| 人白细胞介素-29 cDNA克隆及其在大肠杆菌系统的表达 |
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| 引用本文： | 张胜权,鲁云霞,罗欣,徐从贞,陈兵. 人白细胞介素-29 cDNA克隆及其在大肠杆菌系统的表达[J]. 实用医学杂志, 2005, 21(1): 5-8 |
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| 作者姓名： | 张胜权 鲁云霞 罗欣 徐从贞 陈兵 |
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| 作者单位： | 230032,合肥市,安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室 |
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| 基金项目： | 安徽省教育厅自然科学基金资助(项目编号:2002KJ153) |
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| 摘 要： | 目的：克隆人细胞因子IL-29全长cDNA及其在大肠杆菌中表达,制备抗IL-29多克隆抗体。方法：分离外周血单核细胞;VSV感染后,提取总RNA,通过一步RT-PCR获得IL-29全长cDNA。DNA测序正确后,将IL-29cDNA的编码框序列构建到原核表达载体pET28a(+)中。卡那霉素平板筛选及PCR鉴定,挑出阳性克隆进行扩增、转化大肠杆茵进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western blotting鉴定,亲和层析分离纯化得到Mr为23000组氨酸标签重组人IL-29融合蛋白。纯化的IL-29免疫家兔制备抗IL-29多克隆抗体。结果：成功获得人IL-29全长cDNA,并以包涵体形式表达于大肠杆茵中。免疫家兔后获得特异抗IL-29的多克隆抗体。结论：获得rhlL-29细胞因子及其多克隆抗体,为其进一步研究及应用奠定基础。
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| 关 键 词： | ')" >重组人IL-2 表达 多克隆抗体 白细胞介素-2 大肠杆菌 感染后 外周血单核细胞 全长cDNA 阳性克隆 cDNA克隆, |
| 修稿时间： | 2004-08-02 |
Cloning and expression of IL-29 cDNA in E.coli |
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| ZHANG Sheng quan,LU Yun xia,LUO Xin,XU Cong Zhen,CHEN Bing. Cloning and expression of IL-29 cDNA in E.coli[J]. The Journal of Practical Medicine, 2005, 21(1): 5-8 |
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| Authors: | ZHANG Sheng quan LU Yun xia LUO Xin XU Cong Zhen CHEN Bing |
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| Affiliation: | ZHANG Sheng quan,LU Yun xia,LUO Xin,XU Cong Zhen,CHEN Bing. Department of Biochemistry and Molecular Biology,Anhui Medical University,Hefei 230032,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Interleukins Cloning molecular Inclusion body Multiclonal antibody |
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