体夹心复合物,洗涤后加入发光底物液,用发光分析仪进行检测。[结果]该方法的灵敏度为0．10ng／ml,批内变异为5．4％,批间变异为8．9％。[结论]利用此方法研制的试剂与进口试剂盒对796例血清样品进行测定,其相关系数为0．9063。表明该方法可应用于诊断试剂中,并且能够满足临床检测的要求。     

溶血对电化学发光免疫分析法测定胰岛素的干扰

目的探讨电化学发光免疫分析法(ECLIA)测定血浆胰岛素浓度时,标本溶血程度及溶血标本放置时间对测定结果的干扰。方法将检测标本人为干预成5种不同溶血程度的溶血标本,置于室温环境下,分5个时间段(15、30、60、120、180 min),分别用电化学发光免疫分析法测定各组标本的胰岛素浓度并作分析。结果溶血标本可使胰岛素浓度降低,标本溶血程度与溶血标本放置时间对胰岛素浓度测定均有影响,两者之间均呈负相关。结论在血标本的采集和分离时应尽可能避免溶血,临床工作中遇到溶血标本时,应在报告单上注明,并建议重新采血。     

溶血对电化学发光免疫分析法测定胰岛素的干扰

目的探讨电化学发光免疫分析法（ECLIA）测定血浆胰岛素浓度时,标本溶血程度及溶血标本放置时间对测定结果的干扰。方法将检测标本人为干预成5种不同溶血程度的溶血标本,置于室温环境下,分5个时间段（15、30、60、120、180 min）,分别用电化学发光免疫分析法测定各组标本的胰岛素浓度并作分析。结果溶血标本可使胰岛素浓度降低,标本溶血程度与溶血标本放置时间对胰岛素浓度测定均有影响,两者之间均呈负相关。结论在血标本的采集和分离时应尽可能避免溶血,临床工作中遇到溶血标本时,应在报告单上注明,并建议重新采血。     

酶联荧光分析法测定血清心肌肌钙蛋白Ⅰ

目的对酶联荧光分析法(ELFA)检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)进行方法学评价,并探讨其临床应用价值.方法系统研究ELFA法测定cTnI的精密度、灵敏度、线性范围、回收率、标准曲线的稳定性及干扰因素,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果相比较.同时应用ELFA法测定50名正常人、62例非心肌梗死患者及53例急性心肌梗死(AMI)患者的血清cTnI水平.结果ELFA法检测cTnI的总CV值为2.58%～4.82%,分析灵敏度为0.05μg/L,线性范围0.1～50μg/L,稀释标本的平均回收率为101.2%,标准曲线至少可稳定14d.ELFA法(Y)与ELISA法(X)具有良好的相关性(Y=0.983X-0.148,r=0.996).加入高浓度的胆红素、三酰甘油和血红蛋白对测定无显著性影响(P＞0.05).AMI患者血清cTnI[(18.6±4.8)ug/L]显著高于正常人[(0.068±0.014)μg/L]和非心肌梗死患者[(0.055±0.021)μg/L](P＜0.01);cTnI诊断AMI的阈值为0.8μg/L,诊断敏感度、特异度、准确度分别为91.4%、93.8%、92.9%,阳性和阴性拟然比分别为14.6和0.09.结论ELFA法操作简便、结果准确可靠、自动化程度高,且检测快速,具有较高的精密度;cTnI是敏感、特异的心肌标志蛋白,适合在临床工作中推广应用.     

酶联荧光分析法测定血清心肌肌钙蛋白I

目的对酶联荧光分析法(ELFA)检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)进行方法学评价,并探讨其临床应用价值。方法系统研究ELFA法测定cTnI的精密度、灵敏度、线性范围、回收率、标准曲线的稳定性及干扰因素,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果相比较。同时应用ELFA法测定50名正常人、62例非心肌梗死患者及53例急性心肌梗死(AMI)患者的血清cTnI水平。结果ELFA法检测cTnI的总CV值为2.58%～4.82%,分析灵敏度为0.05μg/L,线性范围0.1～50μg/L,稀释标本的平均回收率为101.2%,标准曲线至少可稳定14d。ELFA法(Y)与ELISA法(X)具有良好的相关性(Y=0.983X-0.148,r=0.996)。加入高浓度的胆红素、三酰甘油和血红蛋白对测定无显著性影响(P>0.05)。AMI患者血清cTnI[(18.6±4.8)μg/L]显著高于正常人[(0.068±0.014)μg/L]和非心肌梗死患者[(0.055±0.021)μg/L](P<0.01);cTnI诊断AMI的阈值为0.8μg/L,诊断敏感度、特异度、准确度分别为91.4%、93.8%、92.9%,阳性和阴性拟然比分别为14.6和0.09。结论ELFA法操作简便、结果准确可靠、自动化程度高,且检测快速,具有较高的精密度;cTnI是敏感、特异的心肌标志蛋白,适合在临床工作中推广应用。     

