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用Taq Man探针实时定量PCR法快速检测鼠疫耶尔森菌
作者姓名:张玲  翟俊辉  周冬生  郭兆彪  王津  杨瑞馥
基金项目:国家 8 6 3基金资助项目 (批准号2 0 0 2AA2 15 0 11);
摘    要:目的 建立一种快速、准确、特异的定量检测鼠疫耶尔森菌的方法。方法 针对鼠疫耶尔森菌特异的染色体标识序列设计引物和TaqMan探针,进行实时定量聚合酶链反应(polymerasechainreaction ,PCR)分析,优化反应体系,检测其灵敏度、特异性和重复性。结果 以EV76灭活培养物为对象,检测灵敏度可达每反应体系0 .0 8CfU ;30株非鼠疫菌株的检测结果表明,对照菌株均为阴性,检测特异性良好;对同一样品进行17次重复检测,其循环阈值的标准偏差为0 .35。结论 TaqMan探针法能够灵敏、特异、稳定地对鼠疫耶尔森氏菌进行定量检测,为鼠疫监控、诊断提供有力手段

关 键 词:DNA引物   聚合酶链反应   耶尔森氏菌  鼠疫   DNA探针
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