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hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建
引用本文:钱瑛 余应年. hMSH2反义核糖核酸表达质粒的构建[J]. 中国药理学与毒理学杂志, 1998, 12(2): 139-143
作者姓名:钱瑛 余应年
作者单位:浙江医科大学病理生理学教研室
摘    要:利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR), 特异地扩增HeLa细胞中hMSH2 cDNA的最保守区域, 并将其克隆到TA载体, 从重组质粒两端进行序列分析, 证实为目的片段. 将该目的片段反向克隆到哺乳动物表达载体pREP9的 BamHⅠ和KpnⅠ位点之间, 筛选后得pREP9-hMSH2反义表达重组质粒. 用磷酸钙-DNA共沉淀法将重组质粒DNA及载体DNA分别导入HeLa细胞, 经G418筛选, 扩大培养. 凝胶阻滞实验证实转染有pREP9-hMSH2重组质粒的HeLa-MSH2细胞抽提物中G·T和A·C错配结合蛋白质表达明显降低, 为研究hMSH2基因功能提供了一有效细胞系.

关 键 词:基因,错配修复  hMSH2  核糖核酸,反义  错配修复结合蛋白质
收稿时间:1997-02-03

Construction of hMSH2 antisense RNA expression plasmid
QIAN Ying, YU Ying-Nian, CHEN Xing-Ruo, LUO Jian-Hong, XIE Hai-Yang. Construction of hMSH2 antisense RNA expression plasmid[J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 1998, 12(2): 139-143
Authors:QIAN Ying   YU Ying-Nian   CHEN Xing-Ruo   LUO Jian-Hong   XIE Hai-Yang
Affiliation:(Department of Pathophysiology, Zhejiang Medical University, Hangzhou 310031)
Abstract:
Keywords:genes   mismatch repair  hMSH2  RNA   antisense  mismatch binding protein
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