| DARPP-32基因对SH-SY5Y细胞药物敏感性的调节作用 |
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| 作者姓名： | 张宏卫 刘丽华 李伟 |
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| 作者单位： | 1.绍兴文理学院医学院1附属医院神经科,2分子诊断实验室,浙江,绍兴,312000;2.四川大学华西医院神经科,四川,成都,610041 |
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| 摘 要： | 目的：探讨DARPP-32基因对人神经母细胞瘤细胞药物敏感性的调节作用。方法：构建DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体,并将它们转导入人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选后获得稳定转染的阳性克隆后,应用RT-PCR和Westernblotting进行鉴定;MTT法检测细胞转染前后药物敏感性的变化;流式细胞仪检测细胞转染前后对阿霉素的蓄积浓度的变化;RT-PCR和Westernblotting检测细胞转染前后耐药相关蛋白P-gp、MRP和凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达变化。结果：成功构建了DARPP-32基因的真核表达载体和小干扰RNA载体;筛选到稳定的DARPP-32高/低表达的神经母细胞瘤细胞模型;MTT试验和流式细胞仪检测结果显示,上调DARPP-32的表达能够显著增强神经母细胞瘤细胞对长春新碱、阿霉素、5-氟尿嘧啶和顺铂的敏感性,提高细胞内阿霉素的蓄积（P<0.05）,转染DARPP-32小干扰RNA后的细胞对化疗药物的敏感性降低,细胞内的阿霉素蓄积量显著减少（P<0.05）;RT-PCR和Westernblotting结果显示,DARPP-32能够下调P-gp和Bcl-2的表达。结论：DARPP-32基因能够调节神经母细胞瘤细胞对化疗药物的敏感性,具有较好的临床应用前景。
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| 关 键 词： | 神经母细胞瘤 基因 DARPP-32 RNA干扰 SH-SY5Y细胞 |
| 文章编号： | 1000-4718（2007）05-0977-05 |
| 收稿时间： | 2006-11-01 |
| 修稿时间： | 2006-11-012007-01-10 |
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