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miR-542-5p 通过靶向结合 ENSA 抑制肝细胞癌增殖、 迁移和侵袭 #br#
作者姓名:代汉莉  王国华  徐向勇
作者单位:1.武汉市第九医院检验科 武汉市, 430081 武汉钢铁 (集团) 公司第二职工医院;2.肿瘤科,;3.检验科 武汉市, 430085
基金项目:湖北省自然科学基金 (No. 2017CFL083)
摘    要:目的 探讨 miR-542-5p 靶向结合 ENSA 对肝细胞癌增殖、 迁移和侵袭的影响。 方法 通过GSE36915 数据矩阵分析 miR-542-5p 在肝癌组织和癌旁组织表达情况, 构建 miR-542-5p 过表达肝癌细胞HepG2 和 Hep3B 细胞系并使用 RT-PCR 验证, 采用 CCK-8、 划痕、 Transwell 法检测细胞增殖、 迁移和侵袭能力; 使用 miR-542-5p 过表达 Hep3B 细胞系建立体内裸鼠移植瘤, 观察移植瘤体积变化和重量变化, 使用RT-PCR 检测移植瘤 miR-542-5p 水平。 通过 GEO2R 分析 GSE101728、 GSE7642 的差异基因, 使用 miRWalk在线预测 miR-542-5p 的靶基因, 筛选符合以上条件的基因得到 ENSA; 通过 TCGA 肝癌数据分析 ENSA 在肝癌组织和癌旁组织的表达情况, RT-PCR 检测 miR-542-5p 过表达 HepG2 和 Hep3B 细胞 ENSA 水平, 并在miR-542-5p 过表达 HepG2 和 Hep3B 细胞系中转染 ENSA 过表达质粒, 使用上述相同方法检测细胞增殖、 迁移和侵袭能力。 结果 miR-542-5p 在肝癌组织中表达水平显著低于癌旁组织 ( P< 0. 01), miR-542-5p 过表达 HepG2 和 Hep3B 细胞系的光密度 (A 值) 和相对细胞侵袭数均明显低于其阴性对照 ( miR-NC) ( P< 0. 01), 而划痕宽度明显高于其 miR-NC (P< 0. 01); 裸鼠移植瘤实验结果显示 miR-542-5p 过表达 Hep3B 细胞瘤的体积和重量明显低于 miR-NC ( P< 0. 01)。 ENSA 在肝癌组织中表达水平显著高于癌旁组织 ( P < 0. 01) 且 ENSA 促进肝癌进展; miR-542-5p 过表达 HepG2 和 Hep3B 细胞系中 ENSA 蛋白表达显著降低于其阴性对照 (miR-NC) (P< 0. 01); miR-542-5p + ENSA 双过表达 HepG2 和 Hep3B 细胞系的 A 值和细胞侵袭数均明显高于其 miR-542-5p 过表达细胞 (P< 0. 01), 而划痕宽度明显低于其 miR-542-5p 过表达细胞 ( P< 0. 01)。 结论 miR-542-5p 可通过靶向抑制 ENSA 表达抑制肝细胞癌细胞增殖、 迁移和侵袭。

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