生物素-链霉亲和素酶免疫法PSA测定的评价

目的 评价生物素-链霉亲和素酶免疫分析法(BSA-ELISA)测定前列腺特异性抗原(PSA)并与化学，发光法(CLIA)进行比较。方法根据EP9-A文件要求采集数据，并以相应软件分析这两种方法的相关性；同时对BSA-ELISA的测定范围，变异系数(CV)，最小检测限进行测定。结果两种方法测定的结果具有较好的相关性。回归方程Y=0．985X-0．131，相关系数(r)=0．997。PSA的批内平均CV为2．21％，批间平均CV为3．08％。测定范围为1．50～85．00μg／L。最小检测限为0．30μg／L。结论采用全自动酶免疫分析仪的BSA-ELISA与CLIA自动分析仪测定PSA的相关性好，结果稳定，偏差小，可以在临床上常规应用。     

细菌荧光酶生物发光分析法测定血清γ—氨基丁酸

利用γ－氨基丁酸酶偶联细菌荧光生物发光系统建立血清γ－氨基丁酸的微量分析方法。血清首先用０．５ｍｏｌ／Ｌ三氯乙酸溶液沉淀蛋白，再与双酶注液混合，由全自动发光光度计记录发光峰值并计算结果。     

生物素-链霉亲和素酶免疫法PSA测定的评价

目的评价生物素-链霉亲和素酶免疫分析法(BSA-ELISA)测定前列腺特异性抗原(PSA)并与化学发光法(CLIA)进行比较.方法根据EP9-A文件要求采集数据,并以相应软件分析这两种方法的相关性;同时对BSA-ELISA 的测定范围,变异系数(CV),最小检测限进行测定.结果两种方法测定的结果具有较好的相关性,回归方程y=0.985X-0.131,相关系数(r)=0.997.PSA的批内平均CV为2.21%,批间平均CV为3.08%.测定范围为1.50～85.μg/L.最小检测限为0.30μg/L.结论采用全自动酶免疫分析仪的BSA-ELISA与CLIA自动分析仪测定PSA的相关性好,结果稳定,偏差小,可以在临床上常规应用.     

化学发光酶免疫分析法定量检测人血清层粘连蛋白

摘要：目的：建立检测人血清层粘连蛋白（LN）的化学发光酶免疫分析法(CEIA)。 方法：用3 μg/mL抗人LN单抗包被微孔板制成固相抗体,辣根过氧化物酶标记抗人LN单抗浓度为1∶2 000,建立检测人血清LN浓度的CEIA法。评价该法的线性范围、灵敏度、稳定性等性能指标;并与ELISA法检测LN进行比对;初步检测100例健康献血员血清LN水平。 结果：该法线性范围为22~1 635 ng/mL,灵敏度为12.2 ng/mL,批内、批间变异系数均＜10%,检测高、中、低值LN血清的回收率分别为00.9%、95.2%和105.0%;试剂在4 ℃和37 ℃条件下至少稳定7 d;健全性良好;与ELISA法检测LN结果差异无统计学意义（t=0.299,P>0.05）;100例健康献血员LN水平为（44.9±16.3） ng/mL。 结论：成功建立定量检测LN的CEIA法,该法性能较好,可用于临床检测。     

电化学发光测定低浓度乙肝病毒表面抗原的临床意义

低浓度乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）是指HBsAg的浓度小于5ng／mL。低HBsAg是判断乙型肝炎感染的重要依据之一;其在人群的感染性疾病诊断中已越来越引起临床实验室及流行病学专家的重视,低浓度HBsAg的检测与报告给临床实验室带来了新的挑战。     

化学发光免疫分析法测定血清CA-125的临床应用

为了探讨血清CA-125在临床肿瘤中的诊断价值,用化学发光免疫分析法测定盆腔良性肿瘤和各类恶性肿瘤以及正常对照者血清CA-125.结果显示:以68 U/ml为阳性预期值,各类肿瘤CA-125的阳性率分别为:盆腔良性肿瘤5.4%,肝癌38.8%,肺癌35.2%,结直肠癌31.8%,乳腺癌30.0%,子宫内膜癌50.0%,卵巢癌79.2%.以卵巢良性肿瘤与恶性肿瘤相比较,CA-125诊断卵巢癌的灵敏度为79.2%,特异性为93.0%,阴性预期值,阳性预期值分别为80.7%,91.8%.提示:CA-125对肿瘤的诊断缺乏特异性,但对卵巢癌的诊断有较高的特异性,有助于卵巢肿瘤的鉴别诊断.