超顺磁性纳米氧化铁颗粒标记胰腺癌细胞的MR分子成像

目的 探讨超顺磁性纳米氧化铁颗粒（SPION）靶向标记胰腺癌细胞（BxPC-3）行MR分子成像的可行性。方法 制备黏蛋白1（MUC1）靶向修饰的探针MUC1-SPION（靶向组）,并以牛血清蛋白（BSA）制备非靶向探针BSA-SPION（非靶向组）。采过噻唑蓝（MTT）法测试不同MUC1-SPION浓度下（铁浓度为0、6.25、12.50、25、50、100、200 μg/ml）的细胞毒性。并分别于铁浓度为50、100、200 μg/ml条件下,对靶向组及对照组与BxPC-3细胞共同孵育2 h后的细胞悬液进行MR成像,测定横向弛豫时间（T2）,计算T2强化率。以普鲁士蓝染色观察靶向探针与细胞结合情况。结果 MTT法细胞毒性实验显示,不同MUC1-SPION浓度下BXPC-3细胞增殖率差异无统计学意义（F=1.74,P=0.183）。铁浓度50、100、200 μg/ml条件下,2组间T2值和T2强化率的差异均有统计学意义（P均<0.05）。普鲁士蓝染色显示靶向组的蓝染颗粒更多。结论 MUC1-SPION对BxPC-3细胞具有良好的靶向性,以SPION靶向标记BxPC-3细胞进行MRI安全、可行。     

超顺磁性纳米颗粒治疗肿瘤的应用进展

背景,近年来纳米颗粒在肿瘤热疗、基因载体研究、靶向药物治疗等方面得到迅速发展,特别是纳米颗粒载药系统已成为肿瘤治疗的又一突破口.目的:对超顺磁性纳米颗粒在医学领域特别是肿瘤治疗方面的应用及其机制进行概述.方法:应用计算机检索Medline数据库(2000-01/2009-10),以"Superparamagnetic,Nanoparticles,Targeting"为检索词;应用计算机检索中国期刊网(CNKI)(2005-01/2009-10),万方数据库(2005-01/2009-10),以"磁性、纳米颗粒、靶向"为检索词.结果与结论:共收集123篇关于磁性纳米颗粒靶向作用的文献,中文24篇,英文108篇.排除发表时间较早、重复及类似研究,纳入30篇符合标准的文献.超顺磁性纳米颗粒是指具有磁响应性的纳米级粒子,其直径一般小于30 nm,当磁性纳米粒子的粒径小于其超顺磁性临界尺寸时,粒子进入超磁性状态.超顺磁性纳米颗粒除了通过血液循环进入炎症肿瘤相关部位外,还可被广泛存在于肝脏、脾脏、淋巴结的网状细胞-内皮吞噬系统(reticulo-eneothelial system,RES)的细胞所识别.研究发现经过表面修饰的载药纳米颗粒,可跨血脑屏障转运,其机制可能与血脑屏障的连接结构--毛细血管,其内皮细胞通过低密度脂蛋白介导的胞吞作用有关.目前合成生物相容性磁性纳米颗粒的方法有很多,但最常用的合成生物相容Fe3O4磁性纳米颗粒的方法为共沉淀法.超顺磁性纳米颗粒在外加磁场的作用下可具有靶向性,且四氧化三铁的晶体对细胞无毒,其作为基因载体及药物载体被广泛应用于医学研究,为肿瘤的治疗开辟了新的途径.但对于外置磁场,如何全面的避开内皮吞噬系统的吞噬,防止治疗过程中药物性血栓的生成等尚存在不足.     

磁性纳米颗粒在小鼠巨噬细胞体外MRI中的应用

目的探讨应用超微超顺磁性氧化铁纳米颗粒(ultra-micro superparamagnetic iron oxide nanoparticle,USPIO)标记小鼠巨噬细胞株RAW264.7的最适浓度以及比较MRI中不同扫描序列在细胞吞噬功能评价中的敏感度差别.材料与方法用终浓度为0、25、50、75、100、12...     

