| 基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体及单抗特性分析 |
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| 作者姓名： | 张志方 张春艳 潘敬运 林学颜 |
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| 作者单位： | 中山大学中山医学院生理学教研室,广东,广州,510089;中山大学中山医学院免疫学教研室,广东,广州,510089 |
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| 摘 要： | 目的:基因免疫制备抗人BLyS单克隆抗体并分析其免疫学特性。方法:将人BLyS基因克隆到真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3/hBLyS,用其免疫BALB/c鼠,取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,用ELISA法筛选阳性克隆,用免疫印迹和流式细胞技术进一步鉴定抗体的特异性,用双向免疫扩散鉴定单克隆抗体的类别。结果:重组质粒双酶切结果和DNA序列测定结果表明,pcDNA3/hBLyS重组质粒含有目的基因;ELISA、免疫印迹、流式细胞仪和双向免疫扩散等实验结果表明,9c10杂交瘤细胞株产生的单克隆抗体可以特异性结合IFN-γ激活的人T淋巴细胞膜表面BLyS蛋白的膜外区,属于IgG1亚类。结论:获得了能够特异性结合人T淋巴细胞上BLyS蛋白膜外区的单克隆抗体,为进一步研究人BLyS与自身免疫性疾病的关系提供了条件。
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| 关 键 词： | B淋巴细胞激活因子 质粒 抗体 单克隆 |
| 文章编号： | 1000-4718(2002)06-0625-05 |
| 收稿时间： | 2001-04-10 |
| 修稿时间： | 2002-01-04 |
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