| 人Polycomb家族成员NSPc1蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体制备 |
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| 作者姓名： | 龚燕华 王旭（北京） 吴旭东 强伯勤 彭小忠 袁建刚 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院基础医学研究所 北京协和医学院 医学分子生物学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(项目编号：30600166;30721063)国家高技术研究发展计划(863计划)(项目编号：2006AA02Z137) |
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| 摘 要： | 目的 Polycomb家族成员NSPc1多克隆抗体的制备与检测。方法 应用PCR技术扩增人NSPc1编码区全长序列并插入到pET-43.1a(+)载体中，在大肠杆菌BL21中表达融合蛋白HIS-NSPc1。利用所表达的融合蛋白中含有的6×His 标签进行亲和纯化。用所获得的纯化蛋白免疫新西兰大白兔，获得兔抗人NSPc1多克隆抗体。用Western blot检测抗体免疫反应的特异性。结果 在大肠杆菌中表达并纯化了人NSPc1重组蛋白，纯度达95％，用其免疫新西兰大白兔，成功制备了相应兔源多克隆抗体，Western blot实验中该抗体可以特异识别内源及外源性NSPc1蛋白。结论 原核表达的NSPc1融合蛋白可以被纯化，并具有足够的蛋白免疫原性，所制备的相应多克隆抗体具有良好的特异性，可以运用于NSPc1基因的功能研究。
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| 收稿时间： | 2007-12-28 |
| 修稿时间： | 2008-02-28 |
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