超顺磁性氧化铁纳米颗粒体外标记兔骨髓间充质干细胞的安全性以及MRI成像特征

背景：传统的干细胞标记方法常需要病理组织学等侵袭性手段检测,无法动态观察整个实验过程,也不适合临床研究。目的：观察超顺磁性氧化铁纳米颗粒体外标记对兔骨髓间充质干细胞生物学特性的影响以及标记兔骨髓间充质干细胞的体外MRI成像特征。方法：采用红细胞裂解贴壁法培养扩增兔骨髓间充质干细胞。采用不同浓度超顺磁性氧化铁纳米颗粒（100,50,25,12.5mg/L）联合多聚赖氨酸（0.75mg/L）标记兔骨髓间充质干细胞。对标记兔骨髓间充质干细胞进行MRI检测,观察其成像特征。结果与结论：25mg/L的超顺磁性氧化铁纳米颗粒联合0.75mg/L多聚赖氨酸标记兔骨髓间充质干细胞具有较好的安全性和有效性。此浓度对细胞的生长活性没有影响,不影响骨髓间充质干细胞的成骨成脂分化能力。MRI扫描在T2^＊WI序列上能明显有效地显像超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记的兔骨髓间充质干细胞。     

LyP-1标记超顺磁性氧化铁的制备及体外成像

目的 探讨LyP-1标记超顺磁性氧化铁(SPIO)与乳腺癌细胞结合进行体外成像的可行性。方法 以共沉淀法制备SPIO,用LyP-1与3-氨丙基三甲氧基硅烷(APTMS)包被的SPIO耦联,以乳腺癌MDA-MB-231细胞株为研究对象,设立LyP-1-SPIO组、竞争组、SPIO组和对照组,普鲁士蓝染色,评价不同组中铁颗粒在细胞中的分布情况,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞活性并观察其体外MR成像效果。结果 成功制备SPIO。 LyP-1-SPIO组有较多铁颗粒进入细胞内,竞争组和SPIO组仅有少量铁颗粒进入细胞中,对照组细胞中无铁颗粒。MTT比色法检测结果显示不同作用时间LyP-1-SPIO和SPIO对细胞的生长均无显著影响;体外MR成像提示LyP-1-SPIO能够显著增强阴性对比效果。结论 LyP-1-SPIO对MDA-MB-231细胞具有较好的靶向作用,可用于对肿瘤细胞的影像学诊断。     

超小超顺磁性氧化铁体外标记SD大鼠脂肪来源干细胞

  目的  评估超小超顺磁性氧化铁(ultrasmall superparamagnetic iron oxide, USPIO)标记SD大鼠脂肪来源干细胞(adipose derived stem cells, ADSCs)的有效性及安全性, 探讨标记细胞体外磁共振成像(magnetic resonance imaging, MRI)特点。  方法  将USPIO 40 μg/ml及多聚赖氨酸(poly-L-lysine, PLL)1.5 μg/ml的培养基与ADSCs共孵育培养24 h, 检测USPIO标记的有效性及安全性, 并用MRI对标记细胞进行体外成像。  结果  普鲁士蓝染色显示USPIO标记ADSCs的阳性率为99%, 透射电镜提示USPIO颗粒主要位于胞质内溶酶体中; 台盼蓝染色实验显示活细胞数大于95%, MTS[3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-5(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfopheny)-2H-tetrazolium, 溴化噻唑蓝四氮唑]实验提示USPIO浓度为10、20、40、80和160 μg/ml时不影响ADSCs增殖。ELISA结果表明标记细胞与未标记细胞组间培养液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)水平无显著差异; 体外条件下, MRI图像信号强度与标记细胞数量呈正相关。  结论  USPIO标记ADSCs安全有效, MRI图像信号强度与标记细胞数量存在一定相关性, 提示USPIO可用于在体条件下MRI成像示踪标记细胞。     

