| 靶向 MRP1 基因的shRNA稳定逆转肺癌的多药耐药性 |
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| 作者姓名： | 邵淑丽 崔婷婷 贾红双 谢振丽 张伟伟 刘迁 陈薇薇 李爽 陈丽 |
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| 作者单位： | 1.齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,黑龙江,齐齐哈尔,161006 |
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| 基金项目： | 黑龙江省自然科学基金资助项目(No.C200624); 黑龙江省教育厅科学技术项目(No.11511447No.12511611) |
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| 摘 要： | 目的:利用短发夹RNA(shRNA)表达载体逆转肺癌细胞株(A549/DDP)的多药耐药性。方法:构建2个多药耐药相关蛋白1(MRP1)基因特异的shRNA表达载体pSilencer2.1-U6neo-MRP1,稳定电转染A549/DDP细胞,实时荧光定量PCR分析MRP1mRNA的表达,免疫荧光检测细胞MRP1蛋白的表达,流式细胞术检测细胞内罗丹明123(Rho123)的潴留情况。MTT法检测细胞活力。结果:成功构建了shRNA表达载体pSilencer2.1-U6neo-MRP1,稳定转染sh-MRP1-2.1-1和sh-MRP1-2.1-2后,A549/DDP细胞MRP1mRNA和蛋白表达均显著降低,细胞内Rho123相对荧光强度由16.93%±0.58%分别升高至89.02％±0.59%和82.56%±1.37%;A549/DDP亲本细胞顺铂的IC50分别由(101.45±0.64)μmol/L降至(38.06±0.05)μmol/L和(53.72±0.36)μmol/L,5-氟尿嘧啶的IC50分别由(263.20±2.00)μmol/L降至(98.82±1.16)μmol/L和(141.81±0.49)μmol/L。结论:shRNA干扰表达载体pSilencer2.1-U6neo-RMP1能够稳定、持久地抑制MRP1基因,有效地逆转了A549/DDP细胞的多药耐药性。
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| 关 键 词： | 短发夹RNA 多药耐药 多药耐药相关蛋白1 RNA干扰 A549/DDP细胞 |
| 收稿时间： | 2011-04-19 |
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