| 腺相关病毒介导RNA干扰抑制EB病毒潜伏膜蛋白1基因表达 |
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| 引用本文： | 刘雄,李湘平,彭英,李刚,张宝,李晓华,周立辉. 腺相关病毒介导RNA干扰抑制EB病毒潜伏膜蛋白1基因表达[J]. 中国耳鼻咽喉头颈外科, 2006, 13(11): 762-765 |
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| 作者姓名： | 刘雄 李湘平 彭英 李刚 张宝 李晓华 周立辉 |
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| 作者单位： | 广州市南方医科大学南方医院耳鼻咽喉科,广东,广州,510515;广州中山大学第二附属医院神经内科,广东,广州510515;广州市南方医科大学分子生物教研室,广东,广州,510515;南昌解放军第九四医院耳鼻咽喉科,江西,南昌330002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;广东省科技计划公关项目 |
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| 摘 要： | 目的构建针对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)潜伏膜蛋白1(latent membrane protein 1,LMP-1)的特异性发夹状RNA(small hairpin RNA,shRNA)干扰序列的重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体(rAAV-shRNA- LMP-1),介导其体外表达并鉴定其生物活性。方法设计针对EBV-LMP-1的特异性shRNA干扰序列,采用分子克隆的方法,将干扰序列及U6启动子插入pAAV-2质粒中,采用无需包装辅助病毒的双质粒共转染方法制备rAAV-shRNA-LMP-1,测定其滴度及感染效率,RT- PCR鉴定目的基因的抑制效率。结果以rAAV-EGFP 5×10~4v．g(Virus genome,病毒基因组数),细胞转染C666-1细胞,转染效率大于95%,PT-PCR鉴定rAAV- shRNA-LMP-1以5×10~4v．g/细胞转染C666-1后目的基因抑制效率大于90%。结论通过rAAV介导RNA干扰能有效抑制LMP-1基因表达,为进一步研究肿瘤基因治疗,尤其是动物实验奠定了基础。
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| 关 键 词： | 疱疹病毒4型 人 RNA干扰 鼻咽肿瘤 基因 肿瘤抑带 |
| 收稿时间： | 2005-12-21 |
| 修稿时间： | 2005-12-21 |
Adeno-associated virus-mediated RNA interference inhibiting expression of Epstein-Barr Virus-encoded latent membrane protein 1 and Its biological activity in vitro |
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| LIU Xiong,LI Xiangping,PENG Ying,LI Gang,ZHANG Bao,LI Xiaohua,ZHOU Lihui. Adeno-associated virus-mediated RNA interference inhibiting expression of Epstein-Barr Virus-encoded latent membrane protein 1 and Its biological activity in vitro[J]. Chinese Archives of Otolaryngology-Head and Neck Surgery, 2006, 13(11): 762-765 |
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| Authors: | LIU Xiong LI Xiangping PENG Ying LI Gang ZHANG Bao LI Xiaohua ZHOU Lihui |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Herpesvirus4,Human RNA Interference Nasopharyngeal Neoplasms Genes, Tumor Suppressor |
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