超顺性氧化铁在细胞内外对磁共振信号的影响

背景：目前关于超顺磁性氧化铁在进行细胞标记和作为网状内皮细胞系统特异性对比剂时对周围质子驰豫时间影响的报道差异较大。目的：验证超顺磁性氧化铁在细胞内外对磁共振信号的影响有否差异,以选择最佳的磁共振扫描方法。设计、时间及地点：对比观察,细胞成像实验,于2006-06/2007-01在川北医学院附属医院医学影像研究所和风湿免疫研究所完成。材料：超顺磁性氧化铁采用Resovist（SHU555A）,由德国先灵公司惠赠。将大鼠骨髓基质干细胞用铁质量浓度分别为0,4.2,8.4,21,42,84mg/L的氧化铁-多聚赖氨酸复合物标记。方法：应用GE Signa EXCITE 1.5TMR扫描仪对19只含不同质量浓度超顺磁性氧化铁的EP管及不同质量浓度铁标记后的磁标记细胞悬液进行体外MR成像。主要观察指标：超顺磁性氧化铁在不同磁共振序列上随质量浓度改变其信号改变的规律;低质量浓度时细胞内外超顺磁性氧化铁对磁共振信号影响的差异。结果：①在细胞外：T1WI信号强度随超顺磁性氧化铁质量浓度的增加先升高后降低,在T2WI上随质量浓度的增加信号降低,在低质量浓度时,T1WI及T2＊WI较T2WI更敏感,以T2＊WI最敏感（P〈0.05）。②在细胞内：MR信号强度随培养液中铁质量浓度的增加而增加,在FSET1WI,铁质量浓度≤21mg/L时,各组间信号强度没有显著性差异,当质量浓度为42mg/L和84mg/L时信号强度较对照组明显升高（P〈0.05）。在FSPGR T1WI,当铁质量浓度≥8.4mg/L时,各管信号强度明显高于对照管（P〈0.05）。在FSE T2WI及GRE T2＊WI上,当质量浓度为4.2mg/L时,信号强度较对照管信号强度明显降低（P〈0.05）,且T2＊WI信号降低较T2WI明显（P〈0.05）。结论：低质量浓度的超顺磁性氧化铁在细胞内外对MR信号的影响是不同的,T2＊WI为检测超顺磁性氧化铁较敏感而特异的序列。     

超顺磁性氧化铁纳米粒子在肝癌诊断与治疗中的研究进展

超顺磁性氧化铁纳米粒子（SPION）作为MR负性对比剂被广泛认知,通过对其进行表面修饰,可明显提高其生物相容性与作用效果。利用外加磁场及交变电流,SPION还可具有靶向传递和磁热疗的作用。本文旨在对SPION在肝癌诊断和治疗方面的研究进展进行综述。     

体外磁标记骨髓基质细胞移植治疗大鼠创伤性脑损伤的在体MRI观察

目的 采用高场MR在体监测超顺磁性氧化铁颗粒(SPIO)标记大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)在脑损伤模型大鼠脑内的分布与迁移.方法 首先进行BMSCs体外培养,然后采用SPIO标记BMSC;采用Feeney法制作创伤性脑损伤模型(TBI).脑损伤24 h后于损伤区周围立体定向移植BMSCs,并于移植后1、3天及1、3周行MR检查.结果 倒置相差显微镜下观察,标记BMSCs的细胞内含有棕黄色铁颗粒,普鲁士蓝染色呈阳性;电镜下胞浆内可见散在分布的铁颗粒.细胞移植后MRI可见移植部位在MR各序列上均呈点状低信号,尤以磁敏感加权成像(SWI)上显示明确.结论 高场MRI能够在活体内连续示踪观察SPIO标记的BMSCs的分布与迁移,且SWI序列最为敏感.     

