| HLCDG1基因siRNA表达质粒的构建及其对A549细胞周期和增殖的影响 |
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| 作者姓名： | 邹飞雁 李峰 陈主初 贺智敏 吕辉 刘孝荣 欧阳咏梅 |
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| 作者单位： | 1.中南大学肿瘤研究所细胞生物室,湖南,长沙,410078;2.暨南大学生殖免疫研究所,广东,广州,510632;3.中南大学湘雅医院医学实验研究中心,卫生部肿瘤蛋白质组学重点实验室,湖南,长沙,410008 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);中国博士后科学基金 |
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| 摘 要： | 目的:本研究旨在应用RNA干扰技术,诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体,筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株增殖和细胞周期分布状况。结果:根据siRNA表达载体的设计原则,构建了能在哺乳动物细胞稳定表达的siRNA载体5个（4个位点匹配实验组和1个位点错配对照组）,依次命名为pHL-si-1、pHL-si-2、pHL-si-3、pHL-si-4和pHL-si-c。上述载体分别与表达HLCDG1的重组体pcDNA3.1(+)/HLCDG1共转染A549细胞,筛选到一株共转染pHL-si-1载体和pcDNA3.1(+)/HLCDG1重组体的A549细胞,它几无HLCDG1基因表达,这株细胞暂命名为A549-HLCDG1-si-1。MTT和流式细胞仪分析表明,A549-HLCDG1-si-1细胞增殖能力明显提高,进入S期和G2+M期增多,滞留G1期减少。结论:采用RNAi技术特异阻断HLCDG1基因表达,验证了HLCDG1基因对A549肺癌细胞有生长抑制作用。
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| 关 键 词： | 基因 HLCDG1 短小干扰双链RNA A549细胞 细胞周期 |
| 文章编号： | 1000-4718（2006）07-1256-07 |
| 收稿时间： | 2005-05-09 |
| 修稿时间： | 2005-05-092005-06-29 |
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