| Pdx1与NeuroD1联合诱导L02细胞Nkx6.1和GLUT2的表达 |
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| 作者姓名： | 唐小龙,郭敏,张洹 ,朱康儿 |
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| 作者单位： | 1.暨南大学医学院血液病研究所,广东,广州,510632 |
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| 摘 要： | 目的：应用分子生物学技术,构建胰腺十二指肠同源框蛋白1(Pdx1)和神经分化因子1(NeuroD1)转录因子真核表达质粒,检测其能否在真核细胞中有效表达并诱导人肝细胞转分化的能力。方法:以人胚胎胰腺组织mRNA为模板经RT-PCR扩增获得Pdx1和NeuroD1基因,分别克隆到真核双表达载体pIRES质粒的多克隆位点A(MCSA)和B(MCSB)中,构建pI/Pdx1/NeuroD1真核表达质粒,并转染L02细胞。用RT-PCR、免疫组化、间接荧光法和Westernblotting检测目的基因及NK转录因子相关的Nkx6.1(Nkx6.1)和葡萄糖运载体2(GLUT2)的表达情况。结果:目的基因克隆正确且在真核细胞中有效表达;并可诱导肝细胞表达胰腺β细胞功能相关的Nkx6.1和GLUT2因子。结论:pI/Pdx1/NeuroD1质粒成功构建和在人真核细胞表达,并诱导人肝细胞表达β细胞功能相关的Nkx6.1转录因子和GLUT2,提示Pdx1与NeuroD1可诱导肝细胞向胰腺内分泌细胞分化。
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| 关 键 词： | 胰腺十二指肠同源盒蛋白质1 神经源分化因子1 |
| 收稿时间： | 2007-12-10 |
| 修稿时间： | 2008-04-22 |
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