不同种类超顺磁性氧化铁标记猪骨髓间充质干细胞的体外MR成像

背景:干细胞磁性标记是新近开展的一项干细胞体外标记技术,结合MR成像设备可以活体监控移植入体内的干细胞.目的:明确超顺磁性氧化铁粒子体外标记猪骨髓间充质干细胞的方法、不同种类超顺磁性氧化铁标记细胞经MR成像的特征及可成像的最低标记细胞量.设计、时间及地点:对比观察,于2006-09/2007-03在苏州大学医学部心血管外科实验室及苏州大学附属第一医院影像中心完成.材料:猪髂骨骨髓由太湖梅山猪新鲜采集:超顺磁性氧化铁纳米颗粒为德国Schering公司产品;超微型超顺磁性氧化铁纳米颗粒由苏州大学化学与化工学院提供:铁颗粒晶核表面包被葡聚糖,3种超微型超顺磁性氧化铁包被葡聚糖后根据颗粒大小(12,15,20 nm)分别依次简称为1#,2#,3#.方法:分离、纯化、培养猪骨髓间充质干细胞,体外进行不同种类超顺磁性氧化铁标记,染色及荧光显微镜观察;测量并绘制未标记细胞和标记细胞的MTT生长曲线;选取不同的细胞量组(Feridex标记细胞分别选取1×106、5×105及1×105L-1量组,未标记细胞选取5×105L-1量组,1#、2#及3#超微型超顺磁性氧化铁标记细胞均选取5×105L-1量组)进行标记后MR成像,测量不同扫描序列标记细胞管的信号强度改变,并进行统计学分析.主要观察指标:超顺磁性氧化铁标记干细胞的普鲁士蓝染色检测标记率:标记干细胞的MTT生长曲线;双染色法检测细胞凋亡;不同Ependoff管内细胞团T1WI、T2WI和FFE图像的信号强度.结果:应用多聚赖氨酸介导干细胞磁标记方法标记骨髓间充质干细胞有效率为100%,普鲁士蓝染色见细胞浆内有多少不等的蓝染铁颗粒;超顺磁性氧化铁标记的间充质干细胞在T2WI尤其是FFE(T2WI)序列信号明显降低;在25 mg/L Fe培养液标记浓度下,MR成像的最低细胞量为1×105;在不同种类超顺磁性氧化铁标记下,2#、3#USPIO与Feridex在T2WI及T2*WI上有显著性差异(P<0.01);而1#USPIO与Feridex在T2WI及T2WI上差异无显著性意义(P>0.05):Feridex标记间充质干细胞在T2WI及T2WI上与T1WI相比,差异均有显著性意义(P<0.01).结论:超顺磁性氧化铁可以简便标记间充质干细胞并且在适当浓度下对间充质干细胞的生物学活性没有影响,MR T2WI和T2*WI序列可敏感显像磁性标记的干细胞.     

MRI观察超顺磁性纳米颗粒标记的AnnexinV体外检测细胞凋亡

目的 利用MRI观察超顺磁性纳米颗粒(SPIO)标记的膜联蛋白 V(Annexin V)体外检测凋亡细胞的能力.方法 对5管不同的细胞进行MRI和普鲁士蓝染色,分别为:A管:未经H2O2诱导凋亡处理的细胞与SPIO孵育;B管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞与SPIO孵育;C管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞的空白管;D管:经H2O2诱导凋亡处理的细胞与Annexin V-SPIO孵育;E管:未经H2O2诱导凋亡处理的细胞与Annexin V-SPIO孵育.结果 5管间总体比较MR信号值差异有统计学意义(F=569.38,P＜0.01),其中A、B、C三管的MR信号值差异无统计学意义,D和B管、E和A管、D和E管的MR信号值比较差异均有统计学意义.普鲁士蓝染色显示Annexin V-SPIO可与凋亡细胞膜特异性结合.结论 Annexin V-SPIO可与体外凋亡细胞特异性结合,并引起磁共振信号改变.     

