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miR-431-5p靶向Smad4影响人牙髓干细胞增殖、分化的实验研究
作者姓名:张建  吴建坤  刘丽丽  林秀雅  刘学丽
作者单位:1. 沧州市中心医院2. 沧州市中心医院口腔科
基金项目:河北省沧州市重点研发计划自筹项目
摘    要:目的:探讨miR-431-5p对人牙髓干细胞(DPSCs)增殖、分化的调控作用及机制。方法:分别将miR-431-5p mimic(miR-431-5p mimic组)、Smad4过表达载体(pc-Smad4组)及二者共转染(pc-Smad4+miR-431-5p mimic组)DPSCs细胞。采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-431-5p与Smad4靶向关系;qRT-PCR检测转染效率;CCK-8实验检测细胞增殖能力;茜素红染色观察钙化结节;碱性磷酸酶(ALP)染色试剂盒和ALP活性检测ALP表达及活性;Western blot检测成牙分化标志物骨钙蛋白(OCN)及Smad4蛋白表达。结果:共转染miR-431-5p mimic和野生型Smad4报告基因载体后,DPSCs细胞的荧光素酶活性显著降低(P<0.05)。与mimic-NC组比较,miR-431-5p mimic组miR-431-5p表达上调,Smad4表达下调,细胞增殖能力增加,钙化结节数目减少,ALP活性降低,OCN蛋白表达下调(均P<0.05);pc-Smad4组细胞增殖能力降低(P<0.05),钙化结节数目增加,ALP活性增加,OCN蛋白表达上调(均P<0.05)。与pc-Smad4组比较,pc-Smad4+miR-431-5p mimic组细胞增殖能力显著增加,钙化结节数目减少,ALP活性降低,OCN蛋白表达下调(均P<0.05)。结论:miR-431-5p可通过靶向抑制Smad4蛋白表达抑制DPSCs成牙分化并促进其增殖。

关 键 词:牙髓干细胞  miR-431-5p  Smad4  增殖  成骨分化  
收稿时间:2022-07-01
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