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siRNA抑制HPV18 E6基因及其对HeLa细胞凋亡的影响
引用本文:危敏,马文丽,张宝,孙朝晖,郑文岭. siRNA抑制HPV18 E6基因及其对HeLa细胞凋亡的影响[J]. 基础医学与临床, 2006, 26(10): 1112-1117
作者姓名:危敏  马文丽  张宝  孙朝晖  郑文岭
作者单位:南方医科大学,分子生物学研究所,广东,广州,510515;华南基因组研究中心,广东,广州,510800
基金项目:广东省广州市科技攻关项目
摘    要:目的研究特异小干扰RNA(sm all interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒(hum an pap-illom avirus,HPV)18型E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响。方法针对HPV18E6基因设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,利用L ipofectam ineTM2000脂质体转染HeLa细胞,在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA。针对转染后不同时间点采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR测定HPV18E6 mRNA变化。结果转染siRNA后细胞活力受到显著抑制(P<0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,72 h的凋亡率达到55.8%。RT-PCR结果显示,细胞转染24、48和72 h后HPV18E6 mRNA分别减少了57%、78%和40%,而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著。结论siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa细胞内HPV18E6基因的表达,从而可诱导肿瘤细胞凋亡。

关 键 词:siRNA  HeLa细胞  HPV18 E6基因  凋亡
文章编号:1001-6325(2006)10-1112-06
收稿时间:2005-11-08
修稿时间:2006-03-22

siRNA inhibits HPV18 E6 gene and its effect on the apoptosis of HeLa cells
WEI Min,MA Wen-li,ZHANG Bao,SUN Zhao-hui,ZHENG Wen-ling. siRNA inhibits HPV18 E6 gene and its effect on the apoptosis of HeLa cells[J]. Basic Medical Sciences and Clinics, 2006, 26(10): 1112-1117
Authors:WEI Min  MA Wen-li  ZHANG Bao  SUN Zhao-hui  ZHENG Wen-ling
Affiliation:1. Institute of Molecular Biology, Southern Medical University, Guangghou 510515 ; 2. Southern China Genomics Research Center, Guangzhou 510800, China
Abstract:
Keywords:siRNA  HeLa cells  HPV18 E6 gene  apoptosis
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