超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的磁共振成像研究

目的明确顺磁性氧化铁纳米粒子(SPIO)体外标记兔骨髓间充质干细胞(MSCs)的适当浓度和不同标记浓度对细胞的生物学活性影响,以及经MR成像的特征和可成像的最低标记细胞量等。方法分离、纯化、培养兔MSCs,体外不同浓度SPIO标记,荧光显微镜观察铁颗粒在细胞内的位置、不同标记浓度下的最佳孵育时间、不同标记浓度细胞形态的改变、细胞内铁颗粒的分布及标记率;测量并绘制未标记细胞和标记细胞的MTT生长曲线;选取适当浓度标记量,对不同细胞量组进行标记后MR成像,测量不同扫描序列标记细胞管的信号强度改变,并进行统计学分析。结果标记后的铁颗粒均位于细胞质内;20～50μgFe/ml培养液是SPIO标记干细胞的适当浓度阈值,超过50μgFe/ml培养液浓度可使细胞的变形增殖能力受到不同程度的抑制;在此浓度阈值标记后孵育18～24h即可有效标记细胞97%～100%;细胞对铁颗粒的吸收与细胞的数量、标记浓度和孵育时间呈正相关;SPIO标记的MSCs在T2WI尤其是FFE(T2WI)序列信号明显降低;在35μgFe/ml培养液标记浓度下,MR可成像的最低细胞量为5×104;35μgFe/ml培养液浓度时,标记细胞1×105和5×104MR成像可使T2WI、FFE图像信号均降低,而且没有使靶灶扩大的磁敏感伪影。结论SPIO可以简便标记MSCs并且在适当浓度下对MSCs的生物学活性没有影响,MRT2WI和T2WI序列可敏感显像磁性标记的干细胞。     

超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的体外标准化实验

背景:超顺磁性氧化铁颗粒标记成像可在体观察标记细胞移植后情况,但结合临床细胞治疗剂量,其标记浓度及标记时间对细胞标记率、标记活性及标记后成像效果的综合影响还需进一步分析.目的:筛选超顺磁性氧化铁体外标记大鼠骨髓间充质干细胞的标准化剂量,拟为体内成像提供最佳标记"浓度-时间".设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-02/10在山西医科大学完成.材料:清洁级Wistar大鼠10只,由山西医科大学动物实验中心提供.Resovist中含超顺磁性氧化铁铁颗粒28 g/L,为德国Schering公司产品.方法:全骨髓法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞.取Resovist,分别配制含终浓度为0,25,50,75,100,150 mg/L超顺磁性氧化铁的培养基,加入P3代骨髓间充质干细胞中进行孵育标记.主要观察指标:普鲁士蓝法检测细胞标记率,锥虫蓝拒染法检测标记细胞活性,观察标记细胞体外磁共振成像情况.结果:细胞标记率达100%,随着标记时间的延长,胞质内蓝染颗粒逐渐减少.标记1 d和3 d时,与0 mg/L超顺磁性氧化铁组比较,25,50 mg/L组锥虫蓝拒染率无明显差异(F=0.28～3.15,P0.05);与25 mg/L超顺磁性氧化铁组比较,50 mg/L组锥虫蓝拒染率无明显差异(F=0.28～0.79,P0.05).体外磁共振成像示标记3 d时,标记浓度为50 mg/L组的T2WI及T2·WI信号降低最明显.结论:超顺磁性氧化铁"50 mg/L-3 d"体外标记效率高,对细胞活性无影响,且磁共振成像信号降低最明显,为最适"浓度-时间"组合.     

