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乙肝病毒X蛋白通过激活JAK2/STAT3信号通路调节肾小管上皮细胞凋亡
作者姓名:何平  李丹  李德天  冯国和
作者单位:1.中国医科大学附属盛京医院  1肾内科,2感染科,辽宁,沈阳,110004
基金项目:辽宁省教育厅科学研究一般资助项目(No.L2013295);中国医科大学附属盛京医院院内课题资助项目(No.MB66)
摘    要:目的:观察乙肝病毒X蛋白(HBx)对肾小管上皮细胞凋亡的作用,并探讨其在乙型病毒肝炎相关性肾炎(HBVGN)发病中的分子机制。方法:将构建好的HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染至体外培养的人肾近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)中。Westernblotting法检测转染后目的蛋白的表达及JAK2/STAT3信号通路的活化。细胞免疫荧光检测STAT3及p-STAT3表达水平。CCK-8法检测细胞增殖活性。Hoechst33342染色观察细胞的形态学改变。透射电镜观察细胞的超微结构及凋亡。AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:转染目的基因HBx后,p-JAK2及p-STAT3表达水平均显著增加;同时,细胞增殖明显受抑。透射电镜、Hoechst33342染色及AnnexinV/PI双染流式细胞术检测发现HBx促进HK-2细胞凋亡。AG490(JAK2/STAT3信号通路阻断剂)孵育后能够部分阻断JAK2/STAT3信号通路,减少HBx所致细胞凋亡。结论:HBx通过激活JAK2/STAT3信号通路导致肾小管上皮细胞凋亡,可能参与了HBV直接损伤肾组织的致病机制。

关 键 词:细胞凋亡  乙肝病毒X蛋白  JAK2/STAT3 信号通路  HK-2细胞  AG490  
收稿时间:2013-10-30
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