| mTEL-cFms激酶结构域融合蛋白真核表达载体的构建及其对信号转导和转录激活因子核转位的影响 |
| |
| 引用本文： | 杨胜乾,龙隆,李微,王莉莉. mTEL-cFms激酶结构域融合蛋白真核表达载体的构建及其对信号转导和转录激活因子核转位的影响[J]. 中国药理学与毒理学杂志, 2011, 25(5): 456-462. DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2011.05.008 |
| |
| 作者姓名： | 杨胜乾 龙隆 李微 王莉莉 |
| |
| 作者单位： | 军事医学科学院毒物药物研究所,北京,100850 |
| |
| 摘 要： | 目的构建激酶盘真核表达载体,观察豆蔻酰化的TEL转录调节因子HLH结构域与c-Fms激酶结构域融合蛋白(mTEL-cFmskd)的表达对信号转导和转录激活因子1(STAT1)和STAT3核转位的影响。方法利用DNA重组技术,将人的c-Src豆蔻酰化多肽、TEL转录调节因子HLH结构域、c-Fms激酶结构域以及c-Myc标签的DNA序列克隆在pCORON/neo载体上,构建pCORON/neo-HcSrc-Tel-cfmskd-Myc真核表达载体。将载体转染至稳定表达GFP-STAT1的人骨肉瘤细胞(U2OS)和稳定表达EGFP-STAT3的幼仓鼠肾细胞24 h后,采用IN Cell Analyzer1000获取细胞图像,分析细胞内GFP-STAT1或EGFP-STAT3融合蛋白的核转位程度。结果质粒酶切和测序鉴定表明,构建的pCORON/neo-HcSrc-Tel-cfmskd-Myc真核表达载体序列正确。载体转染细胞24 h后,绿色荧光蛋白标记的STAT1和STAT3均进入细胞核,发生核转位现象。c-Fms激酶抑制剂GW2580和Sutent能抑制mTEL-cFmskd诱导EGFP-STAT3核转位的发生。结论成功构建激酶盘真核表达载体pCORON/neo-HcSrc-Tel-cfmskd-Myc。载体在细胞中表达的mTEL-cFmskd豆蔻酰化融合蛋白具有M-CSF/c-Fms配体受体复合物激活下游信号分子的生物学功能。
|
| 关 键 词： | 巨噬细胞集落刺激因子受体 真核表达载体 TEL 豆蔻酰化 信号转导和转录激活因子 核转位 激酶抑制剂 |
| 收稿时间： | 2011-04-28 |
Establishment of mTEL-cFmskd eukaryotic expression vector and its effect on STAT1/3 nuclear translocation |
| |
| YANG Sheng-qian,LONG Long,LI Wei,WANG Li-li. Establishment of mTEL-cFmskd eukaryotic expression vector and its effect on STAT1/3 nuclear translocation[J]. Chinese Journal of Pharmacology and Toxicology, 2011, 25(5): 456-462. DOI: 10.3867/j.issn.1000-3002.2011.05.008 |
| |
| Authors: | YANG Sheng-qian LONG Long LI Wei WANG Li-li |
| |
| Affiliation: | YANG Sheng-qian,LONG Long,LI Wei,WANG Li-li(Institute of Pharmacology and Toxicology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | macrophage colony-stimulating factor receptor TEL myristoylation STATs nuclear translocation kinase inhibitors |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《中国药理学与毒理学杂志》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《中国药理学与毒理学杂志》下载全文 |
|
