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丹参酮ⅡA对人角膜基质细胞纤维化的抑制作用
作者姓名:胡红利  肖中举
作者单位:510515 广东省广州市,南方医科大学基础医学院生理学教研室
摘    要:目的 研究丹参酮ⅡA (tanshinoneⅡA,TSN) 对转化生长因子β1 (transforming growth factor-β1,TGF-β1) 诱导的人角膜基质细胞 (human keratocyte,HK) 纤维化的作用,探索该药物是否具有防治角膜瘢痕的潜能。方法 采用胰蛋白酶消化培养HK,并传代至4-7代用于实验。通过TGF-β1诱导建立HK纤维化模型,并分别用5.0 μg·L-1 TGF-β1和不同浓度的TSN联合给药方法对HK进行处理。采用Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)与Vimentin的表达,qPCR检测纤连蛋白 (fibronectin,FN) 和I型胶原(collgen I,COL I) mRNA的表达;利用细胞免疫荧光染色观察HK细胞形态的改变。结果 5.0 μg·L-1 TGF-β1可以显著上调α-SMA与Vimentin蛋白的表达和胞外基质成分FN mRNA(2.238±0.227)、COL I mRNA(3.554±0.526)的表达。2.5 μmol·L-1和5.0 μmol·L-1 TSN均能抑制α-SMA蛋白的表达和FN mRNA(0.619±0.017、0.263±0.006)、COL I mRNA(0.631±0.011、0.275±0.081)的表达。5.0 μg·L-1 TGF-β1诱导组HK形态呈长梭形,具有两极,细胞呈极性分布;5.0 μmol·L-1 TSN联合5.0 μg·L-1 TGF-β1培养HK形态同原始细胞形态,细胞呈三角形或星形。结论 TSN可抑制TGF-β1诱导的HK纤维化,具有抗角膜瘢痕的潜力。

关 键 词:丹参酮ⅡA  转化生长因子-β1  人角膜基质细胞纤维化
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