| 隐源性肝炎相关新基因CHBP2的原核表达及蛋白纯化 |
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| 引用本文： | 李锟,叶进,肖凡,李国力,洪源,魏红山. 隐源性肝炎相关新基因CHBP2的原核表达及蛋白纯化[J]. 世界华人消化杂志, 2007, 15(22): 2394-2398 |
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| 作者姓名： | 李锟 叶进 肖凡 李国力 洪源 魏红山 |
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| 作者单位： | 华中科技大学同济医学院附属协和医院消化内科,湖北省武汉市,430022;北京地坛医院传染病研究室,北京市,100011 |
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| 摘 要： | 目的:构建隐源性肝炎相关新基因CHBP2原核表达载体,在大肠杆菌中进行表达,并纯化CHBP2融合蛋白。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),以提取的Huh7细胞mRNA为模板,扩增获得CHBP2基因片段,连接到pGEM-T载体,测序正确后插入至原核表达载体pET-32a( )中,构建原核表达载体pET-32a( )-CHBP2,转化大肠杆菌BL21,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,获得CHBP2融合蛋白的可诱导性表达,通过SDS-PAGE电泳、Western blot免疫印迹分析证实蛋白表达的特异性,超声破碎表达细菌,SDS-PAGE分析,利用镍离子亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。结果:成功构建原核表达载体pET-32a( )- CHBP2,并将CHBP2融合蛋白成功表达,通过Western blot免疫印迹,证实了蛋白表达的特异性。SDS-PAGE分析表明其为包涵体表达,并对蛋白成功进行了纯化和复性,获得了表达蛋白的纯品结论:成功表达、纯化CHBP2蛋白,为研究CHBP2蛋白的生物学功能打下了基础,
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| 关 键 词： | 隐源性肝炎 CHBP2 原核表达 蛋白纯化 |
| 收稿时间： | 2007-03-04 |
| 修稿时间： | 2007-07-18 |
Expression and purification of new gene CHBP2 associated with cryptogenic hepatitis in prokaryote cells |
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| Kun Li,Jin Ye,Fan Xiao,Guo-Li Li,Yuan Hong,Hong-Shan Wei. Expression and purification of new gene CHBP2 associated with cryptogenic hepatitis in prokaryote cells[J]. World Chinese Journal of Digestology, 2007, 15(22): 2394-2398 |
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| Authors: | Kun Li Jin Ye Fan Xiao Guo-Li Li Yuan Hong Hong-Shan Wei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cryptogenic hepatitis CHBP2 Prokaryotic expression Protein purification |
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