| 摘 要： | 目的 探讨HL60-pNL3.2报告基因热原检查法在水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗热原测定中的应用。方法 参照中国药典《体外热原检查法（报告基因法）》公示稿,计算3种疫苗最大有效稀释倍数（MVD）,干扰实验探讨3种疫苗对该方法测定热原是否存在干扰。参照中国药典2020年版通则9101对该方法测定3种疫苗热原进行方法学验证,用经验证的方法测定3种疫苗热原含量。结果 水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗、冻干甲型肝炎减毒活疫苗MVD分别为1000、200和1000倍。在MVD范围内,内毒素（LPS）在3种疫苗中的回收率在52.5%~110.1%之间。方法学验证结果显示该方法用于3种疫苗热原测定,LPS浓度与其化学光强度（RLU值）相关系数（R2）均大于0.98;LPS 浓度在 1~250EU.mL-1范围内,回收率结果在 76.4%~192.8%之间。LPS浓度高于5 EU.mL-1时,重复性(cv%)均小于25%;该方法用于3种疫苗热原测定的检测限和定量限在0.05~0.13EU.mL-1之间。用建立的HL60-pNL3.2报告基因热原检查法测定3种疫苗热原含量,均低于内毒素限值。结论 该方法具有不使用动物、操作简单、快速、检测热原谱广,可对热原进行定量的优点,可用于水痘减毒活疫苗、流感病毒裂解疫苗和冻干甲型肝炎减毒活疫苗热原测定。
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