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新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良
引用本文:钱凯,唐琳俊,王希,杨坤,张开鑫,钱腾达,马涛,石晶,李立新.新生大鼠原代小胶质细胞分离培养方法的改良[J].临床神经外科杂志,2019,16(1):1-5.
作者姓名:钱凯  唐琳俊  王希  杨坤  张开鑫  钱腾达  马涛  石晶  李立新
作者单位:南京医科大学第一附属医院神经外科,210029 南京;安徽省芜湖市第二人民医院神经外科;南京脑科医院神经外科,210029 南京
基金项目:国家自然科学基金;江苏省科教强卫工程医学重点人才研究基金;江苏省兴卫工程医学重点人才项目
摘    要:目的研究改良体外小胶质细胞分离培养的方法及效果。传统法存在动物用量大、成本高且细胞培养时间长等局限。方法结合消化试剂组合和手摇震荡法培养分离小胶质细胞;同时采用Iba-1免疫荧光法进行细胞鉴定和纯度分析,台盼蓝染料法进行活力检测以及脂多糖刺激比较不同状态的小胶质细胞。结果改良法可在4 d内稳定获得小胶质细胞> 1. 0×10~6个/60 mm培养皿,纯度≥98%,活力> 98%,较传统法在动物用量、总成本和培养时间分别减少了2、3. 2、1. 5倍。结论改良法可减少动物用量、降低成本,缩短细胞培养时间;为研究小胶质细胞的生物学功能和中枢神经系统疾病机制建立了一种稳定、简便、高效的细胞模型。

关 键 词:小胶质细胞  原代培养  新生大鼠

Modified method for cultivating primary microglia of neonatal rat
Institution:(Department of Neurosurgery,First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing 210029,China)
Abstract:QIAN Kai;TANG Lin-jun;WANG Xi(Department of Neurosurgery,First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University,Nanjing 210029,China)
Keywords:microglia  primary culture  neonatal rat
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