超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞

背景:目前,超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记的骨髓间充质干细胞在治疗心、肝、肾及中枢神经系统疾病方面已经得到了快速的应用.目的:对国内外应用超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的现状及新进展作一综述.方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中2001-12/2009-12关于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的文章,在标题和摘要中以"超顺磁性氧化铁,干细胞,标记,磁共振成像"或"superparamagnetic iron oxide,stem cells,label,magnetic resonance imaging"为检索词进行检索.选择近5年内文章内容与超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章.初检得到243篇文献,根据纳入标准选择关于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的40篇文献进行综述.结果与结论:以往通过光镜识别干细胞标记物的研究中,必须用传统的组织病理学检查,从体内取得组织才能进行细胞探测,这显然不适合进行动态观察,更不适用于临床研究.超顺磁性氧化铁可以有效地进行活细胞标记,而这种标记方法不会影响细胞的活力、生长、分裂、迁移、分化等生物学功能,对细胞没有毒性,具有良好的安全性,可以用MRI进行活体示踪研究.     

超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞

背景：目前,超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记的骨髓间充质干细胞在治疗心、肝、肾及中枢神经系统疾病方面已经得到了快速的应用。目的：对国内外应用超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的现状及新进展作一综述。方法：应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中2001-12/2009-12关于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的文章,在标题和摘要中以＂超顺磁性氧化铁,干细胞,标记,磁共振成像＂或＂superparamagnetic iron oxide,stem cells,label,magnetic resonance imaging＂为检索词进行检索。选择近5年内文章内容与超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到243篇文献,根据纳入标准选择关于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的40篇文献进行综述。结果与结论：以往通过光镜识别干细胞标记物的研究中,必须用传统的组织病理学检查,从体内取得组织才能进行细胞探测,这显然不适合进行动态观察,更不适用于临床研究。超顺磁性氧化铁可以有效地进行活细胞标记,而这种标记方法不会影响细胞的活力、生长、分裂、迁移、分化等生物学功能,对细胞没有毒性,具有良好的安全性,可以用MRI进行活体示踪研究。     

超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞体外诱导分化为神经细胞

背景:一些研究者利用超顺磁性氧化铁对骨髓间充质干细胞进行标记,并利用MRI技术对标记细胞肝内、肾内移植后进行初步的活体示踪,但是,对于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后,对其存活、增殖以及分化是否有影响研究较少.目的:观察超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后,对其存活、增殖以及向神经细胞的分化是否有影响.方法:使用超顺磁性氧化铁标记大鼠骨髓间充质干细胞,采用普鲁上蓝染色法鉴定其标记率、锥虫蓝染色法检测细胞活力、MTT法检测标记干细胞的细胞增殖活力,以1 mmol/Lβ-巯基乙醇及无血清DMEM培养液体外诱导标记细胞向神经细胞分化并用免疫组织化学奠定诱导后细胞、再次使用普鲁上蓝染色法鉴定神经细胞内的铁颗粒.结果与结论:普鲁士蓝染色对干细胞的标记率接近100%,锥虫蓝染色显示标记细胞的存活率为97%:MTT法检测发现标记干细胞的增殖活力与未标记干细胞相比差异无显著性意义(P>0.05):以β巯基乙醇诱导后大部分骨髓问充质干细胞分化为神经元样细胞、免疫组织化学阳性,再次普鲁士蓝染色显示铁颗粒位于神经细胞的细胞浆内.提示超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞后,对于干细胞的存活、增殖以及向神经细胞的分化无影响.     

Rapid spectrophotometric technique for quantifying iron in cells labeled with superparamagnetic iron oxide nanoparticles: potential translation to the clinic

