| 人脐带血抗巨细胞病毒和EB病毒的特异性细胞毒性T细胞的建立 |
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| 作者姓名： | 戴丽君 李树浓 罗绍凯 彭爱华 许多荣 洪文德 |
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| 作者单位： | 1.中山医科大学附属第一医院血液实验室,广东,广州,510080;2.,浙江,温州,325003;3.中山医科大学病理生理学教研室,广东,广州,510089 |
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| 摘 要： | 目的:探讨用人的脐带血单个核细胞体外同时扩增对抗EB病毒(EBV)和巨细胞病毒(CMV)的特异性细胞毒性T淋巴细胞的可行性。方法:利用人的脐带血单个核细胞(CBMC),通过EBV感染转化成B成淋巴细胞细胞株(BLCL),再通过逆转录病毒载体,将CMV蛋白基因pp65导入BLCL,用这种细胞体外刺激同一供者脐带血的CBMC产生细胞毒性T细胞(CTL),经[51Cr]释放实验(CRA)检测产生的CTL的杀伤功能。结果:经免疫印迹(WesternBlot)检测,我们获得了同时表达EBV和CMV特异性抗原的抗原递呈细胞BLCLpp65,免疫组化结果表明,BLCLpp65细胞表达CMVpp65抗原的阳性率高达95%。CRA结果证实,用BLCLpp65刺激产生的CTL同时对EBV和CMV都有细胞毒作用。用免疫磁珠法将CD4+和CD8+T细胞分离后再进行CRA,表明特异性的细胞毒性作用主要是CD8+CTL介导的。结论:BLCLpp65是很好的抗原递呈细胞,在体外能同时表达EBV和CMV蛋白抗原,用其刺激血清病毒抗体阴性的CBMC,能够扩增出同时针对EBV和CMV的特异性CTL,其中CD8+CTL起主要作用。
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| 关 键 词： | 爱泼斯坦-巴尔病毒 巨细胞病毒 B淋巴细胞 细胞系 T淋巴细胞 细胞毒性 |
| 收稿时间： | 2000-03-02 |
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