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低氧射线双调控的TK表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞系的放射增敏作用
引用本文:魏玲,宋现让,王兴武,孙菊杰,宋宝,郑燕. 低氧射线双调控的TK表达载体的构建及其对人乳腺癌细胞系的放射增敏作用[J]. 基础医学与临床, 2010, 30(8): 815-819
作者姓名:魏玲  宋现让  王兴武  孙菊杰  宋宝  郑燕
作者单位:山东省肿瘤医院基础研究中心&山东省放射肿瘤学重点实验室,山东,济南,250117
摘    要:目的 利用AdEasy系统构建低氧射线双调控的TK表达载体- 腺病毒Ad.HRE.CArG.HSV-TK,并观察其对人乳腺癌细胞系Bcap37和MDA-MB-435的放射增敏作用。方法 用分子克隆技术构建插入HRE.CArG.HSV-TK片段的Ad.HRE.CArG.HSV-TK。CsCl梯度离心法纯化病毒,用AdEasy系统GFP标签测定病毒功能滴度。Ad.HRE.CArG.HSV-TK体外转导细胞48h,流式细胞仪测GFP阳性率,Real-time RT-PCR和Western blot检测TK mRNA和蛋白表达。MTT法检测腺病毒(Ad)转导联合放射(RT)对细胞的生长抑制作用和放射增敏比(SER)。结果 Ad.HRE.CArG.HSV-TK 滴度为2.1×109TU/mL。50 MOI病毒转导Bcap37和MDA-MB-435细胞48h,GFP阳性率分别为92%和93%,TK基因表达明显增加(P<0.05)。Ad与RT联用组(Ad+RT)组细胞生长抑制率明显高于Ad组和相应同等剂量RT组(P<0.05),SER为1.55。结论 应用AdEasy系统可制备同时表达GFP和TK的重组腺病毒。腺病毒对乳腺癌细胞具放射增敏作用,为进一步开展乳腺癌的基因放射治疗奠定基础。

关 键 词:乳腺癌  腺病毒  低氧  放射  自杀基因治疗
收稿时间:2008-07-01
修稿时间:2009-02-19

Construction of TK expression vector regulated by hypoxia and radiation and its radiosensitization effect on human breast cancer cells
WEI Ling,SONG Xian-rang,WANG Xing-wu,SUN Ju-jie,SONG Bao,ZHENG Yan. Construction of TK expression vector regulated by hypoxia and radiation and its radiosensitization effect on human breast cancer cells[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2010, 30(8): 815-819
Authors:WEI Ling  SONG Xian-rang  WANG Xing-wu  SUN Ju-jie  SONG Bao  ZHENG Yan
Abstract:
Keywords:
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