Labeling cells with superparamagnetic iron oxide (SPIO) nanoparticles provides the ability to track cells by magnetic resonance imaging. Quantifying intracellular iron concentration in SPIO labeled cells would allow for the comparison of agents and techniques used to magnetically label cells. Here we describe a rapid spectrophotometric technique (ST) to quantify iron content of SPIO‐labeled cells, circumventing the previous requirement of an overnight acid digestion. Following lysis with 10% sodium dodecyl sulfate (SDS) of magnetically labeled cells, quantification of SPIO doped or labeled cells was performed using commonly available spectrophotometric instrument(s) by comparing absorptions at 370 and 750 nm with correction for turbidity of cellular products to determine the iron content of each sample. Standard curves demonstrated high linear correlation (R² = 0.998) between absorbance spectra of iron oxide nanoparticles and concentration in known SPIO‐doped cells. Comparisons of the ST with inductively coupled plasma–mass spectroscopy (ICP‐MS) or nuclear magnetic resonance relaxometric (R₂) determinations of intracellular iron contents in SPIO containing samples resulted in significant linear correlation between the techniques (R₂ vs ST, R² > 0.992, p < 0.0001; ST vs ICP‐MS, R² > 0.995, p < 0.0001) with the limit of detection of ST for iron = 0.66 µg ml^?1 for 10⁶ cells ml^?1. We have developed a rapid straightforward protocol that does not require overnight acid digestion for quantifying iron oxide content in magnetically labeled cells using readily available analytic instrumentation that should greatly expedite advances in comparing SPIO agents and protocols for labeling cells. Published 2012. This article is a U.S. Government work and is in the public domain in the USA.     

SPIO标记猪脂肪干细胞的生物学特性与多向分化潜能及体外3.0T MR成像

背景：不同种类细胞的最佳化标记方案需要大量实验证明,而每种细胞对应标记策略的安全性检测至关重要。目的：应用超顺磁性氧化铁联合多聚左旋赖氨酸标记猪脂肪干细胞,探讨磁标记对细胞生物学特性和多向分化潜能的影响以及标记细胞体外3.0TMR成像特性。方法：五指山小型猪皮下脂肪分离培养脂肪干细胞;超顺磁性氧化铁-多聚左旋赖氨酸复合物标记液标记脂肪干细胞;应用3.0TMR对不同浓度标记细胞进行T1WI、T2WI及T2＊WI序列体外成像。结果与结论：普鲁士蓝染色显示标记细胞胞质内含有多少不等的蓝染铁颗粒,细胞标记率近100%;标记细胞向心肌、骨、脂肪方向诱导分化成功;不同浓度标记细胞MR扫描显示,随细胞浓度升高,3种序列信号变化率均增加;相同浓度细胞T2＊WI信号变化率最大,T1WI最小,同一浓度3种MR序列间信号变化率差异均有显著性意义（P〈0.01）;3.0TMR成像能检测到至少1×106L-1标记细胞。结果显示应用超顺磁性氧化铁联合多聚左旋赖氨酸标记方案可有效标记脂肪干细胞,不影响细胞活力、增殖及多向分化能力;T2＊WI序列检测标记细胞最敏感。     

SPIO标记猪脂肪干细胞的生物学特性与多向分化潜能及体外3.0TMR成像

背景:不同种类细胞的最佳化标记方案需要大量实验证明,而每种细胞对应标记策略的安全性检测至关重要.目的:应用超顺磁性氧化铁联合多聚左旋赖氨酸标记猪脂肪干细胞,探讨磁标记对细胞生物学特性和多向分化潜能的影响以及标记细胞体外3.0T MR成像特性.方法:五指山小型猪皮下脂肪分离培养脂肪干细胞;超顺磁性氧化铁-多聚左旋赖氨酸复合物标记液标记脂肪干细胞;应用3.0T MR对不同浓度标记细胞进行T1WI、T2WI及T2*WI序列体外成像.结果与结论:普鲁士蓝染色显示标记细胞胞质内含有多少不等的蓝染铁颗粒,细胞标记率近100%;标记细胞向心肌、骨、脂肪方向诱导分化成功;不同浓度标记细胞MR扫描显示,随细胞浓度升高,3种序列信号变化率均增加;相同浓度细胞T2*WI信号变化率最大,T1WI最小,同一浓度3种MR序列间信号变化率差异均有显著性意义(P < 0.01);3.0T MR成像能检测到至少1×106 L-1标记细胞.结果显示应用超顺磁性氧化铁联合多聚左旋赖氨酸标记方案可有效标记脂肪干细胞,不影响细胞活力、增殖及多向分化能力;T2*WI序列检测标记细胞最敏感.