兔膝关节软骨细胞的分离培养及形态学特征**☆ |
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引用本文: | 胡波,胡志俊,唐德志,王世伟,王拥军,张有为.兔膝关节软骨细胞的分离培养及形态学特征**☆[J].中国神经再生研究,2010,14(46):8555-8558. |
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作者姓名: | 胡波 胡志俊 唐德志 王世伟 王拥军 张有为 |
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作者单位: | 上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院骨伤科,上海中医药大学附属龙华医院康复科,上海中医药大学脊柱病研究所,上海中医药大学附属龙华医院骨伤科 |
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摘 要: | 背景:软骨细胞是软骨破坏过程中的靶细胞,也是分泌炎性细胞因子的主要细胞之一,体外分离培养骨关节炎软骨细胞存在难度。
目的:对兔膝关节软骨细胞进行分离和培养,观察兔软骨细胞的形态学特性。
方法:4周龄新西兰白兔采用机械-酶消化法,通过调整胰蛋白酶和Ⅱ型胶原酶的浓度及消化时间来获得较纯的关节软骨细胞,传代培养。通过倒置相差显微镜下观察细胞形态、绘制生长曲线、苏木精-伊红染色、阿利新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫荧光染色对细胞进行鉴定。
结果与结论:原代培养的软骨细胞以多角形或三角形为主,传代3次后出现反分化。形态学、免疫荧光染色显示细胞培养3代以内可以保持表型的稳定,90%以上的软骨细胞维持多角形或三角形,核为圆形或椭圆形。苏木精-伊红阳性染色为细胞核呈紫蓝色,软骨细胞基质红染,胞浆及细胞周围有紫红色、阿利新蓝染色可见细胞浆和胞膜呈深蓝色、Ⅱ型胶原免疫荧光染色可见胞浆和胞膜清晰绿色荧光,细胞核区域未见明显绿色荧光。结果提示,实验成功建立了软骨细胞分离、培养体系,且3代以内90%以上的软骨细胞生长良好。
关键词:兔;关节软骨;软骨细胞;细胞分离;细胞培养;组织构建
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关 键 词: | 兔关节软骨:软骨细胞 细胞分离 细胞培养 |
收稿时间: | 8/2/2010 12:00:00 AM |
修稿时间: | 8/2/2010 12:00:00 AM |
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