建立2D-HPLC同时检测钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的方法

目的 建立二维高效液相色谱法（2D-HPLC）同时检测钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱四种钩藤生物碱含量的方法。方法 采用Aston SC2（3.5 mm×25 mm，5 μm）一维色谱柱，Aston SH C₁₈（3.5 mm×10 mm，5 μm）中间色谱柱，Aston SCB（4.6 mm×125 mm，5 μm）分析色谱柱，一维流动相为CAA-1，分析流动相为BPI-1∶MPI-1∶OPI=45∶14∶41，流速1.0 mL/min，柱温40℃，检测波长254 nm，进样量500 μL，分析时间9.5 min。结果 钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱线性范围分别为9.77~10 000.00 ng/mL（r=0.999 6）、10.74~11 000.00 ng/mL（r=0.999 7）、10.74~11 000.00 ng/mL（r=0.999 7）、10.74~11 000.00 ng/mL（r=0.999 6），精密度、稳定性和重复性相对标准偏差（RSD）<5.00%，准确度为95.20%~104.01%，方法回收率为93.63%~101.38%。结论 建立的2D-HPLC同时检测钩藤中四种生物碱含量的方法简单准确，可作为钩藤药材质量控制的新方法。